不育男性精液白細胞增高對精子質量影響臨床研究

不育男性精液白細胞增高對精子質量影響臨床研究

蘇春霞1，王凌1*，王若竹2，白瑞平1，王秀梅1，王潔1，孟秀清1，韓果華1

(1.包頭市第四醫院，內蒙古 包頭014030；2.內蒙古自治區中醫院，內蒙古 呼和浩特010059)

精液是由5%的精子和95%精漿構成的復合液，主要為睪丸、附睪、精囊、前列腺、尿道球腺分泌的液體。精子由睪丸產生，是生殖細胞經一系列有絲分裂形成的，在附睪中未成熟的精子最終形成有動力的精子，整個過程需要70天。精漿的化學成分十分復雜，包含各種蛋白、酶類、激素、微量金屬元素等，是運送精子的載體，并為精子提供存活所需的能量和營養物質[1，2]。精液中有形成分除精子外，尚含少量白細胞(<1×106/ml)和生殖道脫落的上皮細胞等。為了探討男性不育患者精液白細胞增高對精液中精子主要參數[精子密度、精子活動率、精子(a+b)級活動力、精子畸形率]的影響，特進行此研究。

1資料與方法

1.1　研究對象

2012年1月-2013年12月來我院就診的男性不育患者，第二性征發育正常，未見睪丸、附睪及輸精管異常，無創傷及精索靜脈曲張，無性功能障礙史及遺傳性疾病家族史，身體健康，婚后正常性生活未避孕1年以上不育，年齡在22-46歲(32.04±4.62)，且女方檢查排除器質性病變者入選為實驗研究對象。

1.2　實驗方法

精液常規分析前，患者在70天內保持良好的生活習慣與休息，在禁欲3-5天后，通過手淫將全部精液排入無菌標本瓶中立即送檢，送檢過程中溫度保持在20-40℃，1 h內完成檢測。每一位患者進行兩次精液常規檢測，兩次間隔時間為3-5天，每一參數取其兩次平均值為本次實驗數據，所有操作嚴格按《全國臨床檢驗操作規程》第3版進行操作。白細胞計數采用正甲苯胺藍過氧化物酶染色法，用改良的Nenbaer血細胞計板進行計數。

1.3　分組

根據WHO定義，精液白細胞>1×106/ml診斷為精液白細胞癥。本實驗以1×106/ml為分界點，白細胞計數>1×106/ml視為精液白細胞增高，白細胞計數<1×106/ml視為白細胞正常。

1.4　統計學分析

2結果

精液白細胞增高組(n=65)與白細胞正常組(n=65)在精子密度、活動率、(a+b)級活動力、畸形率方面的差異有統計學意義(P<0.05)見表1。

表1　白細胞增高組與正常組精液主要參數比較

3討論

白細胞是免疫細胞，功能是吞噬微生物和機體本身衰老和死亡的細胞或碎片，對機體有重要的防御作用。白細胞含有過氧化物酶、彈性蛋白酶、溶菌酶以及白細胞降解產物γ-干擾素、白介素8、腫瘤壞死因子等。精液正常情況下含少量白細胞(<1×106/ml)，其中95%是中性粒細胞和巨噬細胞。在新陳代謝過程中白細胞產生活性氧(ROS)，使精漿在常態下含有低濃度的ROS，其可介導精子的高活躍性運動、獲能和頂體反映，并且男性生殖系統和精液中有完善的抗氧化系統，正常情況下，可以使ROS的產生和清除保持動態平衡[3]。當精液白細胞增高時，不但誘導發生主動免疫，還可以使白細胞特別是中性粒細胞和巨噬細胞激活增加，可釋放比未激活白細胞多100倍ROS[4]，因此破壞了原有的ROS產生和清除的動態平衡系統，同時大量的白細胞在附睪前列腺上皮侵潤，引起附屬性腺功能障礙，影響精子在生殖道中的運行和成熟。并且白細胞的降解產物γ-干擾素、白介素8、腫瘤壞死因子等可通過抑制細菌蛋白的生物合成和趨化作用，破壞精子的功能和成熟。

