細胞免疫治療惡性腫瘤的應用

【摘要】細胞免疫比體液免疫在抗腫瘤效應中發(fā)揮著更重要的作用，在抗腫瘤效應中起主導作用。細胞免疫機制中起主要作用的效應細胞有CTL、NK細胞和巨噬細胞；另外，中性細胞、嗜酸性粒細胞也參與部分抗腫瘤作用。本文綜述了CIK細胞和DC的一些基礎研究現(xiàn)狀及近年的臨床應用情況。

doi:10.3969/j.issn.1674-9316.2015.02.007

作者單位：114000鞍山市腫瘤醫(yī)院檢驗科

The Application of Malignant Tumor Cells Immunotherapy

QIAO Yuning　Anshan tumor hospital clinical laboratory，114000 Anshan，China

【Abstract】

Cellular immunity than humoral immunity in the anti-tumor effect plays a more important role，plays a leading role in the anti-tumor effect. Cellular immune mechanism plays a main role in the effect of cell CTL and NK cells and macrophages; In addition，neutral cells，eosinophils also part of antitumor effect. The CIK cells and DC is reviewed in this paper some basic research present situation and recent clinical application.

【Key words】CIK cells，DC，Cancer

免疫細胞是機體免疫系統(tǒng)的主要組成部分，通過產(chǎn)生各種細胞因子和免疫因子以及免疫細胞本身完成其免疫功能；免疫細胞的功能受多種細胞因子和免疫因子的調(diào)控；免疫細胞的衰退、凋亡和耐受凋亡對于機體免疫功能有明顯的影響，是免疫調(diào)節(jié)的重要機制之一 ［1］。

1　CIK 細胞的來源和表型特征

細胞內(nèi)p53 蛋白的含量可影響細胞對外在刺激的反應，當細胞內(nèi)p53 含量少時、面對外界的刺激細胞傾向于進行cell cycle arrest，而若當細胞內(nèi)p53 含量高時、細胞則傾向于進行apoptosis；因此我們認為HT1376 與5637 這二株細胞之所以特別容易產(chǎn)生apoptosis，可能的另一個原因即是細胞中所含的mutant p53 穩(wěn)定了 （stablize） wild type p53（Bullock AN et al.，2001），使得wild type p53 半生期延長，因此wild type p53 在細胞內(nèi)的含量增加，促使凋亡現(xiàn)象容易發(fā)生。

2　CIK細胞的抗腫瘤作用機理

不論內(nèi)生性的或由外在因子皆會引起人體內(nèi)不斷形成活性氧和自由基。所幸在人體中具有抗氧化的防御系統(tǒng)來預防這些傷害。正常情形下生物體所產(chǎn)生的自由基和對抗這些自由基的抗氧化系統(tǒng)會達成平衡狀態(tài)，然而此種平衡會因疾病或營養(yǎng)不良而遭到破壞，傾向氧化的一邊，此種不平衡狀態(tài)稱之為氧化壓力 ［2］。基因都是由固定的堿基序列組成，以表現(xiàn)一種生理機能，然而事實上，同一個基因在不同的個體，會有少數(shù)的堿基發(fā)生突變，這些突變不至于影響整體生理反應，只會造成部分的基因表現(xiàn)略有不同，這種差異即稱為基因多型性。

p53 基因的產(chǎn)物稱作p53 蛋白質(zhì)，是位于細胞核內(nèi)的一個磷酸化蛋白，可做為轉錄因子（transcription factor），它的分子量為53 kD，全長有393 個胺基酸，其結構由N 端至C 端可分為數(shù)個功能區(qū)（functional domains），依次是第1-60 個胺基酸為transactivation domain，第63-97 個胺基酸為prolinerich SH3 ligand domain，第102-292 個胺基酸為DNA binding domain，第323-356 個胺基酸為 oligomerization domain，以及最靠近C 端的regulatory domain （第363-393 個胺基酸），此外在靠近C 端的區(qū)域有三段胺基酸序列與p53 進入細胞核有關，稱為nuclear localization sequence （NLS），分別是第316-325、369-375、379-384 個胺基酸。正常情況下、細胞不受刺激時，p53 蛋白沒有什么活性，但是當細胞受到刺激，p53蛋白活化后，p53 會借著oligomerization domain 形成四套體（tetramer），然后以DNA binding domain 的部位結合到具有consensus target sequence 的DNA 序列上（El-Deiry WS et al.，1992），并利用transactivation domain 活化下游基因的表現(xiàn)，進而參與細胞內(nèi)cell cycle arrest、apoptosis、differentiation、senescence、DNA repair 與抑制血管增生等反應。

3　細胞免疫治療惡性腫瘤的應用

例如在許多細胞中，p53 蛋白導致細胞凋亡時并不需要任何基因進行轉錄 （transcription） 或是蛋白質(zhì)的合成（Caelles C et al.，1994；Wagner AJ et al.，1994）；再者，不具轉錄活性的突變型p53 蛋白 （p53gln22，ser23）或經(jīng)刪除1-214 胺基酸序列的突變型p53 蛋白雖然失去做為轉錄因子的能力或是無法再與DNA 結合，可是它們?nèi)匀豢梢砸鸺毎蛲?［3］。

事實上，TNF-α即為自然免疫（innate immunity）中主要的調(diào)控者，它可促進 級調(diào)控者（secondary mediators）的分泌而使血管內(nèi)皮細胞的間隙擴大促進與發(fā)炎有關的細胞聚集到有發(fā)炎反應的區(qū)域。在罹患硅肺癥與塵肺癥的患者體內(nèi)，TNF-α的濃度就顯著高于一般族群。TNF-α也是一種內(nèi)生性的腫瘤促進因子，是在人類致癌過程中一個重要的分子；雖然在臨床上或動物實驗中，以高濃度的TNF-α處理腫瘤周圍，可以選擇性的破壞腫瘤上新生的血管，但內(nèi)生性且慢性生成的TNF-α卻可能會促使啟始細胞發(fā)展成表皮惡性腫瘤。

DC-CIK細胞免疫治療，就是將DC和CIK細胞在特定條件下進行體外培養(yǎng)后，再回輸給人體的治療方法，用以輔助或者刺激人體自身免疫系統(tǒng)，完善或增強人體的免疫機能，達到抑制或殺滅腫瘤細胞的目的。目前用此方法治療惡性腫瘤，已顯示出一定的效果。

4　結論

K-DC在聯(lián)合抗腫瘤治療中具有廣泛的應用前景，渴望成為腫瘤細胞免疫治療的首選方法，目前這種方法已經(jīng)進入臨床治療。該方法與放療、化療、手術聯(lián)合應用，將有助于減少惡性腫瘤的轉移與復發(fā)，提高臨床療效，改善病人的生活質(zhì)量。