β-連環(huán)蛋白、c-myc在腮腺腫瘤組織中的表達(dá)及臨床意義

何 龍 劉 江.河北省唐山市中醫(yī)醫(yī)院放射科，河北唐山 063000；2.河北聯(lián)合大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，河北唐山 063000

β-連環(huán)蛋白、c-myc在腮腺腫瘤組織中的表達(dá)及臨床意義

何 龍1劉 江2▲
1.河北省唐山市中醫(yī)醫(yī)院放射科，河北唐山 063000；2.河北聯(lián)合大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，河北唐山 063000

目的 探討β-連環(huán)蛋白、c-myc在腮腺腫瘤中的表達(dá)及臨床意義。 方法 對(duì)唐山市中醫(yī)院2008年5月～2013年8月收治的20例腮腺多形性腺瘤、43例癌在多形性腺瘤中患者病理標(biāo)本進(jìn)行免疫組織化學(xué)SP法染色，觀(guān)察β-連環(huán)蛋白、c-myc的陽(yáng)性表達(dá)，并取腺瘤旁組織17例作為對(duì)照。結(jié)果癌在多形性腺瘤中、腮腺多形性腺瘤、腺瘤旁組織中β-連環(huán)蛋白的陽(yáng)性率分別為74.4%、45.0%、11.8%；癌在多形性腺瘤中、腮腺多形性腺瘤組織中β-連環(huán)蛋白的陽(yáng)性率顯著高于腺瘤旁組織，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）；癌在多形性腺瘤中組織的β-連環(huán)蛋白陽(yáng)性率高于腮腺多形性腺瘤組織，兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。癌在多形性腺瘤中、腮腺多形性腺瘤、腺瘤旁組織中c-myc的陽(yáng)性率分別為76.4%、45.0%、5.9%；癌在多形性腺瘤中、腮腺多形性腺瘤組織中cmyc的陽(yáng)性率顯著高于腺瘤旁組織，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）；癌在多形性腺瘤中組織的c-myc陽(yáng)性率高于腮腺多形性腺瘤組織，兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。β-連環(huán)蛋白的表達(dá)與年齡、性別、腫瘤直徑、TNM分期無(wú)關(guān)（P＞0.05）；與淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移有關(guān)（P＜0.05）。c-myc的表達(dá)與年齡、性別、腫瘤直徑、TNM分期、淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移均無(wú)關(guān)（P＞0.05）。 結(jié)論不同性質(zhì)的腮腺腫瘤組織中β-連環(huán)蛋白、c-myc表達(dá)不同，表明β-連環(huán)蛋白、c-myc與腮腺腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，隨著對(duì)其致病機(jī)制的不斷深入研究，可為腫瘤靶基因治療提供參考。

腮腺多形性腺瘤；癌在多形性腺瘤中；β-連環(huán)蛋白

近年研究表明，Wnt信號(hào)途徑的異常激活與腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)[1]。Wnt/β-連環(huán)蛋白通路是人體組織發(fā)育分化所必需的關(guān)鍵信號(hào)通路，主要參與細(xì)胞的增殖、分化、凋亡等，因此，此途徑的改變可能是人體多種腫瘤發(fā)生的共同途徑[2-5]。β-連環(huán)蛋白作為Wnt家族的成員，在維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定及在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中均有重要作用，當(dāng)β-連環(huán)蛋白降解障礙時(shí)導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)內(nèi)游離β-連環(huán)蛋白積聚，并進(jìn)入細(xì)胞核與轉(zhuǎn)錄因子T細(xì)胞因子/淋巴增強(qiáng)因子結(jié)合，激活下游靶基因c-myc、cyclin D等[6-7]，引起細(xì)胞增殖和分化失控，導(dǎo)致腫瘤發(fā)生[8-10]。近年來(lái)，β-連環(huán)蛋白、cmyc在卵巢癌、胰腺癌、胃癌、少突膠質(zhì)瘤等表達(dá)情況均有報(bào)道[11-13]，而β-連環(huán)蛋白與c-myc在腮腺腫瘤的研究報(bào)道較少。現(xiàn)對(duì)河北省唐山市中醫(yī)醫(yī)院（以下簡(jiǎn)稱(chēng)“我院”）2008年5月～2013年8月收治的腮腺腫瘤患者的臨床資料進(jìn)行分析，旨在探討β-連環(huán)蛋白與c-myc在腮腺腫瘤的表達(dá)及臨床意義，為臨床診斷、治療提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集我院收治的腮腺腫瘤患者63例，均經(jīng)手術(shù)病理證實(shí)，其中，腮腺多形性腺瘤20例，癌在多形性腺瘤中43例，并取腺瘤旁組織17例作為對(duì)照。63例中男27例，女36例，年齡21～76歲。患者術(shù)前均未進(jìn)行抗腫瘤治療。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)通過(guò)，患者均知情同意并簽署知情同意書(shū)。

