2.2 京大戟及其炮制品總萜類含量測定

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2.2 京大戟及其炮制品總萜類含量測定

2.2.1 供試品溶液制備 分別取兩種京大戟供試品粉末(過65目篩)0.2g，精密稱定，置50mL具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20mL稱重，超聲(功率250W，頻率50kHz)處理30min后再稱重，以甲醇補足損失的重量，搖勻，濾過，即得。

2.2.2 吸收波長確定 取對照品0.5mL和供試品0.1mL置于具塞試管中，水浴揮干溶劑，分別加入新配制的5%香草醛-冰醋酸溶液0.5mL，高氯酸0.6mL，搖勻。于100 ℃水浴加熱30min，取出，流水冷卻2min，精密加入冰醋酸5mL，搖勻。分別以相應的試劑為空白，于400～800nm處掃描，由掃描結果確定測定波長為570nm，結果見圖2、圖3、圖4。

圖1 京大戟總萜顯色條件考察

圖2 大戟二烯醇顯色后可見光譜

圖3 京大戟生品顯色后可見光譜

圖4 京大戟醋制品顯色后可見光譜

2.2.3 線性關系考察 精密量取大戟二烯醇標準品溶液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8mL置于具塞試管中，水浴揮干溶劑，分別加入新配制的5%香草醛-冰醋酸溶液0.5mL，高氯酸0.6mL，搖勻。于100 ℃水浴加熱30min，取出，流水冷卻2min，精密加入冰醋酸5mL，搖勻。分別以相應的試劑為空白，照分光光度法(《中國藥典》2010年版一部附錄Ⅴ分光光度法)于570nm處測定吸收度。以吸收度為縱坐標(Y)，對照品的量(mg)為橫坐標(X)，繪制標準曲線，得回歸方程：y=9.949 8x-0.054 9(r=0.999 1)。大戟二烯醇在12.12～96.96μg之間與峰面積呈現良好的線性關系。結果見表6，線性關系見圖5。

2.2.4 精密度實驗 取0.5mL對照品顯色后溶液，連續測定6次，測定結果見表7，結果RSD為0.17%。表明該方法精密度良好。

表6 大戟二烯醇標準曲線

圖5 大戟二烯醇標準曲線

序號吸收度A平均吸收度ARSD(%)10．67020．66930．6700．6690．1740．66950．66860．667

2.2.5 穩定性實驗 以JDJ-1供試品顯色后溶液為考察對象，間隔若干時間測一次，共測7次，測定結果見表8，RSD為0.31%，結果表明供試品當中總萜類成分在2h內穩定。

表8 穩定性考察結果

2.2.6 重復性實驗 依法處理JDJ-1供試品 6份，依上法測定。重復性結果總萜類的平均含量為55.751mg·g-1，RSD為2.7%，結果表明該試驗重復性較好，結果見表9。

表9 總萜類成分重復性試驗結果

2.2.7 加樣回收率實驗 精密稱取JDJ-1供試品 6份，每份0.1g，依上法制得供試品溶液，取0.1mL置于具塞試管中，并向其中加入0.2mL(0.121 2mg·mL-1)大戟二烯醇標準品溶液。依法測定，并計算平均回收率以及RSD，結果見表10。

表10 總萜類成分加樣回收率試驗結果

2.2.8 樣品含量測定 取2份供試品，如法測定。樣品測定結果見表11。

表11 京大戟不同炮制品含量測定結果

3 結果與討論

在考察顯色條件時，經過多次對照試驗，最終確定加入5%香草醛-冰醋酸0.5mL和高氯酸0.6mL，并放入沸水浴加熱30min反應基本完全，尤其在進行沸水浴加熱時間考察時，當加熱45min紫外掃描就會出現兩個尖峰，對后續測定造成干擾，因此最終確定加熱時間為30min。

該實驗結果表明，京大戟中總萜成分含量在醋制后比生品含量略低，即含量高低為：京大戟生品>京大戟醋制品，說明醋煮對京大戟中總萜含量有一定的降低作用，該實驗結果也可以推測京大戟醋制后總萜類成分含量的降低可能與京大戟醋制減毒有一定的相關性。

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(責任編輯：尹晨茹)