吸收放散試驗在高效價冷凝集素導致的血型鑒定和交叉配血困難時的臨床應用價值

【摘要】 目的 分析因高效價的冷凝集素導致的正反定型不符合和交叉配血困難時的解決方案。方法 選擇因高效價冷凝集素的存在而導致的交叉配血和血型鑒定異常的8例患者作為研究對象，對患者血漿采用吸收放散方法清除冷凝集素后再進行血型鑒定和交叉配血。結果 運用吸收試驗和放散試驗可以有效的減少冷凝集素對實驗過程和結果的干擾。結論 吸收放散法可有效的減少甚至去除冷凝集素，使得檢驗結果真實可靠。

【文獻標識碼】B

【文章編號】1674-9308（2015）05-0171-02

doi：10.3969/j.issn.1674-9308.2015.05.143

作者單位：157000 黑龍江省牡丹江市腫瘤醫院

The Value of Absorption and Irradiation Test in Blood Group and Cross-matching Test out Caused by the High Titer of Cold Agglutinins in Clinical Application

KONG Xiuhong, Mudanjiang city tumor hospital, Mudanjiang 157000, China

[Abstract] Objective Analysis of the solution of blood group identification in discrepancy and blood cross-matching in difficulty due to the high titer of cold agglutinins. Methods Selection of the group identification and cross-matching test out caused by the high titer of cold agglutinins in 8 cases ofpatients as the research object. Use the Method of absorption and irradiation test to clear the cold agglutinin. Results Absorption and irradiation test can reduce the interference of cold agglutination on the experimental process and results. Conclusion Absorption and irradiation test can effectively reduce or even remove the cold agglutinin,which makes the test result is true and reliable.

[Key words] Cold agglutinin, Absorption and irradiation test, ABO blood group identification

冷凝集素為存在于人體體內的少量的自身抗體，一般正常人的血清中有效價低于1∶16的冷凝集素，當溫度達到20℃以上時凝集情況就會消失，在室溫的條件下，若冷凝集素效價大于1∶4則在輸血工作中有重要的意義 [1]。臨床上的一些常見疾病如感染性疾病、血液系統疾病、腫瘤性疾病、免疫系統性疾病和一些藥物影響等，可導致患者血清中冷凝集素效價增高 [2]。為了確保輸血過程和輸血治療的安全有效，若在給患者進行配血和血型鑒定時出現高效價冷凝集素的干擾，需要進行吸收放散試驗對檢驗結果進行審查，確保實驗結果的真實可靠，確保輸血治療的安全有效，降低輸血過程中的風險和隱患 [3]。本次研究課題通過對8例因疾病導致的冷凝集素效價較高而影響檢驗過程，導致患者與供血者血液交叉配血不相合和患者血型鑒定不符的情況進行研究和討論，現進行如下報道。

1　資料與方法

1.1　一般資料

按照本課題的研究需要選擇2011年6月～2014年6月，四年間確定的因冷凝激素的存在而導致的交叉配血和血型鑒定異常的8例患者的臨床資料作為研究對象。其中男性患者5例，女性患者3例，年齡范圍為18～56歲，平均年齡為40.1歲。患者患病情況：再生障礙性貧血患者1例、肺心病1例、淋巴細胞性白血病1例、肝癌2例、DIC患者1例、肺癌1例、陣發性睡眠性血紅蛋白尿1例。

1.2　試劑和儀器

ABO單克隆抗體（批號為2001008）、直接抗人球蛋白試劑、ABO標準紅細胞（批號為20001106）和抗體篩選細胞購自上海血液生物醫藥有限責任公司。0.9%生理鹽水和微柱凝膠購自瑞士達亞美公司，凝聚胺（Polyberne）試劑盒和離心機購自珠海貝索生物有限公司。水浴箱購自天津市泰斯特儀器有限公司。

1.3　實驗操作方法

1.3.1　ABO血型鑒定 抽取患者靜脈血液3 ml于EDTA-K2抗凝管中，離心后配制成濃度為3%～5%的紅細胞懸液用于正定型，吸取上清血漿用于反定型。當對患者進行ABO血型鑒定時，可見正定型和反定型的血型結果不相符，正定型采用患者紅細胞和抗A和抗B單克隆血清做凝集試驗，可見兩管中紅細胞均凝集，血型應為AB型。反向定型采用患者血漿與標準紅細胞做凝集試驗，可見兩管中紅細胞也凝集，血型則為O型。自身對照管也可見凝集，表示患者血清中有高效價的冷凝集素或自身抗體存在。

1.3.2　交叉配血試驗 在室溫條件下患者血漿分別與A、B、AB、O型供血者紅細胞及自身紅細胞均呈現3+～4+凝集，在37℃條件下呈2+凝集，患者次側配血亦然。

1.3.3　放散試驗 取濃度為0.9%生理鹽水100 ml，置于37℃水浴箱中溫育20～30 min，待生理鹽水溫度達37℃后取8 ml于試管中，加入患者紅細胞0.5 ml，混勻，3 000 r/min離心2～5 min，去上清液，如此操作反復洗滌6～8次，直至顯微鏡下觀察患者紅細胞無凝集狀態時作ABO正定型鑒定患者血型。

1.3.4　吸收試驗 取標準的O型紅細胞配制成濃度為2%紅細胞懸液，加入等量的患者血漿后置于4℃冰箱中1 h（目的為吸收血漿中的冷凝集素）， 最后3 000 r/min離心5 min取上清液。若1次吸收不完全，可重復此操作再吸收1次。取上清液作反定型、不規則抗體篩查和交叉配血。

1.3.5　冷凝集效價測定 取患者血清0.2 ml作倍比稀釋，每管中加入濃度為2%的標準O型紅細胞0.2 ml，置4℃冰箱中1 h后取出，經3 000 r/min離心1 min，觀察結果，以最高稀釋倍數肉眼觀察可見凝集者為其冷凝集素的測定效價。

2　結果

2.1　冷凝集效價測定

受檢的8例患者中冷凝集素效價最低為32，冷凝集素效價最高可達1 024，導致在使用ABO單克隆抗體測定患者紅細胞表面抗原和使用ABO標準紅細胞檢測患者血漿中的抗體時均發生凝集現象。

2.2　吸收試驗

取上清液作反定型可得到患者準確血型結果。取上清液作交叉配血可見不論是在鹽水介質、抗球蛋白介質或者聚凝胺此試驗結果均不出現凝集，交叉配血結果為相合。

2.3　放散試驗

取放散試驗后的患者紅細胞做血型正定型鑒定可得到患者準確的血型結果。最終可見患者正反定型相符合，可排除有亞型的存在。

3　結論

吸收放散試驗是臨床上常用的、實用的、可靠的減少患者血漿中冷凝集素的血清學方法。吸收試驗通過在適宜的環境中利用標準的O型紅細胞吸收患者血漿中的抗體。放散試驗通過在適宜環境的條件下利用化學和物理原理將患者紅細胞上的冷凝集素洗脫下來。吸收和放散過程不僅將患者的紅細胞和血漿中影響因素（冷凝集素）濃縮提煉了出來，而且保證了血型鑒定和交叉配血結果的準確性和可靠性。綜上所述，吸收放散法可有效的減少甚至去除冷凝集素，為臨床輸血治療的安全性和有效性奠定基礎。