3種植物提取物對櫻桃番茄青枯病病原菌的抑菌活性

曹鵬飛

摘要：青枯病病原菌已成為櫻桃番茄優質、高產的重要障礙。比較大蒜、銀杏、海金沙3種植物提取液對青枯病病原菌的抑制作用。結果表明，隨著3種提取物濃度的增加，抑菌效果逐漸增強。3種提取物的抑菌效果極顯著高于農藥對照的最低濃度分別為大蒜提取物20%、銀杏提取40%、海金沙提取60%，且20%大蒜提取物對青枯病菌B2.1.2.2、青枯病菌I1.2.1.1、青枯病菌K5.1.1.1、青枯病菌L5.3.1.2的抑菌圈直徑分別為：9.23、8.30、8.12、9.19mm。當濃度為100%時，3種提取物的抑菌效果均最好，但大蒜提取物對供試菌株的抑菌效果最強。因此，大蒜可作為櫻桃番茄植物保護劑的主要開發原料。

關鍵詞：櫻桃番茄；青枯病菌；抑菌活性；植物提取液；大蒜；銀杏；海金沙

中圖分類號：S482.2+92文獻標志碼：A文章編號：1002-1302（2014）11-0169-02

櫻桃番茄（LycopersivonesculentumMill.）別稱圣女果，為茄科一年生草本植物，含有豐富的蛋白質、維生素以及鉀、鈣等多種礦物質及微量元素，具有降血壓、解毒、防治動脈硬化、防癌抗癌之功效[1]。近年來，櫻桃番茄價位持續走高，比普通番茄增收22500～30000元/hm2，經濟效益相當可觀。櫻桃番茄青枯病的發生與危害呈逐年加重趨勢。據調查，輕病田一般減產10%，重病田減產50%以上，該病已成為櫻桃番茄優質高產的重要障礙[2]。青枯病是由青枯菌（Ralstoniasolanacearum）引起的毀滅性土傳病害。該菌菌系復雜，寄主廣泛，高溫高濕環境下生命力頑強，能侵染50多個科450多種植物，防治難度大[3]。近年來，對于茄科番茄屬植物青枯病，農業上多用抗生素、激素來抵抗微生物的侵害，以免造成經濟損失，但大量使用抗生素、激素對人體健康有害[4]。目前，國內尚沒有理想的防治方法及農藥來防治這種土傳性的細菌病害，因此開發利用新型天然植物殺菌劑，不僅可以解決抗生素及其替代品不能解決的藥物殘留問題，還可以提高我國農產品品質。施用生態有機肥，改善土壤生態環境，提高土壤微生物多樣性，有望從根本上控制櫻桃番茄青枯病的發生[5]。本研究以大蒜、銀杏外種皮、海金沙為材料，研究其對櫻桃番茄青枯病病原菌的殺菌活性，旨在為青枯病病原菌植物源殺菌劑的綜合開發利用提供理論依據。

1材料和方法

1.1材料

青枯菌B2.1.2.2、I1.2.1.1、K5.1.1.1、L5.3.1.2均分離自感染青枯病的櫻桃番茄植株。市售白皮大蒜、銀杏外種皮、海金沙葉片（含孢子）。

1.2植物提取液的制備

1.2.1大蒜提取液的制備[6]

選取足夠數量新鮮無芽、無蟲變、無霉爛的大蒜鱗莖，剝皮后于研磨杯中榨汁，紗布過濾后，6000r/min離心2次，每次10min，取上清液，得到大蒜提取液，保存備用。

1.2.2銀杏提取液的制備[7]

取剛采摘的銀杏外種皮，60℃烘干，粉碎，過60目篩備用。料液比為1g∶10mL，將銀杏外種皮粉末用80%工業乙醇浸提，提取3次，每次4h，合并提取液后于6000r/min離心10min，取上清液，真空抽濾濃縮，銀杏外種皮提取液濃度為0.2g/mL，保存備用。

1.2.3海金沙提取液的制備[8]

取新鮮海金沙葉片（含孢子），60℃烘干，粉碎，過60目篩備用。料液比為1g∶40mL，將海金沙粉末用80%工業乙醇浸提3h后6000r/min離心10min，取上清液真空抽濾濃縮，海金沙提取液濃度為0.2g/mL，保存備用。

1.3提取液對青枯病菌的抑菌試驗

采用濾紙片法[6]進行抑菌試驗。將提取液用無菌水分別稀釋成20%、40%、60%、80%、100%，農用硫酸鏈霉素5000倍液作為農藥對照，共計6個處理。將滅菌后的濾紙片置于不同濃度提取液、農用硫酸鏈霉素5000倍液、無菌水中浸泡。將50℃左右的NA培養基倒入培養皿內，待培養基凝固后，取編號為B2.1.2.2、I1.2.1.1，K5.1.1.1、L5.3.1.2的櫻桃番茄青枯病菌菌懸液各0.2mL涂布于培養基表面，把經不同濃度藥劑浸泡的濾紙片等距離放在培養基上，7張/皿，7張分別為不同濃度的提取液、農用硫酸鏈霉素5000倍液、無菌水浸泡的濾紙片，平行3組。于30℃恒溫箱中暗培養48h后，用電子數顯卡尺測量抑菌圈直徑。

