阿維菌素與其他3種藥劑復(fù)配對朱砂葉螨的聯(lián)合作用

付志能， 朱 秀， 魏敬懷， 杜曉英

（長江大學(xué)農(nóng)學(xué)院，荊州 434025）

阿維菌素與其他3種藥劑復(fù)配對朱砂葉螨的聯(lián)合作用

付志能， 朱 秀， 魏敬懷， 杜曉英*

（長江大學(xué)農(nóng)學(xué)院，荊州 434025）

室內(nèi)采用葉片殘毒法測定了阿維菌素、丁醚脲、噠螨靈和炔螨特對朱砂葉螨雌成螨的毒力及其復(fù)配劑的聯(lián)合作用。結(jié)果表明，以阿維菌素為主干藥劑，與其他3種殺螨劑復(fù)配對朱砂葉螨雌成螨的增效作用顯著，相同濃度下復(fù)配劑顯著優(yōu)于各單劑，其中，阿維菌素和丁醚脲（1∶1、1∶49）、阿維菌素和噠螨靈（1∶19、1∶29）、阿維菌素和炔螨特（1∶1、1∶2、1∶4、1∶39）增效作用顯著，共毒系數(shù)分別為350.9、488.4、465.9、582.5、349.7、350.5、436.1、452.6。阿維菌素與其他3種殺螨劑復(fù)配可有效克服或延緩害螨抗性的產(chǎn)生，并且可以提高藥效、降低成本，在害螨防治中極具應(yīng)用前景和開發(fā)潛力。

朱砂葉螨； 殺螨劑； 復(fù)配； 增效作用

朱砂葉螨［Tetranychus cinnabarinus（Boisduva1）］屬蛛形綱（Arachnida）蜱螨亞綱（Acari）真螨目（Acariformes）葉螨科（Tetranychidae），為多食性重要農(nóng)業(yè)害螨，在我國分布廣泛，是多種蔬菜、作物及棉花上為害嚴重而又很難防治的一種螨類。由于其繁殖力強、世代周期短、受藥機會多等特點，致使其極易產(chǎn)生抗藥性［1-2］。近些年來由于化學(xué)藥物的頻繁使用以及隨著轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的大面積推廣使朱砂葉螨對多種藥劑產(chǎn)生了抗藥性，導(dǎo)致該螨的防治極其困難，其抗藥性問題也比一般農(nóng)作物害蟲更為突出。但目前使用殺螨劑對害螨進行化學(xué)防治，仍是控制害螨發(fā)生為害，進行螨類綜合治理的重要手段［3-4］。

殺螨劑的合理復(fù)配是克服或延緩害螨抗性的有效措施之一，可以提高藥效、降低成本［5-6］。因此，殺螨劑的復(fù)配混用技術(shù)越來越重要。基于此背景，本研究以阿維菌素為主干藥劑，對其與丁醚脲、噠螨靈、炔螨特的復(fù)配效果進行了研究。

1 材料與方法

1.1 供試蟲源

朱砂葉螨雌成螨敏感品系，由西南大學(xué)何林老師提供，以盆栽新鮮豇豆苗飼養(yǎng)。飼養(yǎng)條件為溫度（25±1）℃，相對濕度60%～80%，光周期L∥D＝16 h∥8 h。采用大小一致、個體鮮活的雌成螨進行試驗。

1.2 供試藥劑

97.75 %阿維菌素原藥（石家莊市凱利達化工有限公司）；95%丁醚脲原藥（江蘇長青農(nóng)化股份有限公司）；96.5%噠螨靈原藥（湖北沙隆達股份有限公司）；90.1%炔螨特原藥（湖北仙隆化工有限公司）。

溶劑：丙酮（武漢市中天化工有限責(zé)任公司，分析純AR）。

乳化劑：吐溫80（國藥集團化學(xué)試劑有限公司，化學(xué)純CP）。

1.3 試驗方法

1.3.1 單劑和復(fù)配制劑的配制

單劑的配制：將供試藥劑用少許丙酮溶解配成母液，用0.2%吐溫80，按等比法稀釋成系列濃度，用于雌成螨的毒力測定。由單劑的LC50求出不同配比下混劑的理論LC50作為混劑濃度。