1.2 方法

1.2.1 主要試劑和儀器 小鼠抗人c-myc抗體購(gòu)自DAKO公司；兔抗人β-連環(huán)蛋白多克隆抗體和S-P免疫組化染色試劑盒均購(gòu)自北京中杉金橋生物有限公司。

1.2.2 免疫組化 病理標(biāo)本以10%福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋，4 μm連續(xù)切片。對(duì)標(biāo)本行免疫組織化學(xué)SP法染色。用已知陽(yáng)性組織切片作為陽(yáng)性對(duì)照，以PBS替代一抗作為陰性對(duì)照。

1.3 免疫組化結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

c-myc陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕色顆粒為陽(yáng)性表達(dá)，按染色評(píng)分如下：0分為無(wú)著色；1分為淡黃色；2分為棕黃色；3分為棕褐色。按陽(yáng)性細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)百分比進(jìn)行評(píng)分：0分為＜5%；1分為5%～25%，2分為26%～50%，3分為51%～75%，4分為≥76%。兩項(xiàng)相加≥3分為陽(yáng)性，＜3分為陰性。β-連環(huán)蛋白陽(yáng)性表達(dá)的判定標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)胞膜染色的減少或完全消失及細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核異位染色，以細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核染色細(xì)胞數(shù)＞10%為陽(yáng)性，且不考慮細(xì)胞膜染色情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 β-連環(huán)蛋白及c-myc在腮腺腫瘤組織中的表達(dá)

癌在多形性腺瘤中、腮腺多形性腺瘤、腺瘤旁組織中β-連環(huán)蛋白的陽(yáng)性率分別為74.4%、45.0%、11.8%；癌在多形性腺瘤中、腮腺多形性腺瘤組織中β-連環(huán)蛋白的陽(yáng)性率顯著高于腺瘤旁組織，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）；癌在多形性腺瘤中組織的β-連環(huán)蛋白陽(yáng)性率高于腮腺多形性腺瘤組織，兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。癌在多形性腺瘤中、腮腺多形性腺瘤、腺瘤旁組織中c-myc的陽(yáng)性率分別為76.4%、45.0%、5.9%；癌在多形性腺瘤中、腮腺多形性腺瘤組織中c-myc的陽(yáng)性率顯著高于腺瘤旁組織，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）；癌在多形性腺瘤中組織的c-myc陽(yáng)性率高于腮腺多形性腺瘤組織，兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 不同臨床特征患者β-連環(huán)蛋白、c-myc在癌在多形性腺瘤組織中的表達(dá)

β-連環(huán)蛋白的表達(dá)與患者年齡、性別、腫瘤直徑、TNM分期無(wú)關(guān)（P＞0.05）；與淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移有關(guān)（P＜0.05）。c-myc的表達(dá)與患者年齡、性別、腫瘤直徑、TNM分期、淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移均無(wú)關(guān)（P＞0.05）。見(jiàn)表2。

