鉤藤生根壯苗培養(yǎng)基優(yōu)化及移栽基質(zhì)的篩選

潘麗梅+馬小軍+韋榮昌+唐其+韋樹根+莫長明+付金娥

摘要：以鉤藤無菌莖尖組培苗為試驗材料，研究不同基本培養(yǎng)基、不同激素配比對鉤藤生根壯苗的影響；同時以優(yōu)良的組培苗為試驗材料，搭配不同比例的基質(zhì)，研究其對鉤藤組培苗移栽成活率和生長狀況的影響。結(jié)果顯示，1/2MS+0.2mg/LNAA+0.2mg/LIBA激素組合的培養(yǎng)基生根壯苗效果最好，所發(fā)的新根粗壯，根長適中，根數(shù)較多，最適于煉苗移栽；移栽基質(zhì)以體積比2∶1∶1的塘泥∶育苗土∶蛭石較佳，移栽成活率可達90%以上，且生長狀況最佳。

關(guān)鍵詞：鉤藤；生根壯苗；移栽；基質(zhì)篩選

中圖分類號：S567.1+90.4文獻標志碼：A 文章編號：1002-1302（2014）11-0083-02

鉤藤[Uncariarhynchopylla（Miq.）Jacks]為茜草科鉤藤屬木本植物，別稱耿馬鉤藤、雙鉤藤、雙鉤、無柄果鉤藤[1]，產(chǎn)于廣東、廣西、云南、貴州、福建、湖南等地，常生于山谷溪邊的疏林或灌叢中，為我國的著名中藥。鉤藤的功能為清血平肝、息風(fēng)定驚等，可用于風(fēng)熱頭痛、感冒夾驚、驚痛抽搐等癥，所含鉤藤堿有降血壓作用，是一種較好的藥材，其根也可入藥[2-3]。由于鉤藤用途廣泛，療效明確，近年來國內(nèi)外市場對該藥材的需求量激增，致使其野生資源遭到嚴重的采挖，資源漸顯枯竭，在進行鉤藤種苗的生產(chǎn)過程中，最快速有效的一條繁殖途徑為組織培養(yǎng)，而組織培養(yǎng)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)就是對組培苗進行生根壯苗培養(yǎng)及移栽馴化，其中移栽基質(zhì)是提高組培苗移栽成活率、促進種苗健壯生長的重要因素之一[4]，基質(zhì)選擇的原則是疏松透氣，具有一定的保水保肥能力，容易滅菌處理，不利于雜菌孳生等[5]。因此，本試驗在組織培養(yǎng)基礎(chǔ)上優(yōu)化生根壯苗培養(yǎng)基，并對影響鉤藤組培苗移栽成活率和成苗生長的基質(zhì)類型及配比進行優(yōu)化篩選研究，以期為鉤藤組培苗的規(guī)?；a(chǎn)提供參考和理論依據(jù)。

1材料與方法

鉤藤組培苗為廣西藥用植物園組織培養(yǎng)室經(jīng)多次繼代繁殖的鉤藤莖尖組培苗。

1.1鉤藤生根壯苗培養(yǎng)基的優(yōu)化試驗

供試材料為3cm左右、葉片張開、綠色的鉤藤無菌試管幼苗，在超凈臺上將其取出后分別接種到高壓滅菌的生根壯苗培養(yǎng)基中，每瓶接種5株。生根壯苗培養(yǎng)基設(shè)6個處理：A1，1/2MS+0.2mg/LNAA；A2，1/2MS+0.2mg/LIBA；A3，1/2MS+0.2mg/LNAA+0.2mg/LIBA；B1，MS+0.2mg/LNAA；B2，MS+0.2mg/LIBA；B3，MS+0.2mg/LNAA+0.2mg/LIBA。每個處理培養(yǎng)基中均加入蔗糖25g/L，瓊脂4.5g/L，活性炭1g/L，每個處理培養(yǎng)基均接種20瓶。接種后置于培養(yǎng)溫度為（25±2）℃、光照強度1500～2000lx下光照培養(yǎng)時間12h/d。培養(yǎng)30d后統(tǒng)計幼苗生根率、生根數(shù)、根長和株高，分析不同培養(yǎng)基對鉤藤組培苗生長情況的影響。

1.2鉤藤組培苗移栽基質(zhì)的篩選試驗

1.2.1煉苗及預(yù)處理選擇在生根壯苗培養(yǎng)基中培養(yǎng)時間為25d、高約4cm、葉片4～5張、長勢一致的已生根鉤藤莖尖苗。在移栽環(huán)境下先閉瓶強光煉苗3～5d，再打開瓶蓋繼續(xù)煉苗3～4d，每天保持噴霧澆水以避免葉片水分過快流失而萎蔫。移栽時選取生長狀況良好、株高3～5cm、根長2～3cm、每株具4～5條根系的組培苗作為移栽材料，用鑷子將小苗輕輕取出后用自來水沖洗干凈，在0.1%高錳酸鉀溶液中浸泡30s備用。

