巴西蜂膠和國產蜂膠乙醇濃縮液對2型糖尿病大鼠糖、脂代謝的影響研究

王雪梅，王飛飛，田海霞，黃冀東

北京知蜂堂蜂產品有限公司，北京 102200

巴西蜂膠和國產蜂膠乙醇濃縮液對2型糖尿病大鼠糖、脂代謝的影響研究

王雪梅，王飛飛，田海霞，黃冀東

北京知蜂堂蜂產品有限公司，北京 102200

目的 探討巴西蜂膠和國產蜂膠醇濃縮液對二型糖尿病大鼠血糖、血脂代謝的影響。方法選用SD大鼠高脂飼料喂養結合STZ誘導建立二型糖尿病大鼠模型，將模型隨機分成7組，國產蜂膠組，巴西蜂膠組，二甲雙胍陽性藥組，國產蜂膠+陽性藥組，巴西蜂膠+陽性藥組，模型對照組，并設置空白對照組。給藥干預1個月后，觀察治療期間及治療后大鼠的生理體征，檢測空腹血糖、糖耐量、總膽固醇和甘油三酯量。結果巴西蜂膠組和國產蜂膠組對大鼠的生理體征比較模型組均明顯改善；治療前后，巴西蜂膠組血糖曲線下面積降低率23.87%，國產蜂膠組為18.33%；巴西蜂膠組總膽固醇下降率為24.88%，甘油三酯下降率為77.14%，國產蜂膠組總膽固醇下降率為65.03%，甘油三酯下降率為85.94%。結論巴西蜂膠組和國產蜂膠組均有輔助降血糖的功效；國產蜂膠組比較巴西蜂膠組降血脂的功效更佳。

巴西蜂膠；國產蜂膠；2型糖尿病模型；糖耐量；血脂

蜂膠的成分極為復雜，主要成分是蜂蠟、樹脂、黃酮類物質和揮發性物質，后3種物質是從植物中獲得的，因此蜂膠的成分與膠原植物密切相關。我國蜂膠的代表性類型主要是來源于楊樹的蜂膠。巴西蜂膠可分為12類，膠原植物主要有山香、白楊、酒神菊類，其中以酒神菊類為膠原植物的綠蜂膠是巴西蜂膠的代表[1]。該實驗研究對巴西蜂膠和國產蜂膠降血糖、血脂的功效進行了對比，并研究了蜂膠輔助陽性藥對治療功效的影響，現報道如下。

1 材料

1.1 儀器

羅康全活力Ⅱ型血糖儀：德國羅氏診斷公司；先行者通用型電子天平：北京朗科興業稱重設備有限公司；Sigma1-14微型臺式高速離心機：美國sigma公司；721型紫外可見分光光度計：上海精科分析儀器公司。

1.2 動物

SPF級SD雄性大鼠，3～4周，60只，購于北京維通利華實驗動物技術有限公司，許可證編號：SCXK（京）2011-0011。

1.3 樣品制備

該實驗使用蜂膠濃縮液樣品，采用本公司專利方法制備[2]。首先毛膠經過低溫處理后粉粹，篩除可見金屬；蜂膠用一定濃度酒精溶解后用超聲波進行提取，過濾，濃縮，熟化等一系列工序，最終得到蜂膠濃縮液。

1.4 試劑

血糖試紙購于德國羅氏診斷公司；鏈脲佐菌素（STZ），美國Sigma公司；檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液，北京市博愛港商貿有限公司；D-無水葡萄糖，北京欣賽維化學科技有限公司；總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）測定試劑盒，購于南京建成科技有限公司。

2 方法

2.1 動物模型的建立

購買SD大鼠適應性喂養3 d后，將其隨機分為A、B兩組，A組50只，B組10只。A為高脂飼料組，喂食高脂高糖飼料,B為空白對照組，喂食普通飼料。喂養30天，模型組體重達到260 g左右，造成肥胖體質，即可開始STZ藥物誘導。

STZ誘導前，高脂飼料組禁食12 h，STZ按照40 mg/kg體重進行腹腔注射誘導。注射72 h后測空腹血糖，需禁食12 h。以空腹血糖＞11.1 mmol/L為2型糖尿病模型標準[3]。

2.2 動物分組及給藥方法

從成模的大鼠中選取空腹血糖在11.1～25.0之間的大鼠42只，隨機分成6組：國產蜂膠組，巴西蜂膠組，二甲雙胍陽性藥組，國產蜂膠+陽性藥組，巴西蜂膠+陽性藥組，模型對照組。試驗期間普通飼料喂養，給藥4周，采取灌胃給藥方式。

