頂空毛細管氣相色譜法測定拉夫替丁中的殘留溶劑

謝　所

(安徽省食品藥品檢驗研究院，安徽 合肥　230051)

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頂空毛細管氣相色譜法測定拉夫替丁中的殘留溶劑

謝所

(安徽省食品藥品檢驗研究院，安徽 合肥230051)

摘要：目的建立拉夫替丁中乙腈、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯、四氫呋喃、三氯甲烷、苯、吡啶與甲苯等9種有機溶劑殘留量的檢測方法。方法用頂空進樣毛細管氣相色譜法，F(xiàn)ID檢測器，DB-624(30.0 m×0.53 mm,3.0 μm)毛細管色譜柱，程序升溫，進樣口溫度220℃，檢測器溫度260℃。結果有機溶劑均完全分離，在所考察的濃度范圍內線性關系良好，r為0.998 5～0.999 9，平均回收率為97.0%～101.6%。結論該方法靈敏、準確、可靠，可用于拉夫替丁的質量控制。

關鍵詞：頂空毛細管氣相色譜法；拉夫替?。粴埩羧軇?/p>

拉夫替丁為H2受體阻滯藥，可持續(xù)控制胃酸分泌，主要用于胃潰瘍和十二指腸潰瘍[1]。該原料藥目前國內國有三家生產(chǎn)企業(yè)，各生產(chǎn)企業(yè)因工藝不同所涉及的溶劑也各不相同，表現(xiàn)在各自執(zhí)行的檢測標準中溶劑殘留的檢驗項不論是溶劑的種類還是檢測方法都有較大差異，且三家生產(chǎn)企業(yè)的生產(chǎn)工藝流程都較長，在合成過程中都使用了多種有機溶劑，這些溶劑會對人體的健康和環(huán)境造成危害，根據(jù)我所標準提高任務中征集到的其中2家不同企業(yè)的拉夫替丁合成工藝資料，主要涉及到9種有機溶劑，按照人用藥品注冊技術要求國際協(xié)調會(ICH)的指導原則[2]，這些殘留溶劑必須予以控制。本文參考相關文獻[3-11]，采用頂空毛細管氣相色譜法，以二甲亞砜為溶劑，同時測定9種有機溶劑的殘留量，操作簡便、結果可靠。

1儀器與試劑

1.1儀器美國Agilent7890N氣相色譜儀，氫火焰檢測器，CTC PAL頂空進樣器，Agilent DB-624毛細管色譜柱(30 m× 0.53 mm，3.00 μm)，瑞士梅特勒 XS205電子天平。

1.2試劑拉夫替丁(樣品①：由安徽貝克聯(lián)合制藥有限公司提供，批號1003001、1011001、1106001；樣品②：由四川新元制藥有限公司提供，批號100701、100702、100703)；二氯甲烷、三氯甲烷、苯、吡啶、甲苯均為分析純，正己烷、乙酸乙酯、乙腈、四氫呋喃、二甲亞砜均為色譜純。

2方法與結果

2.1色譜條件色譜條件：DB-624毛細管色譜柱(30 m× 0.53 mm，3.00 μm)；柱溫：35℃維持20 min，再以5 ℃·min-1的速率升溫至110℃，保持5 min；分流進樣，分流比為3∶1；進樣口溫度為220℃；檢測器：FID檢測器，檢測器溫度為260℃，頂空進樣，平衡溫度為80℃，平衡時間為30 min；載氣為N2，流速3.0 mL·min-1。

2.2對照品溶液與供試品溶液的配制

2.2.1對照品溶液的配制精密稱取甲苯111 mg、吡啶25 mg、苯0.25 mg、三氯甲烷7.5 mg、四氫呋喃90 mg、乙酸乙酯625 mg、正己烷36 mg、二氯甲烷75 mg、乙腈51 mg，于一相同250 mL量瓶中，加二甲亞砜稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液的儲備液。精密量取對照品溶液的儲備液10 mL，置100 mL量瓶中，加二甲亞砜稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 mL，置頂空瓶中，密封，作為對照品溶液。

2.2.2供試品溶液的配制取本品約0.25 g，精密稱定，置頂空瓶中，精密加二甲亞砜5 mL使溶解，密封，搖勻，作為供試品溶液。

2.2.3空白溶液精密量取二甲亞砜5 mL，置頂空瓶中，密封，作為空白溶液。

2.3系統(tǒng)適用性考察精密量取對照品溶液、供試品溶液和空白溶液各5 mL，分別置頂空瓶中，密封，按上述色譜條件進樣，記錄色譜圖，見圖1。

圖1色譜圖

注：1.乙腈；2.二氯甲烷；3.正己烷；4.乙酸乙酯；5.四氫呋喃；6.三氯甲烷；7.苯；8.吡啶；9.甲苯。

結果表明：9種殘留溶劑分離良好，二甲亞砜不干擾測定，各色譜峰理論板數(shù)均不低于8 000。

2.4線性關系考察精密量取對照品溶液的儲備液0.3、0.5、0.8、1.0、1.5、3.0、5.0 mL，分別置不同的10 mL量瓶中，用二甲亞砜稀釋至刻度，搖勻，按上述色譜條件進行檢測，記錄色譜圖，檢測結果見表1。

