組織病理診斷中應(yīng)用免疫組化技術(shù)的價(jià)值分析

【摘要】 目的 對(duì)組織病理診斷中應(yīng)用免疫組化技術(shù)的應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行探討分析。方法 將56例腫瘤患者隨機(jī)分為觀察組和對(duì)照組，對(duì)照組患者運(yùn)用活檢穿刺法，觀察組患者運(yùn)用免疫組化法，對(duì)比兩種方法陽(yáng)性率。結(jié)果 觀察組的陽(yáng)性率顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。結(jié)論 應(yīng)用免疫組化技術(shù)進(jìn)行組織病理診斷，能夠提高陽(yáng)性率，可推廣。

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B

【文章編號(hào)】1674-9308（2015）05-0177-01

doi：10.3969/j.issn.1674-9308.2015.05.147

作者單位：130021長(zhǎng)春，吉林省腫瘤醫(yī)院

通訊作者：吳巍，E-mail：wuwei123@163.com

Analysis on Using Immunohistochemistry Technique in Tissue Pathology Diagnosis

GUO Haiyan　GUO Lili　WANG Zhisheng WU Wei, The tumor hospital of Jilin Province, Changchun 130021, China

[Abstract] Objective　To explore the application value of analysis of histopathologic diagnosis in immunohistochemical technique. Methods 56 cases of tumor patients were randomly divided into observation group and control group, the control group patientsby biopsy method, the observation group patients using immunohistochemistry method, the positive rate of comparison of two methods. Results The positive rate of the observation group was significantly higher than that of the control group (P<0.05). Conclusion Immunohistochemical technique for histopathological diagnosis, can improve the positive rate, can be extended.

[Key words] Immunohistochemical technique, Pathological diagnosis, Positive rate

隨著各種抗體新用途的不斷增多以及新型抗體種類的不斷增加，在病理診斷中，免疫組化技術(shù)在對(duì)腫瘤進(jìn)行診斷、鑒別、分類以及預(yù)后判斷等方面發(fā)揮著重要作用 [1]。但免疫組化技術(shù)具有一定局限性，為將免疫組化技術(shù)在組織病理診斷中的作用充分發(fā)揮出來(lái)，需要對(duì)免疫組化原理、技術(shù)進(jìn)行深入研究。筆者對(duì)組織病理診斷中應(yīng)用免疫組化技術(shù)的價(jià)值進(jìn)行探討，報(bào)告如下：

1　資料與方法

1.1　一般資料

選取我院2010年2月～2013年2月收治的56例腫瘤患者作為研究對(duì)象，所有患者均符合WHO制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)。隨機(jī)分為觀察組和對(duì)照組，每組各28例，其中，男36例，女20例，年齡24～62歲，平均年齡（41.1±3.6）歲；平均病程8個(gè)月；15例肝細(xì)胞肝癌，35例轉(zhuǎn)移性腫瘤，4例肝內(nèi)膽管癌，2例血管瘤；兩組患者以上四項(xiàng)資料對(duì)比無(wú)顯著性差異（P＞0.05），具有可比性。

1.2　方法

對(duì)照組患者給予穿刺活檢；觀察組患者給予免疫組化技術(shù)，詳細(xì)步驟如下：

使用試劑主要包括10%中性緩沖甲醛固定液、透明液、脫水液、蒸餾水、浸蠟液、中性樹(shù)膠以及UltrasenSitiveTM SP試劑等。首先固定切片：每例患者取一塊規(guī)格為1 cm×2 cm×0.2 cm的組織，使用10%中性緩沖甲醛固定液固定2 h，使用透明液透明1 h，脫水液脫水1 h，浸蠟液1 h，然后使用石蠟包埋，運(yùn)用常規(guī)切片法進(jìn)行切片，厚度約為2 μm；免疫組化染色：固定好切片脫蠟處理后，使用3%雙氧水在室溫下孵育十分鐘，然后使用蒸餾水洗滌三分鐘，三次后，再使用高壓鍋修復(fù)兩分鐘，將高壓鍋溫度控制為110℃；使用PBS洗滌五分鐘，三次后，放置37℃室溫下孵育兩個(gè)小時(shí)，再次使用PBS進(jìn)行洗滌，并加入U(xiǎn)ltrasenSitiveTM SP試劑；使用37℃孵育后，DAB顯色，運(yùn)用蒸餾水進(jìn)行沖洗；最后使用中性樹(shù)膠進(jìn)行封固。

