中藥色譜指紋圖譜在中藥炮制研究中的應用

楊海玲，胡昌江，吳珊珊

(1.成都中醫藥大學，四川 成都 610072；2.廣西中醫藥大學，廣西 南寧 530001)

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中藥色譜指紋圖譜在中藥炮制研究中的應用

楊海玲1,2，胡昌江1*，吳珊珊1

(1.成都中醫藥大學，四川 成都 610072；2.廣西中醫藥大學，廣西 南寧 530001)

查閱中藥色譜指紋圖譜在中藥炮制研究中的應用相關資料，分析整理，以期為提高炮制品質量和臨床療效提供參考依據。其中色譜指紋圖譜中以HPLC指紋圖譜在中藥炮制研究中應用最為廣泛，薄層色譜指紋圖譜等其他方法也有一定的應用。

中藥色譜指紋圖譜；中藥炮制；應用

隨著世界經濟的快速發展，國際經濟全球化對中藥產業提出了國際化、現代化的要求，因此如何實現中藥質量的科學化、系統化評價成為制約中藥現代化及國際化的瓶頸。中藥炮制為我國獨有的傳統制藥技術，也是中醫用藥特色之一,中藥飲片為中醫臨床的主要藥物形式。飲片質量的優劣將直接影響藥物臨床療效。中藥色譜指紋圖譜可對樣品的整體輪廓進行較直觀觀察，不僅能較全面地反映所含成分的相對關系，還能較好體現中藥成分的復雜性和相關性，更好地鑒別炮制品種，評價及控制炮制品的質量，保證中醫臨床療效，從而有利于中藥的現代化和國際化。

1 中藥色譜指紋圖譜概念與分類

中藥色譜指紋圖譜是指采用色譜方法及其他聯用技術，建立同種中藥材、中藥飲片或制劑共有組分群體的特征圖譜或圖像，包括TLC、HPLC、GC和高效毛細管電泳指紋圖譜[1]。中藥色譜指紋圖譜對中藥材、中藥飲片及其制劑的定性和定量研究進行中藥質量評價和控制，也是目前公認的中藥質量控制模式。

2 中藥色譜指紋圖譜在中藥炮制研究中的應用

2.1 薄層色譜(TLC)指紋圖譜

中藥材及其炮制品以其化學成分的多樣性和模糊性為特點,以薄層色譜指紋圖譜為基礎進行分析,具有快速、操作簡便、分析成本低、結果形象直觀等優點。采用PCA把薄層色譜指紋圖譜作為一個整體,避免以單純某指標或某幾個指標分析的不確定性,反映總化學特征。TCL指紋圖譜多用于中藥飲片各種成分的定性鑒別。徐臘英等[2]采用薄層鑒別方法研究蒼術麩炒前后的化學成分變化，該法操作簡便,斑點明顯,分離度和重現性好,可用于蒼術藥材定性鑒別和輔料的研究。高曉霞等[3]運用薄層色譜指紋圖譜方法對10份不同采集地制何首烏樣品進行研究，該方法可快速有效鑒別制何首烏,并為其質量評價及品種整理提供新的證據。王彥青[4]采用薄層指紋圖譜對延胡索的醋烘、醋煮、醋炙、酒炙炮制品進行鑒別研究，為醋元胡臨床用藥安全性奠定了基礎。

2.2 高效液相色譜(HPLC)指紋圖譜

HPLC適用于成分復雜而不易分離的分析對象，具有分離效能高、靈敏度高、 分析速度快、檢測手段多等優點，因此在中藥飲片產地加工、凈制、切制、炮炙及炮制輔料的質量控制方面均有廣泛運用。仇立志[5]通過HPLC法建立不同產地懷牛膝飲片及最佳工藝硫磺熏蒸鮮牛膝飲片的指紋圖譜，篩選硫磺熏蒸懷牛膝最佳炮制工藝，并為懷牛膝飲片的質量評價及安全使用提供依據。馬曉靜等[6]采用相似度計算結合聚類分析法對19批金銀花進行比較分析,建立硫磺熏蒸前后金銀花HPLC指紋圖譜，為評價硫磺熏蒸前后金銀花樣品的質量優劣提供依據。王莉等[7]利用HPLC法建立凈制前后湖北貝母的指紋圖譜, 該方法可有效控制湖北貝母飲片的質量，為進一步研究貝母炮制機理提供參考。劉艷芳等[8]運用多指標定量結合指紋圖譜分析方法對遠志根皮、根及木心的化學成分進行定性和定量分析，該研究為制定遠志科學炮制加工方法提供一定的參考。張洪利等[9]通過正交試驗設計，HPLC指紋圖譜技術結合抑菌藥效試驗優選姜黃連飲片最佳工藝。曹建軍等[10]利用HPLC指紋圖譜技術，確定了熟地黃炮制終點。肖二等[11]采用HPLC-UV分別對榼藤子生品和炮制品的指紋圖譜進行研究，該方法全面反映榼藤子炮制前后化學成分的差異,可用于控制生品和炮制品的內在質量。何曉燕等[12]采用HPLC指紋圖譜對檳榔炒制過程物質基礎變化進行研究，為揭示檳榔炮制原理提供依據。王榮[13]對四川、浙江、陜西三個產地炮制方法不同的制延胡索和鮮延胡索進行分析,確定延胡索鮮品和炮制品指紋圖譜中有效成分種類、含量的差異。孔繁瑤等[14]采用高效液相指紋圖譜方法對豨薟草生品及炮制一至九制品進行研究，為豨薟草炮制過程中化學成分變化規律和進一步闡明其療效改變奠定基礎。耿媛媛等[15]采用HPLC法建立二神丸不同提取部位的指紋圖譜，并采用灰關聯分析法建立其譜效關系，為二神丸的質量評價提供參考，也為進一步研究二神丸的炮制機制奠定基礎。張麗等[16]對生姜榨汁、生姜煮汁、干姜煮汁三種不同制法所得炮制輔料姜汁進行RP-HPLC指紋圖譜比較研究，較全面反映不同制法姜汁含量的差異。