表1　9種溶劑回歸方程與線性關系考察結果

2.5精密度試驗精密量取同一對照品溶液6份，按“2.1”項下的色譜條件進樣，記錄色譜圖，9種溶劑分別為甲苯、吡啶、笨、三氯甲烷、四氫呋喃、乙酸乙酯、正己烷、二氯甲烷、乙腈峰面積的RSD分別為0.3%、1.9%、1.1%、2.1%、0.4%、0.6%、1.1%、1.1%、0.8%。

2.6重復性試驗按“2.2”供試品溶液制備項下制取供試品溶液共6份，按“2.1”項下的色譜條件進樣分析，批號為(100701)樣品中乙酸乙酯檢出，其含量為0.035%，RSD為1.2%；其余8種溶劑分別為乙腈、二氯甲烷、正己烷、四氫呋喃、三氯甲烷、苯、吡啶、甲苯均未檢出。

2.7準確度(回收率)試驗取已知溶劑含量的樣品(批號：1003001)約0.5 g，精密稱定，共6份，分別置10 mL量瓶中，每份精密加入對照品貯備液1 mL，加二甲亞砜稀釋至刻度，搖勻，按“2.2”分別制得供試品溶液和對照品溶液，精密量取對照品溶液和供試品溶液各5 mL，分別置頂空瓶中，立即密封，按“2.1”項下的色譜條件進行分析，計算回收率，甲苯、吡啶、笨、三氯甲烷、四氫呋喃、乙酸乙酯、正己烷、二氯甲烷、乙腈的平均回收率分別為101.5%、99.4%、100.2%、97.6%、101.6%、98.2%、97.0%、100.5%、98.5%，RSD 分別為1.4%、2.3%、1.8%、1.8%、0.7%、2.1%、0.9%、0.5%、0.7%。

2.8檢測限試驗分別取9種有機溶劑適量，精密稱定，以二甲亞砜為溶劑，制程適當濃度的溶液，在上述色譜條件下測定，以信噪比S/N=3計算檢測限，結果乙腈、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯、四氫呋喃、三氯甲烷、苯、吡啶與甲苯檢出限分別為0.4、1.1、0.000 014、0.6、0.4、3.0、0.07、0.2、0.089 mg·L-1。

2.9樣品含量測定取不同批號的樣品六批(批號分別為1003001、1011001、1106001、100701、100702、100703)約0.25 g，精密稱定，分別置頂空瓶中，各精密加二甲亞砜5 mL使溶解，密封，作為供試品溶液；取精密度項下溶液作為對照品溶液，按“2.1”項下的色譜條件進行分析，結果見表2。

表2　殘留溶劑測定結果

3結果與討論

色譜柱的確定，由于拉呋替丁生產(chǎn)工藝中用到大量的有機溶劑，為了較好的分離各殘留溶劑，實驗中用了不同極性不同生產(chǎn)廠家的毛細管柱進行測定比較，如HP-1、HP-5、HP-INNO-Wax、DB-624等，結果用HP-1、HP-5，三氯甲烷與四氫呋喃難以分離，甚至出現(xiàn)重疊峰，用HP-INNOWax色譜柱，雖然吡啶峰形及響應值有所提高，但部分組分未能檢出，用DB-624毛細管后，峰形較佳，各峰分離較好。

柱溫及其他色譜條件的選擇，經(jīng)過反復試驗，最終確定最佳的柱溫、頂空溫度及頂空平衡時間，使其達到最佳的分離效果。

苯、吡啶和三氯甲烷在本次擬定方法的中，雖然響應值稍低，但檢出信號均能滿足實驗要求；三氯甲烷雖然通過ECD檢測器檢測能夠提高檢測的靈敏度，但部分組分不能檢出，為了經(jīng)濟、環(huán)保，本次實驗方法中未采用ECD為檢測器和FID為檢測器兩個系統(tǒng)，統(tǒng)一選擇應用范圍廣泛的FID為檢測器。

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收稿日期：(2015-02-03，修回日期：2015-05-29)

doi:10.3969/j.issn.1009-6469.2015.11.013