精液中白細胞在吞噬過程中可產生大量的ROS，ROS引起氧化應激，誘導細胞凋亡，并導致精子數量減少[4]，引起精子密度降低。Barraud-Lange等[5]分析了1955份精液樣體，發現白細胞計數增高與精子參數(包括密度)的降低存在明顯的相關性，這與本實驗白細胞增高組(58.86±16.412)和白細胞正常組(66.08±20.162)的精子密度差異有統計學意義(P<0.05)一致。也有報道稱白細胞增高可明顯致外源性ROS的產生，而精子的形態主要受外源性ROS影響，精液ROS的產生與正常形態精子比率有顯著負相關性[5]，即白細胞增高，正常精子形態減少，精子畸形率增高。Kobayashi等[6]討論了氧化劑前體物的氧化應激作用。亞致死量的氧化劑前體物誘導明顯的增加睪丸和附睪精子ROS脂質過氧化作用，使睪丸組織DNA損傷顯著增加，異常精子頭增加2-3倍，與本研究白細胞增高組(26.55±5.791)和白細胞正常組 (24.77±3.956)的精子畸形率差異有統計學意義(P<0.05)一致。

當炎癥發生時，由于中性粒細胞釋放彈性蛋白酶(NE)，NE刺激細胞產生自由基，發生脂質氧化導致精子膜功能障礙和膜酶損傷，并可產生毒素，對精子有一定程度損傷，甚至導致精子死亡，活動率降低。另外白細胞產生的ROS損傷精子質膜，降低精子活動率和受精能力，損傷精子DNA[7]，與本研究白細胞增高組(44.08±19.063)和白細胞正常組(49.54±6.692)的精子活動率差異有統計學意義(P<0.05)一致。也有報道稱男性不育患者精液中白細胞增高時,精子密度、活動率明顯下降，精子向前運動的速度受抑制，活動力降低，導致精子細胞結合受阻，從而影響受精過程[8]。精液中大量的白細胞還可造成精子染色質異常和DNA的損傷，造成ATP生成減少，精子活動力下降[9]，與本研究白細胞增高組(23.32±6.657)和白細胞正常組(25.40±4.026)精子(a+b)級活動力差異有統計學意義(P<0.05)一致。

綜上所述，男性不育患者精液白細胞增高可致精子密度、活動率、(a+b)級活動力明細降低，畸形率明顯增高，打破了ROS的產生和清除保持的動態平衡，改變了精子生存的正常環境，從而影響精液質量。精液質量是評價男性生育功能的重要指標，對人類繁衍具有重要意義。因此對男性不育患者應該關注精液中白細胞增高對精子質量的影響，為此采取相應的檢查和治療措施。

參考文獻：

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[3]Shama RK，Pasqualotto AE，Nelson DR，et al.Relationship between seminal white blood cell counts andoxidative stress in mentreated at an infertility clinic[J].J Androl，2001，22(4)：575.

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[5]Barraud-Lange V，Pont JC，Ziyyat A，et al.Seminal leukocytes are good samaritans for spermatozoa[J].Fertil-Steril，2011，96(6)：1315.

[6]Kobayashi H，Gil-Guzman E，Mahran AM，et al.Quality control of reactive oxygen species measurement by luminol-dependent chemiluminescence assay[J].J Andro，2001， 22(4)：568.

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[8]楚雅玲，岳林.精液中白細胞含量與精液分析中各參數相關性分析[J].中原醫刊，2003，30(21)：48.

[9]龔平，周志蘭，王昌富.精液中白細胞與精子動態參數相關研究[J].中國優生與遺傳雜志，2007，15(5)：102.

收稿日期：(2014-01-12)

通訊作者*

文章編號：1007-4287(2015)04-0665-02