葛根不同炮制品止瀉作用研究*

★　鐘凌云　馬冰潔　龔千鋒　(江西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院　南昌 330004)

葛根不同炮制品止瀉作用研究*

★鐘凌云*第一作者：鐘凌云(1971—)，女，教授，博士生導(dǎo)師。研究方向：中藥炮制機理及飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。E-mail：ly1638163@163.com。馬冰潔龔千鋒(江西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院南昌 330004)

摘要：目的：研究并比較葛根生品、麩煨葛根及清炒葛根的止瀉作用，為葛根炮制品的臨床用藥提供客觀實驗依據(jù)。方法：采用胃排空及小腸推進率實驗結(jié)合腹瀉指數(shù)的測定，研究葛根生品、麩煨葛根及清炒葛根的止瀉作用。結(jié)果：與空白組比較，葛根生品、麩煨葛根及清炒葛根在胃排空試驗、小腸推進率及腹瀉指數(shù)測定試驗中均具有極顯著性差異(P<0.01)，各樣品隨給藥劑量的增加，胃內(nèi)殘留率呈增強趨勢、小腸推進率呈減弱趨勢、腹瀉指數(shù)呈降低趨勢；而樣品同劑量之間比較，胃內(nèi)殘留率由高到低為：麩煨葛根>清炒葛根>葛根生品，小腸推進率由高到低為：葛根生品>清炒葛根>麩煨葛根；腹瀉指數(shù)由低到高：麩煨葛根>清炒葛根>葛根生品。結(jié)論：麩煨葛根止瀉作用最強，結(jié)果為麥麩煨制葛根的臨床應(yīng)用提供試驗依據(jù)。

關(guān)鍵詞：葛根；麩煨葛根；清炒葛根；止瀉

葛根為豆科植物野葛Puerarialobata(wilId.) Ohwi的干燥根，有升陽止瀉、透疹止渴、解肌退熱等功效，可用于治療泄瀉等癥[1-3]。葛根為通表藥物，古人認為葛根“煨熟則散性全無，可以厚腸止瀉”[4]。葛根炮制方法在唐代有“蒸食之”的記載，明代出現(xiàn)炙黃，微炒、干煮法等，清代首次提出煨熟用。目前葛根主要的炮制方法有生用和煨制等，實際生產(chǎn)中又以麥麩煨法居多[5]。從葛根炮制的歷史沿革可以看出，葛根也可以清炒法進行炮制，有研究表明，葛根煨制和清炒品所含的總黃酮含量均較生品有增加，其中麥麩煨制葛根含量多于清炒葛根[6]。本文對葛根生品、麩煨葛根及清炒葛根的止瀉作用進行了比較研究，為揭示麩煨葛根炮制機理、為葛根炮制品的臨床應(yīng)用提供試驗依據(jù)。

1實驗材料

1.1實驗動物ICR小鼠(SPF級)，體重19～21g，購買于湖南斯萊克景達實驗動物有限公司(合格證號NO43004700005554)，購買后在實驗室適應(yīng)性飼養(yǎng)3天后進行實驗。

1.2藥物及試藥葛根飲片(購買于樟樹天齊堂藥業(yè)，批號1310009)經(jīng)江西中醫(yī)藥大學(xué)葛菲教授鑒定為豆科葛屬多年生落葉藤本植物野葛Puerarialobata(wilId.)Ohwi的根羧甲基纖維素鈉(化學(xué)純)；奶粉；可溶性淀粉；活性炭粉；糖；番瀉葉(購買于北京同仁堂藥店)

1.3實驗溶液制備

1.3.1葛根不同炮制品試藥的制備葛根生品：葛根飲片打粉(過50目篩)，取三份各20g，加8倍量的水，連續(xù)回流提取2次，每次1.5 h，濾過，合并濾液，分別濃縮至50,100,200mL，即得葛根生品水煎液高、中、低三個劑量試藥。