1.2.2移栽基質(zhì)的消毒及配制移栽基質(zhì)在使用前，于160℃高溫下烘8h消毒，以塘泥為基本基質(zhì)，按不同比例（體積比）混合配制成8種移栽基質(zhì)（表1），每種基質(zhì)裝2個育苗框，每個育苗框30株苗，3次重復(fù)。

1.2.3組培苗的移栽將預(yù)處理的組培苗移栽到8種不同的試驗基質(zhì)中，隨機移苗，注意及時噴水保持濕度。定期記錄移栽組培苗的成活率、株高、根數(shù)、根長、長勢等情況。

2結(jié)果與分析

2.1鉤藤生根壯苗培養(yǎng)基優(yōu)化試驗

由表2可知，接種在1/2MS培養(yǎng)基中的試管苗在接種1周后就開始出現(xiàn)新根的分化，而接種在MS培養(yǎng)基中的試管苗則是在接種后3周才有較明顯的新根分化，說明1/2MS培養(yǎng)基更有利于新根的分化；從生根率來看，也說明了1/2MS培養(yǎng)基更有利于新根的分化。在只添加NAA的生根培養(yǎng)基A1中，雖然平均根長較長，但其根較細小，容易折斷而不利于移栽成活；只添加IBA的生根培養(yǎng)基A2，根雖比A1中的根粗，但生根數(shù)變少，顏色呈現(xiàn)淡褐色；1/2MS培養(yǎng)基中以NAA與IBA組合使用（A3）的生根率最好，平均生根條數(shù)達到7.25條，平均根長3.62cm，與MS培養(yǎng)基相同激素組合（B3）的生根率相比差異極顯著。從組培苗的生長狀態(tài)來看，接種在MS培養(yǎng)基中的試管苗更傾向于根上部的生長，即莖葉的生長，而根系則生長緩慢，根部生長一段時間后生長點出現(xiàn)愈傷化現(xiàn)象，根不再生長，因此不適于作為生根培養(yǎng)基。綜合上述因素分析可知，A3處理最適合鉤藤壯苗生根。

2.2鉤藤組培苗移栽基質(zhì)的篩選試驗

2.2.1不同基質(zhì)對鉤藤組培苗移栽成活的影響從鉤藤組培苗移栽60d后的調(diào)查結(jié)果（圖1）可看出，T7處理的移栽成活率最高，為96.35%，且根系發(fā)達、粗壯；T6處理次之，為91.65%；T7、T6處理間差異不顯著，但均與其他處理間差異顯著，且與T1、T2處理差異極顯著；處理T1的成活率最低，且根系分支少而短，生長差，不適合作為鉤藤組培苗的移栽基質(zhì)。

2.2.2不同基質(zhì)對鉤藤組培苗葉片數(shù)的影響由圖2可以看出，經(jīng)過30～40d的生長，穩(wěn)定成活后的鉤藤組培苗在不同基質(zhì)處理下的平均葉片數(shù)均可達到4張以上，其中處理T7的平均葉片數(shù)最多，為6.11張，其次為T6處理，平均為5.93張，處理T5、T8的平均葉片數(shù)也達5張以上，這4個處理間差異均不顯著，但與其他4個處理差異顯著。

2.2.3不同基質(zhì)對鉤藤組培苗株高的影響鉤藤組培苗移栽時的株高基本在4.5cm左右，由圖3可知，在不同基質(zhì)中穩(wěn)定成活后，鉤藤組培苗株高均有增加，其中以處理T6的植株最高，達8.67cm，與T5、T7處理差異顯著，與T1、T2、T3、T4、T8處理差異極顯著；T5、T7間差異不顯著，T2、T3、T4處理間差異不顯著?？梢?，處理T6的植株根系最發(fā)達，最有利于吸收養(yǎng)分，植株生長快。

2.2.4不同基質(zhì)對鉤藤組培苗莖粗的影響從圖4可以看出，不同基質(zhì)處理間組培苗莖粗差異明顯，其中T7的莖最粗（0.19cm），T3最細（0.09cm），且T7與其他各處理間差異顯著或極顯著，與T2、T3、T4、T5處理間差異極顯著。可見，T7處理的組培苗的莖最粗，效果最好。