復(fù)配制劑的配制：將相同濃度的單劑溶液按設(shè)定的體積比混合，再用0.2%吐溫80稀釋至不同配比下混劑的理論LC50。混劑的配比分別為阿維菌素∶丁醚脲（1∶1、1∶5、1∶9、1∶29、1∶49、1∶69、1∶89、1∶99），阿維菌素∶噠螨靈（1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶9、1∶19、1∶29、1∶39、1∶49），阿維菌素∶炔螨特（1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶9、1∶19、1∶29、1∶39、1∶49）。

1.3.2 雌成螨毒力測定

本試驗毒力測定參考并改進Bala等［7］的葉片殘毒法，具體操作：在直徑9 cm的培養(yǎng)皿中加入煮好的0.2%瓊脂水，約2/3培養(yǎng)皿高度為宜，冷卻備用；取生長一致的新鮮豇豆葉片洗凈風(fēng)干，剪成直徑3 cm的圓形，備用；用1.3.1配制的系列濃度的單劑藥液處理葉片，對照組用5%的丙酮溶液（丙酮∶0.2%吐溫水＝1∶19）處理，用鑷子輕輕夾取剪好的豇豆葉片，在藥液中浸沒10 s后取出，放于白瓷盤中自然風(fēng)干，待葉片上的水分完全揮發(fā)后，葉背朝上輕輕貼在已經(jīng)凝固成形的瓊脂上，用0號毛筆接入生長一致、健康活潑的雌成螨，每片葉上接30頭，每個濃度處理4片圓葉。置于溫度為（25±1）℃，相對濕度60%～80%，光周期L∥D＝16 h∥8 h的生測實驗室內(nèi)，在顯微鏡下用10×目鏡統(tǒng)計24 h死亡數(shù)，用0號毛筆輕輕挑撥蟲體不動視為死亡，以對照藥劑死亡率小于10%為有效測定，并用對照死亡率進行校正。

1.3.3 復(fù)配劑對雌成螨的聯(lián)合作用評價

藥劑復(fù)配比例篩選時先采用共毒因子法［8-10］初步篩選出具有增效作用的復(fù)配比例，再根據(jù)死亡率設(shè)計濃度梯度求出線性回歸方程，參照Sun和Johnson［11］的共毒系數(shù)法進行評價。

共毒因子＝（實測死亡率－理論死亡率）/理論死亡率×100；

共毒因子＞20表示有增效作用；－20≤共毒因子≤20表示相加作用；共毒因子＜－20表示相減作用。

共毒系數(shù)＝（混劑實測毒性指數(shù)－混劑理論毒性指數(shù)）×100；

共毒系數(shù)80～120，為相加作用；大于120，為增效作用；小于80，為拮抗作用。

1.3.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析方法

采用Microsoft Excel和DPS軟件（Tukey法）進行統(tǒng)計分析，計算毒力回歸方程、致死中濃度（LC50）及相關(guān)參數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 單劑毒力測定結(jié)果

單劑毒力測定結(jié)果（表1）表明，各單劑對朱砂葉螨雌成螨的毒力存在較大的差異，阿維菌素、丁醚脲、噠螨靈、炔螨特的LC50分別為0.035、10.79、414.45、44.11 mg/L。

2.2 配伍篩選結(jié)果

在測定了供試螨對各單劑毒力反應(yīng)的基礎(chǔ)上，用共毒因子法測定阿維菌素與其他單劑之間的增效作用（表2）。在全部試驗的3個組合中，均有共毒因子大于20（具有增效作用）的組合，其中阿維菌素與丁醚脲1∶1、1∶49時的共毒因子分別為89.9、107.0，阿維菌素與噠螨靈1∶19、1∶29時的共毒因子分別為80.0、88.0，阿維菌素與炔螨特1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶9、1∶19、1∶39時的共毒因子分別為86.0、104.2、32.0、100.0、26.0、88.0、83.7。

2.3 配比選擇結(jié)果

選擇共毒因子遠大于20的組合進一步用共毒系數(shù)法測定不同配比組合的增效作用。由共毒系數(shù)（CTC）（表3）可知，所設(shè)配比中，阿維菌素和丁醚脲1∶1、1∶49共毒系數(shù)分別為350.9、488.4；阿維菌素和噠螨靈1∶19、1∶29共毒系數(shù)分別為465.9、 582.5；阿維菌素和炔螨特1∶1、1∶2、1∶4、1∶39共毒系數(shù)分別為349.7、350.5、436.1、452.6，均遠遠大于120，表明阿維菌素與其他3種藥劑復(fù)配之后有明顯的增效作用。阿維菌素與丁醚脲、噠螨靈、炔螨特復(fù)配對朱砂葉螨實驗室種群雌成螨的LC50值顯著低于丁醚脲、噠螨靈、炔螨特，同樣表明阿維菌素與丁醚脲、噠螨靈、炔螨特復(fù)配后對雌成螨的毒力大大增強。