2.3 氣相色譜(GC)指紋圖譜

GC具有高效、高選擇性、進樣量少及分析速度快等優點，主要運用于含揮發性成分中藥飲片及其制劑中揮發油的鑒別與比較。在具體應用中，為解決圖譜中多數色譜峰的歸屬，常與質譜檢測器(MS)聯用。劉沁[17]采用氣相色譜-質譜聯用技術，分析炮制前后的斑蝥脂肪油并分離鑒定出10種脂肪酸成分，結果顯示炮制對斑蝥脂肪酸組成影響不大。吳國清等[18]運用毛細管氣相色譜法對薏苡仁生品及炮制品提取物進行分析，該研究全面反映薏苡仁揮發性化學成分，為薏苡仁生品及炮制品的質量控制提供有效手段。耿媛媛等[19]采用GC-MS分析二神丸中補骨脂和肉豆蔻的炮制對其4種組合揮發性成分的影響，研究證實補骨脂和肉豆蔻炮制后入藥可降低毒性。王加等[20]利用GC-MS聯用技術鑒別生川烏和制川烏揮發性成分，為川烏的進一步研究提供科學依據。戴建業等[21]通過血清代謝組學方法，運用GC-MS技術分析大鼠體內代謝物質及代謝通路，從整體代謝角度觀測給藥后大鼠存在的代謝差異，評價和探討醋炙柴胡與生柴胡對于機體代謝的影響。

2.4 高效毛細管電泳指紋圖譜

高效毛細管電泳(HPCE)具有分離效率高、靈敏、快速等特點，是近年來發展的一種新的分離技術，為電泳技術和層析技術結合的產物。目前，HPCE在中藥炮制品成分分析與比較研究中也有一定的應用，為飲片鑒別及質量評價提供更加全面可靠的依據。李俊松等[22]建立以9個共有峰為特征指紋信息的山茱萸飲片高效毛細管電泳指紋圖譜,可作為控制山茱萸飲片內在質量的有效手段。施婧妮等[23]運用毛細管區帶電泳法，建立10批生鱉甲和10批醋鱉甲有效物質部位的指紋圖譜,并進行比較研究，結果顯示鱉甲炮制前后化學成分及其含量發生變化,且炮制后產生一些新的有效成分。張英等[24]運用高效毛細管電泳法對杜仲炮制前后綠原酸的含量進行分析，該研究為杜仲的炮制提供參考依據。

2.5 色譜聯用技術指紋圖譜

隨著科學的不斷發展，色譜光譜聯用指紋圖譜技術也逐漸運用于中藥炮制研究。馮慧萍等[25]運用HPLC-DAD-MS法建立厚樸及其炮制品的色譜指紋圖譜，該方法全面反映厚樸化學成分及其炮制前后的差異。李文濤等[26]采用超高效液相色譜-飛行時間質譜聯用技術(UPLC/Q-TOF-MS)進行蜜炙前后槐角成分分析與比較, 通過散點圖(S-ploting)中的VIP值分析槐角蜜炙前后指紋圖譜的差異,得到潛在差異最明顯的化學標記物,為從化學成分角度闡釋槐角蜜炙后增效機理提供依據。王增繪等[27]運用超高效液相色譜串聯四級桿飛行時間質譜檢測補骨脂炮制前后成分變化，得到潛在的化學標記物。該研究成果對于研究補骨脂鹽炙的炮制原理具有重要意義，同時也為闡明補骨脂鹽炙品藥效物質基礎提供重要依據。李鳳玲等[28]采用HPLC-ESI-MS聯用技術，對多批次不同溫度炮制的山楂炭甲醇提取物進行分析，建立山楂炭的特征圖譜，為山楂炭質量控制標準提供參考。

3 結語

綜上所述，中藥色譜指紋圖譜在中藥炮制中產地加工、凈制、切制、炮炙的全過程及炮制輔料質量控制方面有著廣泛的應用，有利于從化學成分角度闡述炮制的科學性，還有利于科學化、系統化地控制飲片質量，為提高和保證臨床療效提供依據。在中藥炮制研究中，應根據藥物成分的基本性質選擇適當的色譜指紋圖譜研究方法，為今后實現中藥現代化及國際化發揮更重要的作用。

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(責任編輯：李嵐春)

2015-01-15

廣西高等學校科學技術研究項目(LX2014170)；廣西中醫藥大學中藥學博士點建設工程開放課題(201410-14)

楊海玲(1980-)，女，廣西中醫藥大學講師,成都中醫藥大學在職博士，研究方向為中藥炮制機理及質量標準。

胡昌江(1952-)，男，成都中醫藥大學教授，博士生導師，研究方向為中藥炮制機理及質量標準。E-mail: hhccjj@hotmail.com

R284;O657.7

A

1673-2197(2015)10-0055-02

10.11954/ytctyy.201510023