3結(jié)論與討論

3.1生根與壯苗

從基本培養(yǎng)基看，1/2MS培養(yǎng)基生根快，且長出的新根較粗壯，而MS培養(yǎng)基生根緩慢，且新根細長，根數(shù)少，因此1/2MS培養(yǎng)基更適合鉤藤組培苗生根。激素NAA與IBA對鉤藤組培苗的生根、壯苗均有促進作用，6個處理中以1/2MS+0.2mg/LNAA+0.2mg/LIBA組合（A3培養(yǎng)基）的生根壯苗效果最好，所發(fā)的新根粗壯，根長適中，最適于移栽煉苗。

3.2移栽

在環(huán)境適宜的條件下，組培苗移栽生根過程中栽培基質(zhì)發(fā)揮著重要作用，基質(zhì)的物理性狀及化學(xué)成分不同，其保水性、保肥能力以及透氣性不同，對組培苗的移栽成活和后期生長有重要的影響[6]。本試驗結(jié)果表明，在8種不同的移栽基質(zhì)中，鉤藤組培苗的成活率和生長狀況差異明顯，根據(jù)各生長指標測定數(shù)據(jù)，最適合的基質(zhì)配方是塘泥∶育苗土∶蛭石體積比為2∶1∶1的基質(zhì)（T7），其次是塘泥∶育苗土∶珍珠巖體積比為2∶1∶1的基質(zhì)（T6），移栽成活率均達90%以上，且長勢良好。加有園土的基質(zhì)，鉤藤組培苗成活率普遍偏低，且植株長勢弱，葉色淡，莖稈纖細，根短小而弱，雖然園土的吸水性和保水性強，但比較容易板結(jié)，透氣性差，組培苗根系受到影響，從而引起種苗生長不旺盛。在塘泥中加入育苗土后，結(jié)合蛭石或珍珠巖，改善了塘泥的透氣性，提高了組培苗的成活率，進一步促生了新根，也促進了幼苗的生長，因而最適合組培苗移栽種植。

參考文獻：

[1]徐祥浩，吳翰.中國鉤藤屬植物的整理[J].華南農(nóng)學(xué)院學(xué)報，1981（3）：21-32.

[2]韋樹根，馬小軍，施力軍，等.鉤藤扦插繁殖試驗[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39（6）：415-416.

[3]施力軍，蘇建春，蔣向軍，等.鉤藤組培技術(shù)體系研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，38（6）：2937，2955.

[4]何應(yīng)對，馬蔚紅，韓麗娜，等.3種基質(zhì)配方對香蕉組培苗生長的影響[J].中國南方果樹，2010，39（6）：38-39.

[5]吳麗芳，丁偉，陸偉東，等.不同基質(zhì)對密閉培養(yǎng)下梔子組培苗移栽成活率的影響[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010（1）：172-173.

[6]肖旭峰，劉明月.不同基質(zhì)配比對馬鈴薯微型薯生長發(fā)育的影響[J].江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2008，30（3）：460-463.

2.2.3不同基質(zhì)對鉤藤組培苗株高的影響鉤藤組培苗移栽時的株高基本在4.5cm左右，由圖3可知，在不同基質(zhì)中穩(wěn)定成活后，鉤藤組培苗株高均有增加，其中以處理T6的植株最高，達8.67cm，與T5、T7處理差異顯著，與T1、T2、T3、T4、T8處理差異極顯著；T5、T7間差異不顯著，T2、T3、T4處理間差異不顯著?？梢?，處理T6的植株根系最發(fā)達，最有利于吸收養(yǎng)分，植株生長快。

2.2.4不同基質(zhì)對鉤藤組培苗莖粗的影響從圖4可以看出，不同基質(zhì)處理間組培苗莖粗差異明顯，其中T7的莖最粗（0.19cm），T3最細（0.09cm），且T7與其他各處理間差異顯著或極顯著，與T2、T3、T4、T5處理間差異極顯著。可見，T7處理的組培苗的莖最粗，效果最好。

3結(jié)論與討論

3.1生根與壯苗

從基本培養(yǎng)基看，1/2MS培養(yǎng)基生根快，且長出的新根較粗壯，而MS培養(yǎng)基生根緩慢，且新根細長，根數(shù)少，因此1/2MS培養(yǎng)基更適合鉤藤組培苗生根。激素NAA與IBA對鉤藤組培苗的生根、壯苗均有促進作用，6個處理中以1/2MS+0.2mg/LNAA+0.2mg/LIBA組合（A3培養(yǎng)基）的生根壯苗效果最好，所發(fā)的新根粗壯，根長適中，最適于移栽煉苗。