麩煨葛根：熱鍋撒入麥麩，中火加熱至冒煙投入凈葛根飲片，不斷翻炒至黃色取出，篩去麥麩，放涼備用[7]，照葛根生品項下的方法操作，即得麩煨葛根水煎液高、中、低三個劑量試藥。

清炒葛根：凈葛根飲片，文火炒至稍帶焦斑[7]，放涼備用，照葛根生品項下的方法操作，即得清炒葛根水煎液高、中、低三個劑量試藥。

1.3.2半固體炭末營養(yǎng)煳制備羧甲基纖維素鈉10g，奶粉16g，糖8g，淀粉8g，活性炭3g，混合加水?dāng)嚢杈鶆颍瞥?00mL，精密吸取1 mL稱重為1.054g。

1.3.3番瀉葉混懸液制備取干燥葉片除去葉脈，精密稱量8g，加沸蒸餾水研和，再加冷蒸餾水配成8%的混懸液，濾過，即得。

2實驗方法與結(jié)果[8-9]

2.1胃排空及小腸推進率實驗

2.1.1試驗方法ICR小鼠，體重19～21g，雌雄各半，隨機分為10組，每組8只，1組為空白組，其他9組分別給予葛根生品、麩煨葛根和清炒葛根水煎液高、中、低三個劑量，0.2mL/只。灌胃給藥，每日1次，連續(xù)7d。

第7日禁食不禁水18h后末次給藥，1h后灌胃給予半固體炭末營養(yǎng)糊1 mL/只，15min后脫頸椎處死，剖腹取全部胃腸。自幽門切跡處取胃，拭干稱重，沿胃大彎剪開胃體，洗去胃內(nèi)容物后拭干，稱凈重。計算胃內(nèi)容物殘留率(%)=[(胃全重-胃凈重)/半固體營養(yǎng)糊]×100%；同時，自盲腸處取上述小鼠的腸，不加牽引平鋪于光滑白板上，分別量取自幽門括約肌至炭末營養(yǎng)糊前端及至盲腸前端的距離。計算小腸推進率(%)=(炭末營養(yǎng)糊推進距離/幽門至盲腸全長)×100%。

2.1.2胃殘留率及小腸推進率結(jié)果結(jié)果表明，葛根生品組、麩煨葛根組及清炒葛根組與空白組比較均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，同劑量相比，作用由強到弱為：麩煨葛根>清炒葛根>葛根，各樣品隨給藥劑量的增加胃內(nèi)殘留率呈增強趨勢、小腸推進率呈減弱趨勢，各劑量中麩煨葛根均對小鼠胃排空及小腸推進運動抑制作用最強,結(jié)果見表1。

表1　葛根生品、麩煨葛根及清炒葛根

注：**表示與空白組比較P<0.01，具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2.2對番瀉葉所致小鼠腹瀉的止瀉作用

2.2.1試驗方法ICR小鼠，體重19～21g，雌雄各半，隨機分為10組，每組8只，1組為空白組，其他9組分別給予葛根生品、麩煨葛根和清炒葛根水煎液高、中、低三個劑量，0.2mL/只。灌胃給藥，每日1次，連續(xù)3日。第3日禁食不禁水12 h后，分別灌胃給藥，末次給藥lh后分別以8%25℃番瀉葉混懸液0.5 mL/只，灌胃，將小鼠扣于燒杯下，燒杯下放置102中速定性濾紙，連續(xù)觀察6h，每h換一次濾紙。參考文獻記錄以下指標(biāo)：

(a)稀便率=稀便數(shù)/總便數(shù)

(b)稀便級：表示稀便的程度(以稀便污染濾紙形成污跡的直徑大小定級)

分為4級，標(biāo)準(zhǔn)如下：

級數(shù)1234污跡直徑(cm)<11~1.92~3>3

通過以上兩個指標(biāo)計算其腹瀉指數(shù)，其公式如下：

腹瀉指數(shù)=稀便率×稀便級

結(jié)果統(tǒng)計均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(S)表示，用組間t檢驗對數(shù)據(jù)進行分析統(tǒng)計。

