老年婦女外陰營養不良組織中細胞凋亡及相關基因的表達分析

董 麗

（汪清縣中醫院，吉林 汪清 133200）

老年婦女外陰營養不良組織中細胞凋亡及相關基因的表達分析

董 麗

（汪清縣中醫院，吉林 汪清 133200）

目的 探討老年婦女外陰營養不良組織中細胞凋亡及相關基因的表達情況。方法 選取我院接收的70例老年婦女外陰營養不良患者作為觀察1組，同時選取10例老年婦女外陰營養不良惡變患者作為觀察2組，利用原位末端標記及免疫組化S-P法對兩組患者蠟包埋組織中的細胞凋亡及相關基因bcl-2、bax的表達情況進行檢測。同時選取10例石蠟包埋的老年婦女正常外陰皮膚進行對照（對照組）。結果 三組患者均在細胞凋亡及bcl-2、bax的表達現象，且觀察1組患者的細胞凋亡指數及bcl-2、bax的表達方面均明顯高于觀察2組（P＜0.05）；bcl-2、bax二者間的表達呈正相關（P＜0.05），在惡變部分凋亡細胞的分布區域及bcl-2、bax的表達方面則無明顯相關性。結論 外陰營養不良的發生發展與惡變及細胞凋亡間有較大的關系，且bcl-2、bax發揮著一定的作用。

老年婦女；外陰營養不良；細胞凋亡；基因表達

慢性外陰營養不良是女性常見的一種良性病變，其惡變率高達8%，嚴重影響著婦女的身體健康。且近些年來，該病的發病年齡逐漸趨于年輕化，然而現階段臨床上尚未明確該病的根治方法。臨床上通常將原位末端標記及免疫組織化學S-P法作為檢測外應營養不良及惡變組織中細胞凋亡及相關基因表達的常用方式。我院為探討老年婦女外陰營養不良組織中細胞凋亡及相關基因的表達情況特進行了以下研究，報道如下。

1　資料與方法

1.1臨床資料：選取我院自2013年1月至2014年1月期間接收的80例外陰活檢患者為研究對象，以其中70例外陰營養不良患者為觀察1組其中增生型營養不良25例，硬化型營養不良25例，混合型營養不良20例；10例營養不良惡變患者為觀察2組，本組10例患者均惡變為鱗癌；同時選取10例正常外陰患者為對照組。本組所有標本均采用10%福爾馬林溶液進行固定，并行常規石蠟包埋，切片厚度應控制為4 μm。

1.2方法

1.2.1原位末端標記檢測法：本次研究選用由BoehringerMannheim公司生產的試劑盒，并嚴格以說明書為依據進行操作，結果判定：陽性細胞：細胞核中含有棕黃色顆粒，且背景清晰。在400倍顯微鏡下，于標記良好區域選擇10個視野計數，每個視野計數100個。凋亡指數=陽性細胞數總和/1000×100%。

1.2.2免疫組織化學S-P法檢測bcl-2、bax蛋白：選用由Snta Cruz公司生產的第一抗體鼠抗人bcl-2、兔抗人Bax單克隆抗體，同時選用由北京中山技術有限公司生產的S-P試劑進行檢測。工作濃度應設置為1∶50及1∶75，嚴格按照說明術進行操作。結果判定：陽性細胞：以細胞質著棕黃色為陽性細胞；陽性：細胞質著色程度＞20%；陰性：細胞質著色程度＜20%。

1.3統計學分析：采用SAS9.0軟件進行t檢驗及χ2檢驗，并對其相關性進行分析，P＜0.05具有統計學差異。

2　結 果

2.1細胞凋亡的檢測結果：對照組患者細胞凋亡指數為（23.2± 4.6）%，觀察1組患者細胞凋亡指數為（19.6±4.2）%，其中增生型營養不良患者的細胞凋亡指數為（18.9±5.7）%，硬化型營養不良患者的細胞凋亡指數為（20.5±3.1）%，混合型營養不良患者細胞凋亡指數為（19.9±4.4）%；觀察2組患者細胞凋亡指數為（5.1±2.2）%，三組患者均存在有細胞凋亡現象，其觀察組及研究組患者的細胞凋亡指數均明顯高于對照組（P＜0.05），但兩組間及觀察組中三種病理類型組間比較細胞凋亡指數比較均無明顯統計學意義（P＞0.05）。