3 討論

近年來(lái)研究表明，Wnt/β-連環(huán)蛋白信號(hào)通路的異常表達(dá)與人體多種腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)，其研究結(jié)果對(duì)人類(lèi)腫瘤靶向基因治療具有重要的臨床意義[14-16]。β-連環(huán)蛋白是黏附過(guò)程和Wnt/β-連環(huán)蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中的關(guān)鍵因子。在正常情況下，β-連環(huán)蛋白聚集于細(xì)胞膜，當(dāng)其降解發(fā)生障礙時(shí)導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)內(nèi)游離β-連環(huán)蛋白積聚，信號(hào)通路發(fā)生異常，β-連環(huán)蛋白積聚于細(xì)胞質(zhì)并移位到胞核與淋巴細(xì)胞增強(qiáng)因子/T細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合，進(jìn)而激活靶基因c-myc、cyclin D1等，導(dǎo)致細(xì)胞增殖和腫瘤的形成。c-myc基因是一種調(diào)節(jié)細(xì)胞周期的癌基因，為Wnt/β-連環(huán)蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中的一個(gè)重要的靶基因，當(dāng)外環(huán)境中存在存活刺激信號(hào)時(shí)，c-myc蛋白導(dǎo)致細(xì)胞增殖而發(fā)生腫瘤。近年研究表明，β-連環(huán)蛋白、c-myc在卵巢癌、胰腺癌、胃癌、少突膠質(zhì)瘤等中均有過(guò)表達(dá)[1，11-13]。

本研究結(jié)果表明，β-連環(huán)蛋白、c-myc在癌在多形性腺瘤組織中的陽(yáng)性率顯著高于腮腺多形性腺瘤、腺瘤旁組織，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），腮腺多形性腺瘤組織中β-連環(huán)蛋白、c-myc的陽(yáng)性率顯著高于腺瘤旁組織，兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

綜上所述，不同性質(zhì)的腮腺腫瘤組織中β-連環(huán)蛋白、c-myc均有不同表達(dá)，表明β-連環(huán)蛋白、c-myc與腮腺腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，隨著對(duì)其致病機(jī)制不斷深入的研究，可為腫瘤靶基因治療提供參考。

[1]夏光，呂慶杰，姜衛(wèi)國(guó)，等.Wnt-1蛋白和β-連環(huán)蛋白在卵巢癌中的表達(dá)及意義[J].中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，38（9）：706-708.

[2]Maruyama K，Ochiai A，Akimoto S，et al.Cytoplasmic beta-catenin accumulation as a predictor of hematogenous metastasis in human colorectal cancer[J].Oncology，2000，59：302-309.

[3]Wong CM，F(xiàn)an ST，Ng IO.Beta-catenin mutation and overex pression in hepatocetlular carcinoma：clinicopathologic and prognostic significance[J].Cancer，2001，92：136-145.

[4]Lustig B，Behrens J.The Wnt signaling pathway and its role in tumor development[J].J Cancer Res Clin Oneol，2003，129（4）：199-221.

[5]Michaelson JS，Leder P.β-catenin is a downstream effector of Wnt-mediated tumorigenesis in the mammary gland[J]. Oncogene，2001，20：5093-5099.

[6]Cadigan KM.Wnt signaling-20 years and counting[J]. Trends Genet，2002，18：340-342.

[7]He TC，Sparks AB，Rago C，et al.Identification of C-MYC as a target of the APC pathway[J].Science，1998，281：1509-1512.

[8]Park BH，Vogelstein B，Kinzler KW.Genetic disrwption of PPAR delta decreases the tumorigenicity of human colon cancer cells[J].Proc Natl Acad Sci USA，2001，98：2598-2603.

[9]Shih IM，Yu J，He TC，et al.The β-catenin binding domain of adenomatus polyposis coli is sufficient for tumor suppression[J].Cancer Res，2000，60：1671-1676.

[10]Saegusa M，Okayasu I.Freguent nuclear beta-catenin accumulation and associated mutations in endometrioidtype endometrial and ovarian carcinomas with sguamous differentiation[J].J Pathol，2001，194：59-67.

[11]李玉軍，紀(jì)祥瑞.β-catenin、細(xì)胞周期蛋白D1和c-myc表達(dá)與胰腺癌發(fā)生及生物學(xué)行為的關(guān)系[J].中華病理學(xué)雜志，2003，32（3）：238-241.

