注射用奧美拉唑鈉有關物質的方法建立

宋捷

哈藥集團生物工程有限公司

注射用奧美拉唑鈉有關物質的方法建立

宋捷

哈藥集團生物工程有限公司

目的：建立注射用奧美拉唑鈉有關物質檢查方法。方法：采用高效液相色譜法，色譜柱為C18，流動相為硫酸氫四丁基溶液（取硫酸氫四丁基銨6.78g與氫氧化鈉0.8g，加磷酸鹽緩沖液（PH 7.4）溶解并稀釋至1000m l）-磷酸鹽緩沖液（PH 7.4）（磷酸二氫鈉與磷酸氫二鈉，加水溶解并稀釋至1000m l，調節PH值至7.4）-乙腈（5：69：26），流速為1.0m/m in，檢測波長為280nm。結果：奧美拉唑鈉主峰與包括降解產物奧美拉唑磺酰化物（5-甲氧基-2-｛［（4-甲氧基-3，5-二甲基-2-吡啶基）-甲基］-磺酰基｝1H-苯并咪唑）在內的其他雜質均可有效分離，峰純度符合規定，物料平衡。結論：建立的方法準確可行，適用于注射用奧美拉唑鈉的質量控制。

注射用奧美拉唑鈉；有關物質；高效液相色譜法

奧美拉唑是一對活性旋光對映體的消旋混合物，籍由高目標性的作用機制來降低胃酸的分泌，是胃壁細胞中酸泵的特殊抑制劑。奧美拉唑鈉為抗酸及治療消化道潰瘍類藥物，作為第一代質子泵抑制劑，已經廣泛應用于臨床，并且取得公認的療效。可用于反流性食管炎，消化性潰瘍，消化性潰瘍伴幽門螺桿菌感染，急性胃黏膜病變，Zollinger-Elison綜合征的治療。大量的臨床數據表明，其治療效果優于H2受體拮抗劑，且耐受性好，不良反應小，可以被廣泛應用【1】。

1 試驗材料

注射用奧美拉唑鈉、奧美拉唑磺酰化物。溶劑：去乙腈200ml，加磷酸鹽緩沖液（PH11.0）（取磷酸鈉0.34g與磷酸氫二鈉0.627g，加水溶解并稀釋至1000m l調節PH值至11.0）稀釋至1000ml。色譜柱：C18（5μm×4.6mm×250mm），Angilent1260型高效液相色譜儀（紫外檢測器）

2 方法與結果

2.1 色譜條件

采用高效液相色譜法，色譜柱為C18（5μm×4.6mm×250mm），流動相為硫酸氫四丁基溶液（取硫酸氫四丁基銨與氫氧化鈉，加磷酸鹽緩沖液PH7溶解并稀釋至1000m l）-磷酸鹽緩沖液（PH7.4）（磷酸二氫鈉與磷酸氫二鈉，加水溶解并稀釋至1000m l，調節PH值至7.4）-乙腈（5：69：26），流速為1.0m l/min，檢測波長為280nm。

2.2 溶液制備

稱取奧美拉唑磺酰化物約6mg，精密稱定，至100ml容量瓶中，加乙腈5m l使溶解，加溶劑稀釋至刻度，搖勻；精密量取上述溶液1ml,至另一個100ml容量瓶中，加溶劑使成0.6μg/ml的溶液，作為雜質對照品溶液。取注射用奧美拉唑鈉適量，用溶劑稀釋制成每1m l中約含奧美拉唑0.1mg的溶液，作為供試品溶液。取上述供試品溶液1m l，至100m l容量瓶中，加溶劑稀釋至刻度，作為對照溶液;稱取奧美拉唑對照品及奧美拉唑磺酰化物對照品適量，置于同一100ml容量瓶中，加溶劑稀釋成濃度分別奧美拉唑0.1mg/ml、奧美拉唑磺酰化物0.6μg/ml的溶液，作為系統適用性溶液。

2.3 方法驗證

相對保留時間的確定：分別取奧美拉唑對照品及雜質奧美拉唑磺酰化物對照品適量，用溶劑分別稀釋制成加溶劑制成0.6μg/ ml的溶液，分別取20μl，注入液相色譜儀，相對保留時間分別為23.41、21.62.取系統適用性溶液20μl按照設定好的方法進樣，連續進六針，雜質及主峰均得到良好的分離，分離度大于1.5，計算雜質封面積RSD為1.5%，保留時間的RSD為0.6%，塔板數大于5000，可繼續對方法進行詳細驗證。

溶液穩定性試驗：取同一份注射用奧美拉唑鈉供試品溶液，分別于0、2、4、6、8小時進樣，記錄色譜圖，結果主峰峰面積的RSD為1.5%，說明供試品溶液在8小時內穩定。

耐用性試驗：更換三根不同的色譜柱（三根不同廠家的C18色譜柱），流動相比例（乙腈比例變化±2%），柱溫及流速，考察各參數變化對有關物質測定結果的影響，同時考察奧美拉唑磺酰化物與奧美拉唑塔板數及二者分離度的影響，結果表明，各參數變化對有關物質結果無明顯影響，奧美拉唑磺酰化物與奧美拉唑的塔板數及二者分離度均在規定范圍內。耐用性試驗符合規定。在各種色譜條件下，對稱因子在0.8-1.2之間，塔板數均大于5000.

專屬性：使用紫外檢測器，對供試品進行酸、堿、氧化、高溫及強光破壞實驗，各破環條件下主峰均有下降，比較在波長260nm、270nm、280nm、290nm、300nm下測定的雜質情況，在280nm下測定的響應值最大，確定檢測波長為280nm。在破環條件下，檢測的各相鄰雜質峰與主峰均可良好分離，分離度符合規定，方法專屬性好。

2.4 樣品檢查

取注射用奧美拉唑鈉，依據2.2中方法分別制備雜質對照品溶液、供試品溶液、對照溶液，按照既定檢測方法進行有關物質檢測，精密量取對照溶液20μl，注入液相色譜儀，調節儀器靈敏度，使主成份色譜峰的峰高約為滿量程的20%-25%，準確量取對照溶液、供試品溶液、雜質對照品溶液各20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成份峰保留時間的2.5倍，結果供試品溶液的色譜圖中單個雜質峰面積均小于對照溶液色譜圖中的主峰面積；奧美拉唑黃酰化物的峰面積小于對照溶液中主峰面積的0.3倍；各雜質峰面積的和小于對照溶液主峰面積的1.5倍。

3 結論

注射用奧美拉唑鈉有關物質檢測，需要將奧美拉唑主峰、已知雜質奧美拉唑黃酰化物及其它雜質峰有效分離，按照所確定的方法進行有關物質檢測，方法學研究表明，所確立的方法可以達到準確檢測、對注射用奧美拉唑鈉產品質量進行正確評價的目地，方法準確可行，靈敏度高，耐用性好。

[1]遇蘇寧，張三奇，楊春娥等。質子泵的研究進展［J］。中國新藥與臨床雜志，2002.21（11）：680-682.

宋捷（1988-），女，黑龍江省哈爾濱市，本科，哈藥集團生物工程有限公司，化驗員。