金銀花腋芽快速繁殖體系探討

任 斌

（湖州中等衛生專業學校，浙江長興 313100）

金銀花腋芽快速繁殖體系探討

任 斌

（湖州中等衛生專業學校，浙江長興 313100）

以金銀花試管苗帶腋芽莖段為外植體，應用L16（45）正交試驗設計，優選出金銀花腋芽擴繁的培養基。結果表明，金銀花經腋芽擴繁的最佳培養基是B5＋NAA 0.05 mg·L－1＋BA 2.0 mg·L－1＋GA31.0 mg· L－1，繁殖系數達4.1。

金銀花；腋芽；快速繁殖

文獻著錄格式：任斌.金銀花腋芽快速繁殖體系探討［J］.浙江農業科學，2015，56（1）：56－57.

DOI 10.16178／j.issn.0528?9017.20150117

金銀花（Lonicera japonica）為我國傳統中藥材，具有清熱解毒、涼散風熱之功效，被譽為中藥中的青霉素，近年來由于我國先后經歷了非典型肺炎、禽流感等疫情，防疫形勢嚴峻，金銀花市場需求量越來越大，而傳統的無性繁殖方式已經無法滿足金銀花需求量的快速增長。對于金銀花快繁體系的研究，國內外已有一些報道。Suk等［1］以金銀花的合子胚為外植體，利用合子胚衍生的胚性細胞建立了細胞懸浮培養體系，再經體細胞發生途徑再生為植株；宋振巧等［2］對中花1號金銀花進行組培研究，經愈傷組織和叢生芽誘導，建立快繁體系；李景剛等［3］以金銀花的嫩枝梢為外植體，經愈傷組織和叢生芽誘導建立快速繁殖體系；李軍等［4］以在平邑縣發現的金銀花自然變異優良品種紅河金銀花為材料，建立了腋芽快繁體系。經愈傷組織誘導途徑而再生的植株，由于細胞變異等原因，會產生變異植株，在遺傳穩定性上不如經腋芽再生的植株。已報道的金銀花快繁體系的繁殖系數也不是很高［5－6］。

正交設計與數據分析方法作為選擇最佳試驗方案的有效工具，能同時考察多因素對試驗的影響，常用于植物快繁體系的研究［7－8］，但在金銀花的快速繁殖研究中鮮見報道。本研究旨在建立一個更穩定、高效的金銀花快速繁殖體系，應用L16（45）正交試驗，進行金銀花腋芽快速繁殖體系的研究，為金銀花的快速繁育提供參考。現將有關金銀花快速繁育的試驗結果總結和報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

以金銀花為外植體，在B5空白培養基上培養30 d，以所得試管苗作為試驗材料。

1.2 處理設計

通過L16（45）正交試驗設計，研究6?BA，NAA，IAA，GA3不同外源激素對金銀花腋芽擴繁的影響。1－4水平BA因素分別為0.50，1.00，2.00和4.00 mg·L－1；NAA因素分別為0.00，0.05，0.10和0.50 mg·L－1；IAA因素分別為0.00，0.50，1.00和2.00 mg·L－1；GA3因素分別為0.00，0.20，0.50和1.00 mg·L－1。

以金銀花帶腋芽莖段為外植體（去除葉片），每瓶接種5個，每處理接種5瓶。25℃下全光照培養40 d后，測定每瓶的腋芽數目，求平均值。

2 結果與分析

2.1 腋芽數

各處理組的每瓶平均腋芽數統計結果如表1所示。

根據直觀分析表明，腋芽增殖效果最好的是處理10，達20.6個，即培養40 d后，繁殖系數達4.1。極差分析表明，4個因素對腋芽擴繁的影響大小依次為NAA＞BA＞GA3＞IAA，其中NAA對繁殖系數影響最大。

為了更好地反映各處理因子對腋芽繁殖的影響，以便尋求腋芽擴繁的最佳培養基組，對表1試驗結果作進一步方差分析。結果表明，4個因素對腋芽擴繁的影響大小依次為NAA（F＝7.185?）＞BA（F＝5.344）＞GA3（F＝0.898）＞IAA（F＝0.698），其中NAA對腋芽擴繁有顯著影響。腋芽擴繁的最佳培養基為B5＋NAA 0.05 mg·L－1＋BA 2.0 mg·L－1＋GA31.0 mg·L－1，繁殖系數達4.1。

2.2 試管苗

獲得的叢生腋芽再在生根培養基B5＋NAA 0.05 mg·L－1＋IBA 0.4 mg·L－1＋MET 0.5 mg· L－1培養30 d后，即可獲得形態正常的試管苗。

圖1中a是金銀花單個腋芽在擴繁培養基培養40 d后的生長情況；b是擴繁苗在生根培養基培養40 d后生長情況。由圖可知，試管苗形態正常，生長旺盛，根系發達，有利于后期的移栽成活。

3 小結與討論

試驗應用L16（45）正交試驗建立金銀花快繁體系，結果表明，腋芽擴繁的最佳培養基為B5＋NAA 0.05 mg·L－1＋BA 2.0 mg·L－1＋GA31.0 mg· L－1，繁殖系數達4.1，獲得叢生腋芽在先前研究建立的生根培養基B5＋NAA 0.05 mg·L－1＋IBA 0.4 mg·L－1＋MET 0.5 mg·L－1培養30 d后，即可獲得形態正常的試管苗。以上研究為下一步金銀花多倍體育種和優良品種的工廠化育苗打下了基礎。

［1］ Kim S W，Oh S C，In D S，et al.High frequency somatic embryogenesis and plant regeneration in zygotic embryo cultures of Japanese honeysuckle［J］.Plant Cell，Tissue and Organ Culture，2003，72：277－280.

［2］ 宋振巧，陳為序，王建華.金銀花開花與繁育特性研究［J］.山東農業科學，2012，44（1）：32－34，38.

［3］ 李景剛，孫滿芝.良種金銀花的組培快繁技術研究［J］.山東林業科技，2004（6）：36－37.

［4］ 李軍，喬元偉.紅河金銀花的組培快繁技術［J］.山東林業科技，2000（3）：41－42.

［5］ 劉偉，和兆榮，周厚高.金銀花組織培養初報［J］.中國農學通報，2006，22（8）：99－101.

［6］ 王文靜，王鵬，李偉強.紅金銀花組培快繁技術研究［J］.北方園藝，2013（18）：100－102.

［7］ 魏翠華，秦建彬，謝宇，等.應用正交設計法優選臺灣金線蓮快繁培養基［J］.中國農學通報，2013，29（4）：114－117.

［8］ 孫周平，褚麗敏，洪仁偉.正交設計在刺五加組織培養中的應用［J］.中國農學通報，2010，26（4）：85－88.

（責任編輯：張瑞麟）

S 567

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0528?9017（2015）01?0056?02

2014?10?24

湖州市科技局項目（2013GY31）

任 斌（1981－），男，講師，碩士，從事中藥組織培養及優良品種培育研究工作。E?mail：hzwxrb＠126.com。