2結果與分析

2.1大蒜提取液對櫻桃番茄青枯病菌的抑菌效果

由表1可知，4種青枯病菌均在不同濃度的提取液濾紙片周圍產生直徑大小不等的抑菌圈，提取液濃度越大，抑菌圈直徑越大。當大蒜提取液濃度為20%～100%時，隨著濃度的升高，抑菌圈直徑逐漸增大。當大蒜提取液濃度為20%時，抑菌圈直徑與對照相比差異極顯著。當大蒜提取液濃度達100%時，4種供試菌株的抑菌圈直徑均達到最大，依次為10.54、11.61、10.71、17.12mm。

2.2銀杏提取液對櫻桃番茄青枯病菌的抑菌效果

銀杏提取液同樣對青枯病菌具有抑制作用，當銀杏提取液濃度為20%～100%時，抑菌圈直徑隨著濃度的增加不斷增大。當銀杏提取液濃度小于40%時，抑菌圈直徑與對照差異不顯著；當濃度大于40%時，抑菌圈直徑均極顯著高于對照；當濃度達100%時，各處理抑菌圈直徑均最大（表2）。

2.3海金沙提取液對櫻桃番茄青枯病菌抑菌效果

由表3可知，隨著提取液濃度的升高，抑菌圈直徑不斷增大。當海金沙提取液濃度小于60%時，抑菌效果較差；當海金沙提取液濃度大于60%時，抑菌效果與對照相比差異極顯著；當海金沙提取液濃度為100%時，對櫻桃番茄青枯病菌的抑菌效果最好。

3結論與討論

青枯病是由青枯菌引起的毀滅性土傳病害，是世界上危害最大、分布最廣、造成損失最嚴重的植物病害之一[3]，以茄科作物發病最為嚴重，番茄受害尤甚，被稱為植物“癌癥”。本研究比較了大蒜、銀杏外種皮、海金沙3種植物提取液對櫻桃番茄青枯病病原菌的抑制作用。結果表明，隨著3種提取物濃度的增加，抑菌效果逐漸增強。3種提取物的抑菌效果極顯著高于農藥對照的最低濃度，分別為：大蒜提取物20%、銀杏提取40%、海金沙提取60%，且20%大蒜提取物對青枯病菌B2.1.2.2、青枯病菌I1.2.1.1、青枯病菌K5.1.1.1、青枯病菌L5.3.1.2的抑菌圈直徑分別為9.23、8.30、8.12、9.19mm。這可能與提取物的有效成分有關，不同植物有效成分不同，同一植物對不同類型的青枯病菌的抑菌活性大小也存在一定差異，某些活性遇光分解或者不耐高溫，從而影響抑菌效果。大蒜提取物中的主要有效成分大蒜素能與微生物生長繁殖所必需的巰基相結合，使巰基酶失活，從而抑制微生物生長。因此，可嘗試以大蒜為主要原料開發櫻桃番茄植物保護劑，通過灌根方式來防治櫻桃番茄青枯病。

參考文獻：

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[8]楊斌，陳功錫，唐克華，等.海金沙提取物抑菌活性研究[J].中藥材，2011，34（2）：267-272.

青枯病是由青枯菌引起的毀滅性土傳病害，是世界上危害最大、分布最廣、造成損失最嚴重的植物病害之一[3]，以茄科作物發病最為嚴重，番茄受害尤甚，被稱為植物“癌癥”。本研究比較了大蒜、銀杏外種皮、海金沙3種植物提取液對櫻桃番茄青枯病病原菌的抑制作用。結果表明，隨著3種提取物濃度的增加，抑菌效果逐漸增強。3種提取物的抑菌效果極顯著高于農藥對照的最低濃度，分別為：大蒜提取物20%、銀杏提取40%、海金沙提取60%，且20%大蒜提取物對青枯病菌B2.1.2.2、青枯病菌I1.2.1.1、青枯病菌K5.1.1.1、青枯病菌L5.3.1.2的抑菌圈直徑分別為9.23、8.30、8.12、9.19mm。這可能與提取物的有效成分有關，不同植物有效成分不同，同一植物對不同類型的青枯病菌的抑菌活性大小也存在一定差異，某些活性遇光分解或者不耐高溫，從而影響抑菌效果。大蒜提取物中的主要有效成分大蒜素能與微生物生長繁殖所必需的巰基相結合，使巰基酶失活，從而抑制微生物生長。因此，可嘗試以大蒜為主要原料開發櫻桃番茄植物保護劑，通過灌根方式來防治櫻桃番茄青枯病。

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