干式熒光免疫分析儀校準方法探討

【摘 要】 本文主要探討干式熒光免疫分析儀校準方法，為干式熒光免疫分析儀的監管提供技術支持。

【關鍵詞】 干式熒光免疫分析儀 校準方法

【DOI編碼】 10.3969/j.issn.1674-4977.2015.10.010

1 概述

干式熒光免疫分析儀是基于光電檢測原理的免疫熒光檢測系統，可體外定量檢測人血清、血漿、全血或尿液中肌鈣蛋白I、N-端腦利鈉肽前體、超敏C反應蛋白、肌紅蛋白、肌酸激酶同工酶、D-二聚體、降鈣素原、微量白蛋白等的含量，檢測結果用于臨床輔助診斷，具有檢測精度高、穩定性強、檢測速度快、成本低廉等特點，在疾病檢測、醫療保健、疫情監測、食品檢驗檢疫等多個領域應用廣泛。

本文通過對干式熒光免疫分析儀檢測原理的深入分析，探討干式熒光免疫分析儀的校準方法，為干式熒光免疫分析儀的監管提供技術支持，保證各參數計量性能準確可靠，為人們身體健康提供保障。

2 結構和工作原理

干式熒光免疫分析儀是通過檢測試紙條上激光激發的熒光來定量檢測標志物。檢測系統由一個熒光讀數儀和檢測板組成。檢測板使用的是層析法，分析物在移動的過程中形成免疫復合物的形式。通過檢測區域或者質控區域的值與分析物不同的濃度獲得的定標曲線可檢測樣本中的分析物的濃度。

3 性能指標

3.1 外觀

（1）分析儀的外觀應平整、色澤應均勻、無明顯傷痕、劃痕、鋒棱、毛刺。

（2）各調節按鈕、按鍵和開關均能正常工作，連接線的接插件應接觸良好。

（3）樣品室應密封良好，無漏光現象。

（4）閱讀器應正常工作，數字顯示清晰、完整。

3.2 性能要求

（1）測量重復性。測量重復性（CV%）≤10%。

（2）線性相關性。在相差至少一個數量級的濃度范圍內，線性相關系數（r）≥0.9。

（3）功能性。分析儀具有開機自檢功能；分析儀具有檢驗結果輸出功能；分析儀可導入/導出文件；分析儀斷電后能存儲、記憶測試數據。

（4）噪聲。分析儀的工作噪聲應不大于85dB。

（5）電氣安全要求。應符合GB 4793.1-2007和YY 0648-2008的要求。

4 校準方法

4.1 外觀

以目力和實際操作檢查，結果應符合3.1的要求。

4.2 性能試驗

4.2.1 試驗條件

預熱時間30分鐘。

4.2.2 樣品準備

（1）稀釋原濃度微球，配制以下濃度微球：0.8，0.5，0.4，0.2，0.1，0.05，0.02，0.01。

配制方法如下：

①配制0.8濃度微球：取8ul原濃度微球，加2ul純化水，混勻。

②配制0.5濃度微球：取5ul原濃度微球，加5ul純化水，混勻。

③配制0.4濃度微球：取4ul原濃度微球，加6ul純化水，混勻。

④配制0.2濃度微球：取4ul原濃度微球，加16ul純化水，混勻。

⑤配制0.1濃度微球：取9ul0.2濃度微球，加9ul純化水，混勻。

⑥配制0.05濃度微球：取10ul0.1濃度微球，加10ul純化水，混勻。

⑦配制0.02濃度微球：取2ul0.2ul濃度微球，加18ul純化水，混勻。

⑧配制0.01濃度微球：取5ul0.02濃度微球，加5ul純化水，混勻。

（2）將上述各濃度微球稀釋10倍。

（3）大卡組裝：吸水紙、NC膜貼在PVC背板上。

（4）劃線：使用噴金劃線儀將各濃度微球劃在已組裝好的大卡相應位置，放入45℃烘箱3h后取出。

（5）切卡裝條壓板：用切割機將烘干后取出的大卡切為4mm寬度的試紙條并裝入卡殼中，使用壓板機壓緊。

4.2.3 測量重復性

4.2.4 線性相關性

不同微球測試劑盒，上機測試已知濃度的且濃度差至少為一個數量級的十個不同濃度的微球，繪制對應曲線，其相關系數應該滿足3.2.2的要求。

上機檢測微球線性結果

4.2.5 功能性

按說明書操作驗證，結果應符合3.2.3的要求。

4.2.6 噪聲

在離分析儀1m，離地1m處用聲級計（A計權網絡）分別測試其前、后、左、右四個方向的聲壓級，取最大值，結果應符合3.2.4的要求。

4.2.7 電氣安全性能

按附錄A的要求進行試驗，結果應符合3.2.5的要求。

干式熒光免疫分析儀校準方法的研究，為干式熒光免疫分析儀的校準提供了技術依據，保證了干式熒光免疫分析儀校準結果的科學性和準確性，經多次實驗證明，該校準方法可為制定相關校準規范奠定基礎。

作者簡介

萬卓，工程師，目前于沈陽計量測試院從事計量檢測工作。

（責任編輯：張曉明）