3.2移栽

在環(huán)境適宜的條件下，組培苗移栽生根過程中栽培基質(zhì)發(fā)揮著重要作用，基質(zhì)的物理性狀及化學(xué)成分不同，其保水性、保肥能力以及透氣性不同，對組培苗的移栽成活和后期生長有重要的影響[6]。本試驗結(jié)果表明，在8種不同的移栽基質(zhì)中，鉤藤組培苗的成活率和生長狀況差異明顯，根據(jù)各生長指標測定數(shù)據(jù)，最適合的基質(zhì)配方是塘泥∶育苗土∶蛭石體積比為2∶1∶1的基質(zhì)（T7），其次是塘泥∶育苗土∶珍珠巖體積比為2∶1∶1的基質(zhì)（T6），移栽成活率均達90%以上，且長勢良好。加有園土的基質(zhì)，鉤藤組培苗成活率普遍偏低，且植株長勢弱，葉色淡，莖稈纖細，根短小而弱，雖然園土的吸水性和保水性強，但比較容易板結(jié)，透氣性差，組培苗根系受到影響，從而引起種苗生長不旺盛。在塘泥中加入育苗土后，結(jié)合蛭石或珍珠巖，改善了塘泥的透氣性，提高了組培苗的成活率，進一步促生了新根，也促進了幼苗的生長，因而最適合組培苗移栽種植。

參考文獻：

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[5]吳麗芳，丁偉，陸偉東，等.不同基質(zhì)對密閉培養(yǎng)下梔子組培苗移栽成活率的影響[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010（1）：172-173.

[6]肖旭峰，劉明月.不同基質(zhì)配比對馬鈴薯微型薯生長發(fā)育的影響[J].江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2008，30（3）：460-463.

2.2.3不同基質(zhì)對鉤藤組培苗株高的影響鉤藤組培苗移栽時的株高基本在4.5cm左右，由圖3可知，在不同基質(zhì)中穩(wěn)定成活后，鉤藤組培苗株高均有增加，其中以處理T6的植株最高，達8.67cm，與T5、T7處理差異顯著，與T1、T2、T3、T4、T8處理差異極顯著；T5、T7間差異不顯著，T2、T3、T4處理間差異不顯著。可見，處理T6的植株根系最發(fā)達，最有利于吸收養(yǎng)分，植株生長快。

2.2.4不同基質(zhì)對鉤藤組培苗莖粗的影響從圖4可以看出，不同基質(zhì)處理間組培苗莖粗差異明顯，其中T7的莖最粗（0.19cm），T3最細（0.09cm），且T7與其他各處理間差異顯著或極顯著，與T2、T3、T4、T5處理間差異極顯著。可見，T7處理的組培苗的莖最粗，效果最好。

3結(jié)論與討論

3.1生根與壯苗

從基本培養(yǎng)基看，1/2MS培養(yǎng)基生根快，且長出的新根較粗壯，而MS培養(yǎng)基生根緩慢，且新根細長，根數(shù)少，因此1/2MS培養(yǎng)基更適合鉤藤組培苗生根。激素NAA與IBA對鉤藤組培苗的生根、壯苗均有促進作用，6個處理中以1/2MS+0.2mg/LNAA+0.2mg/LIBA組合（A3培養(yǎng)基）的生根壯苗效果最好，所發(fā)的新根粗壯，根長適中，最適于移栽煉苗。

3.2移栽

在環(huán)境適宜的條件下，組培苗移栽生根過程中栽培基質(zhì)發(fā)揮著重要作用，基質(zhì)的物理性狀及化學(xué)成分不同，其保水性、保肥能力以及透氣性不同，對組培苗的移栽成活和后期生長有重要的影響[6]。本試驗結(jié)果表明，在8種不同的移栽基質(zhì)中，鉤藤組培苗的成活率和生長狀況差異明顯，根據(jù)各生長指標測定數(shù)據(jù)，最適合的基質(zhì)配方是塘泥∶育苗土∶蛭石體積比為2∶1∶1的基質(zhì)（T7），其次是塘泥∶育苗土∶珍珠巖體積比為2∶1∶1的基質(zhì)（T6），移栽成活率均達90%以上，且長勢良好。加有園土的基質(zhì)，鉤藤組培苗成活率普遍偏低，且植株長勢弱，葉色淡，莖稈纖細，根短小而弱，雖然園土的吸水性和保水性強，但比較容易板結(jié)，透氣性差，組培苗根系受到影響，從而引起種苗生長不旺盛。在塘泥中加入育苗土后，結(jié)合蛭石或珍珠巖，改善了塘泥的透氣性，提高了組培苗的成活率，進一步促生了新根，也促進了幼苗的生長，因而最適合組培苗移栽種植。

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[5]吳麗芳，丁偉，陸偉東，等.不同基質(zhì)對密閉培養(yǎng)下梔子組培苗移栽成活率的影響[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010（1）：172-173.

[6]肖旭峰，劉明月.不同基質(zhì)配比對馬鈴薯微型薯生長發(fā)育的影響[J].江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2008，30（3）：460-463.