三硝基苯磺酸／乙醇灌腸液誘導大鼠潰瘍性結腸炎TLR4／NF-κB和PI3K／AKT／NF-κB信號通路的表達及電針的干預作用

張超賢，郭李柯，郭曉鳳

（1．新鄉醫學院第一附屬醫院消化內科，河南衛輝 453100；2．新鄉醫學院第一附屬醫院口腔內科，河南衛輝 453100；3．杭州市第六人民醫院肝病科，浙江杭州 310014）

潰瘍性結腸炎（ulcerative colitis，UC）的病因和發病機制與免疫功能紊亂有密切的聯系。促炎細胞因子上調，可誘導和促進炎癥發生，在UC的形成中起重要作用，而且這些細胞因子的表達和分泌量均與UC疾病的炎癥程度呈正相關。TNF-α和IL-1β是兩種重要的促炎細胞因子，通過免疫組化染色已證實TNF-α、IL-1β蛋白在UC腸黏膜細胞中呈高表達狀態［1-2］；核轉錄因子-κB（NF-κB）廣泛存在于各種細胞中，可調控多種基因、細胞因子及生長因子的轉錄表達，參與調控機體免疫應答、炎癥反應、細胞凋亡及腫瘤形成等多種生理和病理過程，與UC關系密切。國內外研究表明，NF-κB在UC患者機體內呈現過度激活狀態，導致并調控UC患者TNF-α、IL-1β等細胞因子過度和持續表達，從而參與了UC的發生和發展。toll樣受體4（TLR4）NF-κB和PI3K／AKT／NF-κB信號通路是活化NF-κB的兩條重要途徑［3-4］。電針對UC有良好的治療效果［5］，但這種作用是否與其阻斷 TLR4／NF-κB 和 PI3K／AKT／NF-κB 信 號 通路、抑制NF-κB活性及下游促炎細胞因子的表達有關尚不清楚。本研究以三硝基苯磺酸（TNBS）誘導大鼠 UC，以 TLR4單克隆抗體（TLR4mAb）和PI3K／AKT特異性抑制劑LY294002作為治療對照組，觀察電針對UC大鼠結腸黏膜病理組織學、TLR4／NF-κB和 PI3K／AKT／NF-κB通路和下游促炎細胞因子表達的影響，進一步探討電針治療UC的作用機制。

1 材料與方法

1．1 材料 成年雄性健康清潔級 Wistar大鼠240只，體質量180～220g（由新鄉醫學院實驗動物中心提供）。2、4、6-三硝基苯磺酸（TNBS，Sigma公司）；……