昆明蘆薈根腐病病原菌的分離及鑒定*

丁雅迪，王金華，2，繆福俊，毛德昌，謝恩來，熊智

(1．西南林業(yè)大學，云南 昆明650224;2．云南農(nóng)業(yè)大學，云南 昆明650201;3．云南省林業(yè)科學院，云南 昆明650201)

蘆薈 (Aloe chinensis)是百合科多年生草本植物，主要分布于熱帶、亞熱帶地區(qū)。蘆薈因富含多糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、活性酶、維生素等活性物質(zhì)及有益微量元素而廣泛應用于醫(yī)療、美容、保健、食品等領域［1～2］。由于巨大的商業(yè)價值引起了許多國家的高度重視，并在世界各地廣泛栽培［3］。近年來，我們國家對蘆薈的開發(fā)應用研究從20世紀末開始起步，主要集中在化妝品［4］、藥用［5～7］、保健飲料［8～9］、酒制品［10～11］、奶制品［12］等方面以及作為植物殺菌劑［13］防治植物病害，廣泛的需求催生了蘆薈的產(chǎn)業(yè)化種植，這種產(chǎn)業(yè)化種植尤以云南、海南、四川、福建等地范圍廣［14］。然而，在大規(guī)模的種植過程中，根腐病嚴重地制約了蘆薈產(chǎn)業(yè)化的發(fā)展。僅在2004年云南省的根腐病發(fā)病率達到42．54%、死亡率高達 26．36%［15］，研究蘆薈根腐病及其防治已成為目前的研究熱點。有關蘆薈根腐病方面的研究還鮮有報道。故本研究對蘆薈根腐病病原菌進行分離純化研究，結合形態(tài)與ITS測序方法鑒定其病原菌，并采用回接方法對其致病性進行測定分析，為蘆薈根腐病的生物防治提供理論基礎。

1 材料和方法

1.1 材料

采自云南省林業(yè)科學院、西南林業(yè)大學具典型根腐病癥狀的蘆薈及健康蘆薈各10株作為分離樣品，采集后置于4℃冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆茫⒂^察記載田間癥狀表現(xiàn)。

馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基 (PDA)，配方見參考文獻［16］。Ezup柱式基因組 DNA抽提試劑盒 (真菌)、2×Taq PCR Master Mix等均由生工生物工程(上海)股份有限公司提供。……