PDGF-B在甲狀腺乳頭狀癌中的表達及意義

王新征 劉金彪 侯永強 王寧 王明軍

PDGF-B在甲狀腺乳頭狀癌中的表達及意義

王新征 劉金彪 侯永強 王寧 王明軍

目的 探討血小板源性生長因子B鏈(PDGF-B)在甲狀腺乳頭狀癌組織中的表達及其意義。方法 免疫組織化學染色檢測甲狀腺乳頭狀癌組織(甲狀腺乳頭狀癌病例組, n=35)和正常的甲狀腺組織中(正常甲狀腺組)PDGF-B的表達差異。結果 甲狀腺乳頭狀癌病例組(HSCORE中位數=1.92, SEM=0.46)與正常甲狀腺組(HSCORE中位數=0.38, SEM=0.05)PDGF-B鏈的表達差異有統計學意義(P＜0.05)。PDGF-B鏈在甲狀腺乳頭狀癌病例組中較正常甲狀腺組明顯過度表達。甲狀腺乳頭狀癌組陽性率68.6%, 而正常甲狀腺組陽性率僅為17.1%。結論 PDGF-B在甲狀腺乳頭狀癌的發病和發展中起到了一定的作用, PDGF很有希望成為甲狀腺乳頭狀癌的一個潛在輔助診斷因子及治療靶點。

血小板源性生長因子；甲狀腺乳頭狀癌；免疫組織化學

甲狀腺乳頭狀癌(papillary thyroid cancer, PTC)是最常見的甲狀腺惡性甲狀腺腫瘤［1］, 盡管其特征性腫瘤呈乳頭狀排列,毛玻璃樣核、核溝、核內包涵體等對診斷具有重要價值,但是臨床工作中常出現甲狀腺微小乳頭狀癌及濾泡上皮乳頭狀增生難以鑒別的病例,成為目前診斷的難點,本實驗的目的是通過免疫組化技術檢測甲狀腺乳頭狀癌組織中血小板源性生長因子B鏈(platelet-derived growth factor-B, PDGF-B)蛋白的表達, 初步探討PDGF與甲狀腺乳頭狀癌的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 35例甲狀腺乳頭狀癌組織標本取自河南科技大學第一附屬醫院2008～2012年行甲狀腺癌根治術患者存檔的石蠟塊, 其中男9例, 女26例, 年齡11～74歲, 患者術前均未經過任何抗腫瘤治療, 術后經病理檢驗證實為甲狀腺乳頭狀癌。35例正常的甲狀腺組織標本取自中山大學第一附屬醫院2008～2012年甲狀腺腺瘤或節結性甲狀腺腫手術患者切除標本的存檔石蠟塊中相對正常的甲狀腺組織, 其中男6例, 女29例, 年齡16～73歲。

1.2 試劑及染色方法 兔抗人血小板源性生長因子B鏈多克隆抗體購自武漢博士德公司；二抗選用DAKO公司GK50075 EnVision兩步法試劑盒。所有標本均5 μm厚連續切片。切片常規脫臘后行常規HE染色, 鏡下觀察鑒定病變性質及部位, 以確定所采用的標本的正確性。免疫組化染色檢測按EnVision兩步法試劑盒說明操作, 用TBS液代替一抗作為陰性對照。

1.3 分析方法 先在10×10倍光鏡下觀察免疫組化玻片染色結果, 隨機選取10個細胞分布較均勻的視野, 每個視野在4×100下隨機計數50個細胞。根據細胞棕黃色著色的強度按下列記分方法分為4個等級：0分=無著色, 1分=輕度著色, 2分=中度著色, 3分=強著色, 然后按公式HSCORE=Σ(i+1)Pi(這里i=1, 2, 3, Pi=評分為i的細胞/該例標本總觀察細胞×100%)計算得到的HSCORE (histochemical score)得分［2,3］代表該張切片PDGF-B鏈蛋白表達的水平進行統計分析,該評分法考慮到了單個細胞是否陽性及其強弱,更具體更全面的反應細胞的蛋白表達情況。