依據《中華人民共和國藥典》2010版規定的蜂膠使用量在0.2～0.6 g之間。故我們選擇0.5 g作為治療劑量，既能達到好的治療效果，又不會產生藥理毒性。

則將成年人（體重60 kg）的用藥量換算動物的給藥量。單位體重的人：SD大鼠=1:6；則SD大鼠給蜂膠和陽性藥的劑量均為0.025 g/kg（SD體重）。給藥劑量如表1所示。

2.3 檢測指標

①試驗期間每天觀察并記錄動物的進食、體重，排泄和精神活動等生理指標；②監測空腹血糖；③治療1個月結果后進行口服葡萄糖耐量試驗，取時間點為0 h，0.5 h，1 h，2 h，繪制葡萄糖耐量曲線，計算血糖曲線下面積降低率，如式1，式2；血糖曲線下面積＝（0 h血糖＋0.5 h血糖）×0.5/2+（2 h血糖＋0.5 h血糖）×1.5/2（式1）；血糖曲線下面積降低率%=（實驗前血糖曲線下面積－實驗后血糖曲線下面積）/實驗前血糖曲線下面積×100%（式2）；④檢測血清中總膽固醇、甘油三酯。

2.4 試驗數據分析

根據《保健食品檢驗與評價技術規范實施手冊》最新修訂后的相關規定，空腹血糖和餐后糖耐量兩項指標中一項指標陽性，且對正常動物空腹血糖無影響，即可判定該受試樣品輔助降血糖功能動物實驗結果陽性。

2.5 統計方法

3 結果

3.1 各組治療前后體重的變化

模型動物均出現“三多一少的癥狀”。該試驗對此4個表癥進行了觀察和記錄，詳細分析了給藥后模型的排尿量和體重的變化。治療前后體重的變化如圖1、圖2所示，數據均為治療4周所得，所有體重為每組的平均值。

由圖1和圖2得出：不同給藥組在治療前后對2型糖尿病大鼠模型體重的控制效果排序為：陽性藥+國產蜂膠組＞空白組＞國產蜂膠組＞陽性藥+巴西蜂膠組＞巴西蜂膠組＞陽性藥組＞陰性組，即若以體重作為治療糖尿病效果的參考指標，國產蜂膠的治療效果最佳，對體重的控制效果最好。

3.2 各組治療前后排尿量的變化

通過稱量每天墊料的質量來監測不同給藥組的排尿量。

由圖3可以看出，巴西蜂膠給藥組對排尿的作用最好。其次為國產蜂膠組和陽性藥組。

3.3 各組治療前后空腹血糖的變化

由表2可看出治療過程中巴西蜂膠、國產蜂膠、陽性藥+巴西蜂膠，陽性藥+國產蜂膠對二型糖尿病大鼠的空腹血糖均有顯著的調節作用，差異有統計學意義（P＜0.01）,蜂膠輔助陽性藥對功效的影響不明顯，陽性藥在控制空腹血糖后期效果不佳。

3.4 各組治療前后糖耐量的變化

進行口服葡萄糖耐量試驗，取時間點為0 h，0.5 h，1 h，2 h，繪制葡萄糖耐量曲線，計算血糖曲線下面積降低率，見圖4和表3。

由圖4和表3可以看出如下規律：不同治療組給藥后血糖控制差別不大。其中，陽性給藥組控制效果最佳，差異有統計學意義（P＜0.01）,巴西蜂膠組，陽性藥組+國產蜂膠組控制效果次之，差異有統計學意義（P＜0.01）；國產蜂膠組，陽性藥+巴西蜂膠組效果稍差，差異有統計學意義（P＜0.01），且血糖有上升趨勢；陰性藥組效果最差。

表3 不同給藥組針對2型糖尿病模型及糖耐量異常模型血糖曲線下面積降低率（±s）

注：與陰性對照組相比，*P＜0.05，**P＜0.01。

組別血糖曲線下面積血糖曲線下面積降低率（%）A1 A2 A3 A4 A5 A6（40.18±5.54）**（43.10±4.51）**（39.65±4.05）**（46.03±6.46）**（40.78±4.89）**52.78±3.42 23.87 18.33 24.87 18.74 22.74

