手十二井穴刺絡放血對腦缺血作用機制的實驗室研究概況

梁慧

(廣西中醫學院第一附屬醫院，南寧530023)

手十二井穴刺絡放血對腦缺血作用機制的實驗室研究概況

梁慧

(廣西中醫學院第一附屬醫院，南寧530023)

通過總結整理近15年來國內手十二井穴刺絡放血對腦缺血實驗研究的相關文章，從對缺血區電解質Ca2+、Na+、K+、H+的影響，對腦缺血相關代謝產物一氧化氮、超氧化物歧化酶、丙二醛及興奮性氨基酸的影響，對腫瘤壞死因子-α、c-fos蛋白和HSP70蛋白的影響等方面進行論述，證明手十二井穴刺絡放血可有效地保護缺血腦細胞，減少腦水腫的發生發展，增強腦的修復能力，值得臨床推廣應用。但目前研究尚不夠完善，有待進一步深入。

手十二井穴;刺絡放血;腦缺血;綜述

手十二井穴刺絡放血是中醫學傳統療法，臨床用于急救中風療效肯定。腦缺血時，缺血區電解質、代謝產物、細胞因子表達等方面都會產生相關變化，而手十二井穴刺絡放血可在一定程度上對抗這些病理生化反應，在此筆者將近15年來國內的研究進展概述如下。

1 對缺血區電解質的影響

1.1 對抗腦缺血時細胞內Ca2+超負荷

腦缺血時，興奮性氨基酸的大量釋放導致細胞外液中Ca2+大量流入細胞內，細胞內Ca2+呈超負荷狀態，鈣調素(CaM)活性異常增高，Ca2+與CaM結合后可激活一系列靶酶，導致細胞不可逆的損傷。郭義［1］、馬巖璠［2］研究表明，手十二井穴刺絡放血可阻止腦缺血大鼠細胞外Ca2+向胞內遷移，抑制CaM活性的增高，使腦功能得到保護。周國平［3］研究亦發現，手十二井穴放血可對抗實驗性腦缺血家兔腦組織Ca2+含量的升高。

1.2 減小腦缺血時細胞內外Na+、K+的濃度差破壞

腦缺血停止供氧，線粒體受到損傷，使ATP產生不足，細胞內外離子的濃度差遭破壞，梗塞區細胞外K+濃度迅速升高，Na+濃度迅速下降。馬巖璠［4］研究表明，手十二井穴刺絡放血可急救中風，使腦缺血大鼠缺血區細胞內外K+濃度差的破壞得到調整，使細胞外液中Na+濃度降低的幅度減小，從而可能使進入細胞內引起腦水腫的Na+也相應變少，緩解腦水腫的發生與發展。

1.3 抑制缺血區的H+堆積

何樹泉［5］實驗觀察到，大鼠被阻斷大腦中動脈后5～20min間缺血區PH值持續下降。H+堆積可造成血管通透性增加，引起血管源性水腫。缺血后即刻施行手十二井穴刺絡放血，可一時性地抑制缺血區的H+濃度堆積，調節缺血處的酸堿平衡，延緩酸中毒的發展，對腦組織起到一定的保護作用。

2 對腦缺血相關代謝產物的影響

2.1 降低缺血區一氧化氮(NO)含量

內源性NO的產生和過量釋放或過量外源性NO都會導致神經毒性作用，與腦循環、腦缺血有密切關系，而一氧化氮合酶(NOS)是NO生物合成的關鍵酶。黃碧蘭［6］研究證明，腦缺血腦組織NO含量和NOS活性在缺血開始數分鐘即開始升高，對大鼠大腦中動脈栓塞后，立即給予手十二井穴刺絡放血，缺血區NO含量和NOS活性明顯降低，對抗腦缺血后的自由基毒性作用。李芳［7］實驗亦證明，十二井穴點刺放血可明顯降低實驗性腦缺血大鼠的NOS活性。