表1 4種殺螨劑對雌成螨的毒力（24 h）Table 1 Toxicities of four acaricides against female adults ofTetranychus cinnabarinus（24 h）

表2 各復(fù)配組合對朱砂葉螨雌成螨共毒因子Table 2 Co-toxicity factors of different mixtures against female adults ofTetranychus cinnabarinus（24 h）

表3 不同配比對朱砂葉螨雌成螨共毒系數(shù)Table 3 Co-toxicity coefficients of different mixtures against female adults ofTetranychus cinnabarinus（24 h）

3 討論

室內(nèi)毒力測定結(jié)果表明，阿維菌素對朱砂葉螨雌成螨毒力極高，LC50為0.035 mg/L。阿維菌素是一種高效、廣譜的抗生素類殺蟲殺螨劑，由一組大環(huán)內(nèi)酯類化合物組成，與傳統(tǒng)農(nóng)藥有不同的作用機制，它有GABA（γ-氨基丁酸）激動劑的作用，刺激釋放GABA，而GABA對節(jié)肢動物的神經(jīng)傳導(dǎo)有抑制作用，使中毒昆蟲麻痹、癱瘓而死亡［12］，對螨類和昆蟲具有很好的胃毒和觸殺作用，是目前最優(yōu)良的殺螨劑，但單獨使用成本較高。丁醚脲是一種新型硫脲類殺蟲、殺螨劑，具有觸殺、胃毒、內(nèi)吸、熏蒸作用，且具有一定的殺卵效果。噠螨靈屬廣譜、高效噠嗪酮類殺蟲、殺螨劑，無內(nèi)吸性。炔螨特為廣譜有機硫殺螨劑，對成螨和若螨有特效，可用于防治大多數(shù)作物上的害螨，對多數(shù)天敵安全。這4種藥劑單劑的室內(nèi)毒力測定結(jié)果顯示，阿維菌素、丁醚脲、噠螨靈、炔螨特對朱砂葉螨雌成螨的毒力差異大，具有較好的復(fù)配利用基礎(chǔ)。

本試驗以阿維菌素為主干藥劑，與其他3種殺螨劑進行復(fù)配，計算不同復(fù)配比例的共毒因子，通過對共毒因子顯著大于20的復(fù)配劑進行室內(nèi)聯(lián)合毒力測定，結(jié)果顯示，并非所有組合復(fù)配劑的共毒系數(shù)均大于120。其中，阿維菌素和丁醚脲復(fù)配組合中，配比為1∶1和1∶49的組合，共毒系數(shù)均大于120；阿維菌素和噠螨靈復(fù)配組合中，配比為1∶19和1∶29的組合，共毒系數(shù)全部大于120；而阿維菌素與炔螨特復(fù)配組合中，只有1∶1、1∶2、1∶4、1∶39的組合，共毒系數(shù)大于120。雖然阿維菌素與炔螨特1∶19組合的共毒因子顯著大于20，但共毒系數(shù)卻小于120，并無增效作用。因此，利用共毒因子法測出具有增效作用的配比利用共毒系數(shù)法測定，其結(jié)果不一定具有增效作用，說明用單一評價方法來確定某一配比是否有增效作用以及由此來判定增效作用的大小是不嚴謹?shù)摹?/p>

農(nóng)藥復(fù)配劑的最佳配比篩選，主要依據(jù)復(fù)配劑間的毒力比較。常用的評價方法有Bliss法、Finney法、共毒系數(shù)法等。但如果兩單劑間毒力相差太大，由以上方法所確定的配比在配制中就存在一定的困難［2］。本研究中，因阿維菌素與丁醚脲、噠螨靈、炔螨特對朱砂葉螨的毒力存在較大的差異，本試驗采用阿維菌素與丁醚脲、噠螨靈、炔螨特的配比分別以1∶1、1∶29、1∶1為基點，共設(shè)計8～9種配比，首先用共毒因子法對大量復(fù)配組合進行增效作用定性篩選，再用孫云沛法對有增效作用的復(fù)配組合進行定量分析，以確定最佳配方。這種篩選方法［13］考慮到復(fù)配組合不同配比的增效情況，比根據(jù)一個配比的共毒系數(shù)的大小來取舍配伍的可信度高。根據(jù)定量分析結(jié)果可知混劑的增效程度，根據(jù)共毒系數(shù)的大小確定最佳配比，不僅可以大大縮減工作量，而且說服力強。作者認為，采用上述具有增效作用的配比復(fù)配出的復(fù)配劑，能夠克服單一殺螨劑在害螨治理中的缺點，并可有效延緩螨類抗藥性的問題，在害螨的治理中極具應(yīng)用前景和開發(fā)潛力。