3.5 實驗結果時各組總膽固醇含量的比較

該試驗在治療結束后，眼球取血分離血清，檢測血清中總膽固醇含量，見圖5。

圖5數據表明：與陰性對照組相比，治療組降總膽固醇的效果如下：國產蜂膠組＞陽性藥+國產蜂膠組＞陽性藥+巴西蜂膠組＞陽性藥組＞巴西蜂膠組。

3.6 實驗結束時各組甘油三酯含量的比較

圖6數據顯示：與陰性對照組相比，治療組降甘油三酯的效果如下：國產蜂膠組＞陽性藥+巴西蜂膠組＞巴西蜂膠組＞陽性藥+國產蜂膠組＞陽性藥組。

3.7 實驗結論

該試驗初步得出如下結論。

①在控制糖尿病大鼠生理體征方面，國產蜂膠對2型糖尿病大鼠的體重控制效果最佳；巴西蜂膠對2型糖尿病大鼠的排尿量控制效果最佳。

②在控制血糖的效果上，巴西蜂膠和國產蜂膠輔助降空腹和餐后血糖結果均成陽性，故巴西蜂膠和國產蜂膠能有效控制和調節2型糖尿病大鼠的血糖，具有輔助降血糖的功能；且巴西蜂膠和國產蜂膠降血糖功效差異不大。

③在控制血糖的效果上，國產蜂膠降總膽固醇和甘油三酯的效果最佳，優于巴西蜂膠。

④蜂膠替代陽性藥控制血糖的效果均較好，可以用蜂膠替代部分化學藥物，減少藥物帶給人的傷害。

4 討論

蜂膠降血糖的機理主要有以下幾種說法：①對胰島細胞的修復作用：蜂膠中含有胰蛋白酶等多種活性酶類和黃酮類、萜烯類等多種活性物質，能活化細胞，促進胰島細胞和組織再生[4]；②清自由基機理：大量研究表明，在糖尿病人的體內，血糖的升高和自由基升高有關聯。蜂膠中因富含黃酮類、萜烯類等強抗強化能力的物質，能有效的清除自由基，進一步增加了細胞活性[5]；③抑制α-葡萄糖苷酶的活性：α-葡萄糖苷酶存在小腸上皮內，是經消化的雙糖和低聚糖分解成單個葡萄糖的限速酶。蜂膠中4-’甲楊梅素-鼠李糖苷、楊梅素等黃酮醇類物質能有效抑制該酶的活性[6]，進而延緩雙糖和低聚糖的吸收，降低餐后血糖。

國產蜂膠總黃酮約8%，酚酸類含量較高；巴西蜂膠總黃酮約4%，萜烯類含量較高，且以其中的3,5-二異戊烯-4-甲氧基桂皮（Artepillin C)為代表[7-8]。各種蜂膠的功效基本一致，都以抑菌、抗氧化、消炎為基礎功效，其他功能如降脂、緩解糖尿病并發癥、免疫調節、延緩衰老等作用都是基礎功效協同作用的結果。由于國產蜂膠中總黃酮的含量比巴西蜂膠高，則降血脂功效方面功效更佳。巴西蜂膠沒有區別于國產蜂膠的特有功效，只是它的功效因子含量和比例略優于國產蜂膠而導致它的衍生功效更為突出。

蜂膠的成分復雜，功效較多，但其功效成分和作用機理需要深一步的研究和發掘，使其在醫療保健方面應用更加廣泛。

[1]申晉山.巴西蜂膠的來源和化學成分的多樣性[J].中國蜂業,2007(1):45-49.

[2]李育強,劉俊熙.一種蜂膠提取、提純方法及其專用設備[J].中國發明專利,CN100534322C,2006-04-29.

[3]王春艷.鏈脲佐菌素誘導大鼠2型糖尿病模型的建立[J].吉林醫藥學院學報,2010,31(1):22-23.

[4]郝一斌,周爾風,湯允昭,等.硫代普氨酸對血栓形成和血小板功能的影響[J].中國藥理學通報,1990,6(4):249-251.

[5]IoffeDV.Investigationsonthephysicalandchemicalproperties of beewax[J].Khinm pri Soed,1984,20(3):275.

[6]張原利,油凱,等.餐后血清甘油三酯代謝異常作為冠心病獨立危險因素的探討[J].中華心血管病雜志,1998,26(2):99-100.

[7]南垚,周立東.蜂膠化學成分研究進展[J].世界科學技術-中醫藥現代化,2006,8（1）:61-65.

[8]郭伽,周立東.蜂膠的化學成分研究進展[J].中國養蜂,2000,51 (4):18-22.

R59

2015-05-21）

王雪梅（1986.11-），女，湖北荊門人，醫學碩士，研究方向：微生物與生化藥學。