2.2 升高超氧化物歧化酶(SOD)活性，降低丙二醛(MDA)含量

SOD是重要的抗氧化酶，可清除氧自由基，保護細胞。腦缺血缺氧時產生大量氧自由基，消耗SOD，致使體內SOD降低，過剩的自由基與腦組織生物膜不飽和脂肪酸發生脂質過氧化連鎖反應，產生大量的MDA。周國平［3］研究表明，十二井穴放血可防止缺血后腦組織MDA的升高和SOD活性的降低，同時可防止腦缺血后腦組織cAMP含量的升高，提示該法可對抗腦缺血后的自由基毒性作用，亦能對cAMP誘導的酶激活過程具有抑制作用，從而減少氧自由基的產生。黃碧蘭［8］研究亦表明，手十二井穴刺絡放血能降低實驗性腦缺血大鼠缺血區腦組織MDA值，升高SOD活性。

2.3 降低升高的興奮性氨基酸(excitatory minoacids，EAA)濃度

腦缺血時，由于神經元釋放增加、重攝取減少和死亡細胞內EAA大量溢出，細胞外EAA的濃度大幅度增加。任秀君［9］實驗表明，對急性實驗性腦缺血大鼠行手十二井穴刺絡放血，可降低其升高的EAA濃度，從而減輕EAA神經毒性，保護神經細胞。

3 對細胞因子、基因表達的影響

3.1 抑制腫瘤壞死因子-α(TNF-α)表達

TNF-α是一種具有廣泛生物學功能的細胞因子，參與機體免疫應答和炎癥反應，可通過誘導腦缺血再灌注時內皮細胞黏附分子的作用，促進炎癥反應及血栓形成。馬惠芳［10］認為，腦缺血能快速誘導TNF-α的表達增加，導致缺血腦組織中TNF-α含量升高，而點刺手十二井穴能夠有效地抑制神經元表達TNF-α，減少腦皮質及血清中TNF-α含量的增加，從而減輕由其造成的腦缺血損傷，并以6 h時介入療效最為明顯。

3.2 增強c-fos蛋白和HSP70蛋白的表達

即刻早期基因c-fos蛋白和抗應激HSP70蛋白在缺血早期介導與其他抗凋亡因子間的多極保護效應，干預促凋亡目的基因的表達，從而抑制細胞凋亡的進展。王秀云［11-12］通過大鼠實驗發現，c-fos蛋白和HSP70蛋白在缺血區皮層腦組織表達增加，并均有隨缺血時間延長表達增多的趨勢。井穴放血干預治療可明顯增強缺血區腦組織c-fos蛋白和HSP70蛋白的表達，從而提高缺血后神經細胞對缺血、缺氧的耐受和適應能力，影響晚期目的基因的表達，抵抗細胞凋亡的發展，增強腦修復能力。

4 其他相關方面的研究

周國平［13］對急性實驗性腦缺血家兔分別行手十二井穴和曲池點刺放血，結果表明，手十二井穴點刺放血后，能顯著升高家兔腦血流圖波幅，其作用明顯優于曲池穴。張秀花［14］研究表明，十二井穴刺絡放血治療急性腦梗塞大鼠，早期介入可減少腦梗死體積，其作用明顯，而單純體針治療療效不明顯。蔣麗元［15］研究發現，井穴放血能減少大腦中動脈栓塞(Middle Cerebral Artery occlusion，MCAo)大鼠缺血腦組織的含水量，對缺血后48 h、72 h腦水腫有一定的改善作用。馬巖璠［16］實驗觀察到，MCAo后大鼠缺血區大腦皮層PaO2在早期比MCAo前明顯減少，且隨著缺血時間的延長進一步加重。而手十二井穴刺絡放血可減小PaO2下降的幅度，延緩腦組織的低氧狀態的發展。趙嘩［17］研究發現，對腦缺血大鼠采用手十二井穴放血后，在缺血區皮質有神經干細胞的增殖，可能與其促進腦血流的改善、緩解腦組織的缺血缺氧狀況、使皮質缺血區的內環境發生良性改變有關。周國平［18］通過實驗證明，疼痛刺激在井穴放血中起主要作用。周智梁［19］認為，腎上腺素能神經β受體在針刺影響腦血管的效應中起重要作用，而井穴刺絡放血效應受到中樞神經M受體及腎上腺素能神經α受體的雙重影響。

手十二井穴刺絡放血的實驗研究證明，該法可有效保護缺血腦細胞，減少腦水腫的發生發展，增強腦的修復能力，值得臨床推廣應用。但目前國內研究尚不夠完善，如放血量、放血順序、療程等因素的影響，以及對時間窗的研究等尚待進一步深入。

［1］郭義，胡利民.手十二井穴刺絡放血對實驗性腦缺血大鼠缺血區細胞外Ca2+濃度影響的動態觀察［J］.針灸臨床雜志，1999，15(6):48-50.