2.2bcl-2、bax檢測結果：對照組10例患者中bcl-2表達9例，占90%，bax表達10例，占100%；觀察1組70例患者中bcl-2表達65例，占92.9%，bax表達63例，占90%；其中增生型營養不良25例中bcl-2表達23例，占92%，bax表達23例，占92%；硬化型營養不良25例中bcl-2表達24例，占96%，bax表達23例，占92%；混合型營養不良20例中bcl-2表達17例，占85%，bax表達18例，占90%；觀察2組10例患者中bcl-2表達2例，占20%，bax表達2例，占20%；對照組患者及觀察1組患者中bcl-2、bax均有較高表達，但觀察2組患者中bcl-2、bax均顯著減弱（P＜0.05）。

2.3細胞凋亡指數、bcl-2、bax三者間的關系：觀察1組和對照組患者凋亡細胞的分布區域及表達bcl-2、bax蛋白的細胞分布區域則保持一致，且bcl-2、bax二者間的表發呈正相關（P＜0.05），在惡變部分凋亡細胞的分布區域及bcl-2、bax的表達方面則無明顯相關性。

3　討 論

細胞凋亡也叫程序化細胞死亡，其主要是指細胞核在特定條件下通過啟動自身內部機制，同時通過一系列連續性變化所引發的主動性死亡的過程［1］。細胞凋亡不同于細胞壞死，細胞凋亡是一種主動過程，而非被動過程，細胞凋亡往往需涉及一系列的基因激活、表達及調控作用，其并非病理條件下的自體損傷現象，是為適應環境而主動爭取的一種死亡過程［2］。細胞凋亡不僅可有效的維持個體自身的穩定性，同時在控制細胞增殖、分化及疾病的發生發展中同樣發揮著難以取代的作用［3］。本次研究結果顯示正常外陰皮膚及外應營養不良患者與外陰營養不良惡變患者相比其細胞凋亡指數均明顯升高。這就表明外應營養不良的發生發展在一定程度上受細胞凋亡的影響，因而在細胞凋亡現象受到抑制時便極易引起外陰營養不良組織惡現象。所以，臨床上通常將細胞凋亡指數作為判斷生物學活性的有效依據。

bcl-2及bax屬于正負凋亡調節基因，其中bcl-2可有效的對細胞凋亡現象進行抑制，且可有效的延長細胞生存周期，有助于增加細胞的積累率［4］。而bax本身即可誘導細胞凋亡，同時還可與bcl-2聯合對細胞凋亡現象進行調控。臨床研究表明bcl-2與bax間存在有較大的化學劑量關系，其比值在一定程度上決定了細胞接受信號后是否存活；通常在bcl-2含量較大時可對細胞凋亡現象進行抑制，而在bax含量較大時則可對細胞凋亡現象進行促進，而在兩組計量相當時則不會抑制細胞凋亡［5］。本次研究結果顯示組患者均在細胞凋亡及bcl-2、bax的表達現象，且觀察1組患者的細胞凋亡指數及bcl-2、bax的表達方面均明顯高于觀察2組（P＜0.05）；bcl-2、bax二者間的表達呈正相關（P＜0.05），在惡變部分凋亡細胞的分布區域及bcl-2、bax的表達方面則無明顯相關性。這就表明外陰營養不良的發生發展與惡變及細胞凋亡間有較大的關系，且bcl-2、bax發揮著一定的作用。

［1］方志啟，吳剛，王賀彬，等.凋亡相關基因p53、bcl-2、baX在前列腺組織中的相關性［J］.中國臨床解剖學雜志，2013，31（5）：560-563.

［2］周蘭英，孫圣華，高健，等.吲哚美辛對COPD大鼠TNF-α與Bcl-2和Bax表達的影響［J］.現代生物醫學進展，2012，12（6）：1044-1047.

［3］郭巍，陳美霓，王愛紅，等.P53、Bcl-2和Bax在膀胱癌的表達及意義［J］.山西醫科大學學報，2014，45（3）：180-183.

［4］余姚鳳，何愛文，李章平，等.凋亡相關性microRNA及其靶基因蛋白在心肺復蘇后大鼠心肌中的表達變化［J］.溫州醫學院學報，2013，43（6）：367-370.

［5］桂春，賈衛光，林梅，等.上調HCCR-2基因表達對乳腺癌細胞增殖與凋亡的影響［J］.臨床醫學工程，2012，19（12）：2117-2119.

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1671-8194（2015）012-0085-02