[12]李俊芝，古麗那爾·阿布拉江，苗娜，等.Wnt通路中Soxl 7及β-catenin在少突膠質(zhì)細(xì)胞起源腫瘤中的表達(dá)及其臨床意義[J].中華病理學(xué)雜志，2014，43（8）：546-550.

[13]陳衛(wèi)昌，史冬濤，部恒駿，等.胃腺癌中β-catenin、c-myc表達(dá)及其臨床意義[J].中華消化雜志，2006，26（12）：809-812.

[14]Rigo-Watermeier T，Kraft B，Ritthaler M，et al.Functional conservation of Nematostella Wnts in canonical and noncanonical Wnt-signaling[J].Biol Open，2012，1（1）：43-51.

[15]Zhang S，Li Y，Wu Y，et al.Wnt/β-catenin signaling pathway upregulates c-myc expression to promote cell proliferation of P19 teratocarcinoma cells[J].Anat Rec（Hoboken），2012，295（12）：2104-2113.

[16]Li JY，Han C，Zheng LL，et al.Epigenetic regulation of Wnt signaling pathway gene SRY-related HMG-box 17 in papillary thyroid carcinoma[J].Chin Med J，2012，125（19）：3526-3531.

Expression and clinical significance of β-catenin,c-myc in parotid tumor tissues

HE Long1LIU Jiang2▲
1.Department of Radiology,Tangshan Traditional Chinese Medicine Hospital,Hebei Province,Tangshan 063000,China;2.School of Basic Medical,Hebei United University,Hebei Province,Tangshan 063000,China

ObjectiveTo study the expression and clinical significance of β-catenin,c-myc in parotid tumor tissues. Methods The expression of β-catenin,c-myc were detected by SP immunohistochemical staining in specimens of 20 cases of parotid pleomorphic adenoma,43 cases of carcinoma in pleomorphic adenoma selected from Tangshan Traditional Chinese Medicine Hospital between May 2008 to August 2013.The positive expressions of β-catenin,c-myc were observed and 17 cases of adenoma tissues were chosen as the control.Results The positive expression of βcatenin in carcinoma in pleomorphic adenoma,pleomorphic adenoma of parotid gland,adenoma tissues was 74.4%, 45.0%,11.8%respectively.The expression of β-catenin in carcinoma in pleomorphic adenoma,pleomorphic adenoma of parotid gland were significantly higher than that in adenoma tissues(P＜0.05);the expression of β-catenin in carcinoma in pleomorphic adenoma was significantly higher than that in pleomorphic adenoma of parotid gland(P＜0.05). The positive expression of c-myc in carcinoma in pleomorphic adenoma,pleomorphic adenoma of parotid gland,adenoma tissues was 76.4%,45.0%,5.9%respectively.The expression of c-myc in carcinoma in pleomorphic adenoma, pleomorphic adenoma of parotid gland were significantly higher than that in adenoma tissues(P＜0.05);the expression of c-myc in carcinoma in pleomorphic adenoma was significantly higher than that in pleomorphic adenoma of parotid gland(P＜0.05).The expression of β-catenin were associated with the lymph node metastasis(P＜0.05),which were not associated with the patient's gender and age,the size of tumor,TNM staging (P＞0.05).The expression of c-myc were not associated with the patient's gender and age,the size of tumor,the lymph node metastasis,TNM staging (P＞0.05).Conclusion There are different expressions with β-catenin,c-myc in benign,malignant parotid tumor tissue. The expression of β-catenin,c-myc are closely related to occurrence,development of parotid gland tumor.β-catenin and c-myc may become new therapeutic antitumor targets with the deepening of its pathogenesis studies,which plays an certain role in guiding antitumor therapy.

Parotid pleomorphic adenoma;Carcinoma in pleomorphic adenoma;β-catenin

R739.8

A

1673-7210（2015）03（c）-0022-03

2014-12-20本文編輯：程 銘）

河北省科學(xué)技術(shù)研究與發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目（編號(hào)112 76135）。

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