［2］馬巖璠，郭義，王秀云，等.“手十二井穴”刺絡放血對實驗性腦缺血大鼠缺血區腦組織鈣調素活性影響的實驗觀察［J］.針刺研究，1999，24(2):105-107.

［3］周國平，鄧常青.“手十二井穴”放血抗兔實驗性腦缺血機理的研究［J］.針刺研究，1999，24(2):101-104.

［4］馬巖璠，郭義，張艷軍，等.手十二井穴刺絡放血對腦缺血大鼠缺血區組織Na+、K+影響的動態觀察［J］.甘肅中醫學院學報，1996，13(4):18-20.

［5］何樹泉，郭義贏，馬巖番.手十二井穴刺絡放血對實驗性腦缺血大鼠缺血區H+濃度影響的實驗研究［J］.針灸臨床雜志，2002，18(2):43-45.

［6］黃碧蘭，程靜.“手十二井穴”刺絡放血對大鼠局灶性腦缺血后NO含量和NOS活性的影響［J］.咸寧學院學報:醫學版，2004，18(5):312-314.

［7］李芳，黃愛華，王海琴.十二井穴點刺放血對急性實驗性腦缺血大鼠NOS的影響［J］.河南中醫學院學報，2008，11(6): 26-27.

［8］黃碧蘭，余良主，劉壽仙，等.“手十二井穴”刺絡放血對大鼠局灶性腦缺血后SOD活性和MDA含量的影響［J］.咸寧學院學報:醫學版，2005，19(1):4-6.

［9］任秀君，圖婭，郭義，等.手十二井穴刺絡放血法對腦缺血大鼠局部興奮性氨基酸的動態觀察［J］.北京中醫藥大學學報，2001，24(6):48-50.

［10］馬惠芳，圖婭，馬文珠，等.“十二井穴”針法對局灶性腦缺血大鼠腦皮質及血清腫瘤壞死因子-α含量的影響［J］.針刺研究，2006，31(1):35-37.

［11］王秀云，李積勝，劉公望，等.井穴刺絡放血法對MCAO模型大鼠大腦皮層HSP70蛋白表達的影響［J］.天津中醫藥，2005，22(6):477-479.

［12］王秀云，李積勝，劉公望，等.井穴放血法對急性腦缺血大鼠缺血區腦組織凋亡相關蛋白的影響［J］.天津中醫藥，2004，21(2):123-125.

［13］周國平，徐湯蘋.手十二井穴與曲池放血對腦缺血家兔腦血流圖影響的對比觀察［J］.針刺研究，1998，4:268-270.

［14］張秀花，孫世曉，徐博佳.井穴點刺出血對局灶性腦缺血大鼠腦梗塞體積影響的基礎研究［J］.針灸臨床雜志，2004，20 (12):47-48.

［15］蔣麗元，陳澤林，祝驥，等.井穴放血和薏苡仁干預實驗性腦缺血性大鼠腦水腫的研究［J］.針灸臨床雜志，2013，29(4): 54-58.

［16］馬巖璠，郭義，張艷軍，等.手十二井穴刺絡放血對實驗性腦缺血大鼠缺血區腦組織氧分壓影響的動態觀察［J］.上海針灸雜志，2000，19(1):40-42.

［17］趙嘩.手十二井穴刺絡對大鼠局灶性腦缺血損傷后神經干細胞再生的影響［C］.中國針灸學會學術年會論文集，2009: 490-492.

［18］周國平，徐湯萍，王哲天.疼痛刺激在“手十二井穴”放血對家兔腦血流圖影響中的作用觀察［J］.針刺研究，1999，24(2): 108-110.

［19］周智梁.手十二井穴刺絡放血及電針對家兔腦血流圖影響的中樞神經遞質機理探討［J］.針刺研究，1998，4:254-257.

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2015-02-26

梁慧(1982-)，女，主治醫師，醫學碩士，從事腦病針灸的臨床與研究。