生品組、麩煨葛根組及清炒葛根組與空白組比較均具有極顯著性差異(P<0.01)，在相同給藥劑量下，止瀉作用由強到弱為：麩煨葛根>清炒葛根>葛根生品，各樣品止瀉作用隨給藥劑量的增加呈增強趨勢,結(jié)果見表2。

麩煨葛根高劑量組與葛根高劑量組比較有極顯著性差異(P<0.01)，清炒葛根高劑量組與葛根高劑量組比較有顯著性差異(P<0.05)，麩煨葛根中劑量組與葛根中劑量組比較有顯著性差異(P<0.05)，麩煨葛根低劑量組與葛根低劑量組比較有顯著性差異(P<0.05)，結(jié)果見表2。

表2　葛根、麩煨葛根及清炒葛根的止瀉作用(n=8)

注：★與空白組比較，P<0.01；與葛根生品高劑量比較，■P<0.01，□P<0.05；與葛根生品中劑量比較，▼P<0.05；與葛根生品低劑量比較，●P<0.05。

3討論

實驗以葛根炮制后主要增強的藥效作用止瀉為考察指標(biāo)，探討并比較了葛根生品、麩煨葛根及清炒葛根的止瀉作用差異。結(jié)果表明葛根經(jīng)麥麩煨制后止瀉作用明顯增強，無論是高、中、低劑量均有極顯著或顯著性差異，經(jīng)炒制后盡管作用增強，但與葛根生品比較，僅在高劑量組給藥時有顯著性差異，表明了麥麩煨制葛根的科學(xué)性和合理性，驗證了古人 “煨法厚腸止瀉”的說法。而麩煨葛根止瀉作用增強的原因是否與葛根炮制后葛根素、大豆苷、大豆苷元等主要藥效成分含量的變化相關(guān)仍有待進一步考察和驗證。本試驗為麥麩煨制葛根作用機制的闡明、相關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立以及臨床擴大應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

參考文獻

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Study on the Antidiarrheal Effects of Processed Products ofPuerariaeLobataeRadix

ZHONG Ling-yun, MA Bing-jie, GONG Qian-feng

JiangxiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Nanchang330004,China.

Abstract:Objective:To provide experimental basis for clinical use of Puerariae Lobatae radix processing products by comparing the antidiarrheal effects of raw product, simmering by bran product and stir-frying product of Puerariae Lobatae radix. Methods:Gastric emptying, small intestinal propulsion rate test and diarrhea index were applied to determine the antidiarrheal effect of raw product, simmering by bran product and stir-frying product of Puerariae Lobatae radix. Results:Compared with blank group, the three samples of Puerariae Lobatae radix could extremely increase the gastric remnant rate, extremely decrease the rate of small intestine and the diarrhea index(P<0.01)with dose enhancement. Compared with the same dose, the order of the gastric remnant rate decrease, small intestinal propulsion increase and diarrhea index increase is simmering by bran product, stir-frying product and raw product of Puerariae Lobatae radix. Conclusion: Simmering by bran product of Puerariae Lobatae radix showed the best effect of antidiarrheal. The results providing a better understanding of the clinical use of Simmering by bran product of Puerariae Lobatae radix.

Key words:Raw Product of Puerariae Lobatae Radix；Simmering by Bran Product of Puerariae Lobatae Radix；Stir-frying Product of Puerariae Lobatae Radix；Antidiarrheal Effect

收稿日期：(2014-09-09)編輯：曾文雪

中圖分類號：R285.5

文獻標(biāo)識碼：A

基金項目：*國家“十二五”科技支撐計劃項目(2011BA104B05)；江西省主要學(xué)科學(xué)術(shù)和技術(shù)帶頭人培養(yǎng)計劃項目(20133BCB22006)；江西中醫(yī)藥大學(xué)校級專項(2012EX3002)。