地塞米松對急性肺損傷患者血漿和支氣管肺泡灌洗液APN、TNF-α、IL-10水平的影響

王剛，李來傳，史有奎，王國君，陳京霞

(1濰坊醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，山東濰坊261031;2昌樂縣人民醫(yī)院)

急性肺損傷(ALI)是由非心源性的多種肺內(nèi)外因素所導(dǎo)致的急性進(jìn)行性缺血性呼吸衰竭［1］，病死率達(dá)35%～40%［2］。脂連素(APN)是由脂肪細(xì)胞分泌的一種蛋白質(zhì)激素，最近的研究發(fā)現(xiàn)其具有多效性抗炎和血管保護(hù)作用［3，4］。國外文獻(xiàn)報道，低APN血癥可增加ALI發(fā)生的風(fēng)險［5］。Summer等［6］的研究表明，APN有助于維持肺的免疫穩(wěn)態(tài)。地塞米松是臨床最常用且療效可靠的糖皮質(zhì)激素(GC)，能降低肺毛細(xì)血管的通透性、減輕肺間質(zhì)水腫、增加肺表面活性物質(zhì)。因此，我們觀察了地塞米松對ALI患者血漿和支氣管肺泡灌洗液(BALF)中APN、腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白細(xì)胞介素10(IL-10)水平的影響。現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2011年10月～2013年10月濰坊醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院就診的ALI患者48例，均符合1994年歐美ARDS聯(lián)席會議提出ALI的診斷標(biāo)準(zhǔn)。其中男36例，女12例;年齡23～72(40.5±9.2)歲;將患者隨機(jī)分為ALI組和干預(yù)組各24例。選取同期健康體檢者24例作為對照組，其中男19例，女5例;年齡28～78(43.0±12.6)歲。各組性別、年齡均具有可比性(P均＞0.05)。各組均排除各種慢性阻塞性肺疾病、肺動脈高壓、各種心臟病、高血壓及惡性腫瘤，患者及家屬均知情同意。

1.2 治療方法 ALI患者均給予抗炎、機(jī)械通氣等常規(guī)治療。干預(yù)組常規(guī)治療的基礎(chǔ)上靜滴地塞米松10 mg/d，療程3 d。

1.3 BALF的采集與處理 應(yīng)用纖支鏡Olympus-BFP40將其前端楔入右肺中葉內(nèi)外側(cè)段支氣管開口處，注入37℃的生理鹽水30～50 mL，以25～100 mmHg負(fù)壓吸引。灌洗共2次，總量60～100mL，回收35%～60%。取10 mL的BALF以3 000 r/min離心10 min，取上清于-20℃冰箱中保存。

1.4 血漿和BALF中APN、IL-10及TNF-α檢測采集3組空腹靜脈血，采用酶聯(lián)免疫吸附法分別檢測血漿和BALF中的APN、IL-10及TNF-α，嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以±s表示，組間比較采用單因素方差分析。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

3組血漿和BALF中APN、TNF-α、IL-10水平比較，見表1。

3 討論

多數(shù)學(xué)者認(rèn)為，ALI是多種炎癥介質(zhì)反應(yīng)及相互作用的結(jié)果，且細(xì)胞因子之間并非各自孤立而是相互聯(lián)系、相互影響并形成復(fù)雜的“細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)”和“細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)”。一旦這些細(xì)胞因子之間的動態(tài)平衡被打破，則會發(fā)生炎癥介質(zhì)失控性釋放，導(dǎo)致肺組織甚至全身靶器官組織損傷。近年有文獻(xiàn)指出，APN可能通過調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度、增強(qiáng)脂質(zhì)氧化反應(yīng)、變構(gòu)激活腺苷酸激酶、調(diào)節(jié)AMP/ATP比值等起到保護(hù)內(nèi)皮、抗炎、抗氧化作用，降低ALI的嚴(yán)重程度［7，8］。此外，在ALI發(fā)生、發(fā)展過程中，APN作用于巨噬細(xì)胞，一方面能調(diào)節(jié)某些激酶和p38的磷酸化，使瘦素引起的TNF-α生成減少，起到抗炎作用;另一方面，APN結(jié)構(gòu)與TNF-α類似，兩者可以互為受體拮抗劑，在脂肪組織中相互抑制各自的基因表達(dá)產(chǎn)物，在肌肉組織中互相抑制對方的功能。佘其美等［9］研究提示，TNF-α是通過降低PPARγ2 mRNA表達(dá)使APN表達(dá)下降。研究表明，IL-10能抑制前炎癥細(xì)胞因子相應(yīng)基因的轉(zhuǎn)錄，并影響前炎癥細(xì)胞因子mRNA的穩(wěn)定性，從而導(dǎo)致細(xì)胞因子水平下降［9］。

表1 3組血漿和BALF中APN、TNF-α、IL-10水平比較(n=24，±s)

表1 3組血漿和BALF中APN、TNF-α、IL-10水平比較(n=24，±s)

注:與對照組同標(biāo)本比較，*P＜0.05，＊＊P＜0.01;與ALI組同標(biāo)本比較，#P＜0.05，##P＜0.01。

組別 APN(ng/mL) TNF-α(ng/L) IL-10(ng/L) ALI 組血漿 8.20±1.20* 447.43±29.40＊＊ 36.16±7.29＊＊BALF 1.40±0.20 273.66±39.07＊＊ 37.32±3.94＊＊干預(yù)組血漿 13.10±1.80*# 336.14±67.44＊＊# 25.17±5.34＊＊# BALF 1.50±0.20 181.40±42.77＊＊# 24.31±2.19＊＊#對照組血漿 16.70±2.00 218.20±20.94 13.12±2.00 BALF 1.70±0.10 122.67±59.37 14.55±2.22

GC為多途徑抗炎藥物，其作用機(jī)制在于抑制核轉(zhuǎn)錄因子(NF-κB)與炎癥反應(yīng)控制基因上的κB位點(diǎn)結(jié)合，抑制炎癥細(xì)胞因子mRNA的轉(zhuǎn)錄，減少炎癥細(xì)胞因子的生成。有研究表明，應(yīng)用GC治療可明顯抑制ALI鼠NF-κB的激活，降低血漿IL-1β、TNF-α水平，對肺組織有明顯的保護(hù)作用［10］。本研究中，與對照組比較，ALI組和干預(yù)組血漿APN均降低，血漿和BALF中TNF-α、IL-10均升高，但是ALI組變化更明顯(P均＜0.05)。分析原因，可能與ALI發(fā)生、發(fā)展中復(fù)雜的炎癥反應(yīng)機(jī)制及地塞米松治療ALI過程中的劑量—效應(yīng)關(guān)系有關(guān)［11］。地塞米松能直接抑制TNF-α的產(chǎn)生，增加IL-10分泌，而TNF-α的降低可減弱對PPARYZ mRNA表達(dá)的抑制作用，則APN表達(dá)增加。

綜上所述，ALI患者血漿 APN降低，血漿和BALF TNF-α、IL-10均升高，地塞米松可降低患者上述指標(biāo)的變化。同時本研究干預(yù)組應(yīng)用的是小劑量地塞米松，與最近證實(shí)的小劑量GC即可發(fā)揮抗炎作用［12，13］這一理論一致。而關(guān)于不同劑量的地塞米松對APN表達(dá)的影響則需進(jìn)一步研究探討。

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