1.4 統計學方法 采用SAS8.1統計學軟件處理數據。計數資料采用Wilcoxon秩和檢驗。P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

PDGF-B鏈主要表達于腫瘤細胞的胞漿中, 在細胞膜上也有表達, 而在癌旁的間質中很少表達。甲狀腺乳頭狀癌病例組(HSCORE中位數=1.92, SEM=0.46)與正常甲狀腺組(HSCORE中位數=0.38, SEM=0.05)PDGF-B鏈的表達差異具有統計學意義(P＜0.05)。PDGF-B鏈在甲狀腺乳頭狀癌病例組中較對照組明顯過度表達。設定HSCORE得分≥0.6分者為陽性, 則病例組陽性率68.6%, 而對照組陽性率僅為17.1%。

3 討論

甲狀腺乳頭狀癌發病率約占全身惡性腫瘤的1%～2%,且呈逐年上升趨勢,尤其以女性明顯增加,對人類健康危害極大［4-6］。甲狀腺癌的具體病因尚不明確,臨床研究及流行病學調查發現射線輻射、激素影響、攝入碘量等因素與其發病有關。但這些因素如何作用于細胞導致腫瘤發生發展的分子機制目前尚不清楚。

PDGF是目前人們研究較多的一種生長因子。目前國外的研究結果顯示PDGF促進細胞惡性轉化和腫瘤生長的作用很可能是通過腫瘤細胞中形成的PDGF的自分泌回路等機制過度激活PDGF受體介導的受體酪氨酸蛋白激酶細胞信號傳導通路從而引起細胞的增殖轉化。另外越來越多的資料顯示PDGF與腫瘤新生血管的形成關系密切［7］。PDGF及其受體在腫瘤組織間液高壓的形成中起著重要作用, 而組織間液壓力(interstitial fluid pressure, IFP)較正常組織升高是許多實體性腫瘤共有的特點。這些都提示了PDGF在多種惡性腫瘤的發生和發展中所起的重要作用, 是很有前途的分子水平腫瘤治療干預措施的靶向。但目前PDGF與甲狀腺乳頭狀癌的關系仍不明了, 試驗結果顯示PDGF-B在甲狀腺乳頭狀癌中存在過度表達, 其表達在甲狀腺乳頭狀癌與正常甲狀腺組織之間的差異明顯, 提示PDGF-B在甲狀腺乳頭狀癌的發病和發展中起到了一定的作用。聯系到PDGF在其他多種惡性腫瘤的發生和發展中所起的重要作用, PDGF很有希望成為甲狀腺乳頭狀癌的一個潛在輔助診斷因子及治療靶點。

［1］ 夏宏才, 張佃乾, 陳叢緒, 等.甲狀腺乳頭狀癌并頸淋巴結廣泛轉移的外科治療.中國普通外科雜志, 1995(6):39.

［2］ 凌啟柏.放療后發生的甲狀腺乳頭狀癌的治療.國際外科學雜志, 1981(2):78.

［3］ 袁維堂,范正軍,王慶兆.分化型甲狀腺癌再次手術的評價.中國醫刊, 1997(11):156.

［4］ 佟杰,羅杰,笪冀平,等. 甲狀腺乳頭狀增生活躍與微小乳頭狀癌的診斷與鑒別診斷.診斷病理學雜志, 2011, 18(3):173-177.

［5］ 李琦,陳麗華,宋朝君,等.甲狀腺球蛋白免疫組織化學在甲狀腺癌診斷中的應用.中國組織化學與細胞化學雜志, 2008 , 17(4):375-376.

［6］ 張立海,王嬌,孟凡石,等.MTA1基因在甲狀腺乳頭狀癌中的表達及其臨床意義.黑龍江醫藥科學, 2006, 29(6):55-56.

［7］ 陳云新,沈丹華,孫昆昆,等. 甲狀腺微小乳頭狀癌中Galectin-3、CK19、HBME-1和CD56的表達及意義.臨床與實驗病理學雜志, 2010, 26(4):425-428.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.03.023

2014-09-23］

471000 河南科技大學第一附屬醫院普外三科