1.3　陽(yáng)性診斷標(biāo)準(zhǔn) [2]

陽(yáng)性：免疫組化染色為棕黃色。

1.4　統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)與分析，計(jì)數(shù)資料采用χ 2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

觀察組：經(jīng)免疫組化染色后，患者細(xì)胞結(jié)構(gòu)為變異型性，其中，24例患者AFP（α-Fetoprotein）和Glypican-3為陽(yáng)性，陽(yáng)性率為85.7%，同于手術(shù)檢查結(jié)果；對(duì)照組：14例患者AFP（α-Fetoprotein）和Glypican-3為陽(yáng)性，陽(yáng)性率為50.0%，觀察組的陽(yáng)性率顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。

3　討論

在病理診斷中，免疫組織化學(xué)技術(shù)是其中的一種常用法，對(duì)各種腫瘤進(jìn)行診斷的準(zhǔn)確率較高。免疫組織化學(xué)染色為一種新型的病理技術(shù)，其操作受到環(huán)境因素影響較大，如易受到固定劑、抗原修復(fù)、切片、時(shí)間、溫度以及人為等方面因素影響，進(jìn)而導(dǎo)致病理診斷結(jié)果出現(xiàn)誤診。因此，為有效提高診斷正確率，需要嚴(yán)格根據(jù)以下標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行操作：（1）組織固定：在組織固定中，主要使用10%中性緩沖甲醛固定液，與甲醛固定液相比，其具有固定好、固定時(shí)間久的優(yōu)點(diǎn)，且在三個(gè)月內(nèi)，其陽(yáng)性率較穩(wěn)定；（2）烤片：適宜放置到60℃～68℃的恒溫箱內(nèi)進(jìn)行加熱，避免溫度過(guò)高；（3）抗原修復(fù)：時(shí)間控制到8分鐘內(nèi)，噴汽后約兩分鐘，將鍋端開(kāi)，使切片自然冷卻，開(kāi)始染色；（4）染色：免疫組織化學(xué)染色時(shí)，需要對(duì)蘇木素進(jìn)行復(fù)染，避免復(fù)染程度過(guò)深，如過(guò)深，會(huì)給染色比較淺的陽(yáng)性細(xì)胞覆蓋，對(duì)正確診斷產(chǎn)生影響 [3]。

另外，免疫組化顯色屬于一種酶促反應(yīng)，能夠與抗原抗體復(fù)合物的堿性磷酸酶、過(guò)氧化物酶和底物發(fā)生反應(yīng)，形成有顏色復(fù)合物，在組織與細(xì)胞抗原位置進(jìn)行沉淀。但由于組織標(biāo)本來(lái)源不同，其抗原含量也不同，且細(xì)胞分化不同，顯色反應(yīng)時(shí)間也不同，進(jìn)行染色時(shí)，需要注意以下幾個(gè)方面：（1）染色過(guò)程中，要保持切片處于濕潤(rùn)狀態(tài)；（2）孵育時(shí)，要合理控制孵育盒內(nèi)蒸餾水量；（3）加抗體時(shí)主要選擇單克隆抗體；（4）進(jìn)行孵育時(shí)，要保證孵育盒的平整，保證抗體液體的均勻性，防止抗體液體流入組織內(nèi)，導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性。

本組研究中，觀察組運(yùn)用免疫組化法，對(duì)照組運(yùn)用活檢穿刺法，結(jié)果表明，觀察組的陽(yáng)性率顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。

綜上所述，在組織病理診斷中應(yīng)用免疫組化技術(shù)，能夠有效提高陽(yáng)性率，可在臨床中廣泛推廣。