［1］ 何林，譚仕祿，曹小芳，等.朱砂葉螨的抗藥性選育及其解毒酶活性研究［J］.農(nóng)藥學(xué)學(xué)報，2003，5（4）：23 29.

［2］ 張偉，鄧新平，羅公樹，等.10%甲氰·阿維乳油配方的篩選及其對朱砂葉螨的聯(lián)合作用［J］.農(nóng)藥學(xué)學(xué)報，2004，6（2）：80 83.

［3］ 邱峰.棉田朱砂葉螨自然種群生命表［J］.昆蟲知識，1992，29（4）：199 201.

［4］ 馬惠，周玉，夏曉明，等.9種殺螨劑對朱砂葉螨不同發(fā)育階段的室內(nèi)毒力測定［J］.中國農(nóng)學(xué)通報，2009，25（23）：375 379.

［5］ 唐振華.昆蟲抗藥性及其治理［M］.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1993：422 440.

［6］ 熊忠華，曾鑫年，黎卓維，等.阿維菌素與橡膠籽油復(fù)配對朱砂葉螨的聯(lián)合作用［J］.中國農(nóng)學(xué)通報，2006，22（11）：428 431.

［7］ Bala A E A，Delome R，Kollmann A，et al.Insecticidal activity ofDaphnane diterpenesfromLasiosiphon kraussiannuus（meisn）（Thymelaeaceae）roots［J］.Pesticide Science，1999，55（7）：745 750.

［8］ Mansour N A，Eldefrawi M E，Toppozada A，et al.Toxicological studies on the Egyptian cotton leafworm，Prodenia litura. VI.potentiation and antagonism of organophosphorus and carbamate insecticides［J］.Journal of Economic Entomology，1966，59（2）：307 311.

［9］ 陳立，徐漢虹，李云宇，等.農(nóng)藥復(fù)配最佳增效配方篩選方法的探討［J］.植物保護學(xué)報，2000，27（4）：349 354.

［10］黃周生，蒲小明，林壁潤，等.黃曲條跳甲成蟲防治藥劑增效配方篩選［J］.廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009（8）：131 132.

［11］Sun Y P，Johnson E R.Analysis of joint action of insecticides against house flies［J］.Journal of Economic Entomology，1960，53（3）：887 892.

［12］李騰武，高希武，鄭炳宗.阿維菌素對小菜蛾的抗性選育［C］∥植物保護21世紀展望.北京：中國科學(xué)出版社，1998：758 760.

［13］顧中言，韓麗娟，鐘定亮，等.農(nóng)藥復(fù)配劑增效作用的定性定量

分析［J］.江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，1990（3）：31 34.

Joint action of abamectin and other three acaricides againstTetranychus cinnabarinus

Fu Zhineng， Zhu Xiu， Wei Jinghuai， Du Xiaoying
（College of Agriculture，Yangtze University，Jingzhou434025，China）

The toxicity of abamectin，diafenthiuron，pyridaben and propargite againstTetranychus cinnabarinus（Boisduval）and the joint action of their mixture were evaluated with leaf-residue method in the laboratory.The results showed that，with abamectin as the main agent，the mixture of abamectin and each of the other three acaricides had a prominent synergistic effect onT.cinnabarinus.The mixture of abamectin and diafenthiuron（1∶1 or 1∶49），abamectin and pyridaben（1∶19 or 1∶29）and abamectin and propargite（1∶1，1∶2，1∶4 or 1∶39）gave a co-toxicity coefficient of 350.9，488.4，465.9，582.5，349.7，350.5，436.1 and 452.6，respectively，far more than 120.It indicates that the mixture of abamectin and the other three acaricides could be widely applied in the control ofT.cinnabarinus.

Tetranychus cinnabarinus； acaricide； compound； synergism

S 433.7

B

10.3969/j.issn.0529 1542.2015.01.041

2014 11 05

2014 11 08

公益性行業(yè)（農(nóng)業(yè)）科研專項（200903033）

*通信作者 E-mail：cjdxdxy@163.com