精液白細胞與精液質量的關系*

肖劍鋒，鄭 敏，張新能，李志凌＊＊

(1.汕頭大學醫學院第一附屬醫院生殖醫學科，廣東 汕頭 515041;2.湖北科技學院生物醫學工程學院;3.汕頭大學醫學院第一附屬醫院檢驗科)

白細胞精子癥是指精液樣品出現白細胞，根據世界衛生組織(WHO)規定精液中白細胞≥1 ×106/ml 即為白細胞精子癥，其發生率為10%～20%［1］。白細胞精子癥與男性生殖道炎癥、免疫性疾病、不良刺激有關(例如:吸煙、酗酒及吸食大麻等)［2，3］。在男性生殖系統，精子只生成少量的氧自由基(ROS)，而大部分的ROS 產物由浸潤或者感染的白細胞生成。白細胞直接和間接生成的ROS 產物可以影響精子的功能，低水平的ROS 發揮生理作用，但是過高的ROS 可以導致氧化應激損傷，通過脂質過氧化反應損傷精子細胞膜，從而降低受孕幾率［3，4］。為進一步了解白細胞精子癥對精子質量的影響，本文對在我院檢驗科精液分析室進行檢查的男性精液質量及精子形態進行了回顧性研究。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選擇2013 年1 月至2014 年12月來我院檢驗科精液分析室進行精液檢查的男性患者984例，年齡分布19～45 歲，平均年齡(34.26 ±5.45)歲，體檢未發現明顯睪丸、附睪、輸精管異常，排除淋球菌感染，外周血染色體核型分析正常。所有患者無性功能障礙病史，無外傷及遺傳性疾病家族史。

1.2 方法

1.2.1 精液常規檢查 患者禁欲2～7d，以手淫法取精于清潔廣口無毒塑料取精杯內，37℃恒溫加熱板30min，待其液化。精液量的評估采用電子天平稱重法測量。按照WHO《人類精液檢查與處理實驗室手冊》第5 版標準進行精液常規分析。精液動態參數檢測采用北京偉力全自動精液分析儀進行，所有標本的精液分析均由1 名技術人員操作完成。

1.2.2 白細胞檢測 采用聯苯胺染色法(試劑盒購于深圳華康生物醫學工程有限公司)檢測，待精液完全液化后，取新鮮混勻精液10μl 于載玻片上，加入10μl 聯苯胺染液，混合均勻，加蓋玻片于37℃加熱板放置20min 后鏡檢。

1.2.3 分組 按精液中白細胞濃度將患者分為兩組，白細胞精子癥組160例:即精液中白細胞≥1 ×106/ml;非白細胞精子癥組824例，即白細胞＜1 ×106/ml。

1.3 統計學分析 結果用SPSS 統計軟件進行統計分析，計量資料采用獨立樣本t 檢驗，計數資料采用卡方檢驗，P ＜0.05 為差異顯著，P ＜0.01 為差異極顯著。

2 結果

2.1 白細胞對精液pH 值及粘稠度的影響 白細胞精子癥組的精液黏稠度異常增高，但差異無統計學意義，兩組患者的精液pH 值異常差異有統計學意義(P ＜0.05)，見表1。

表1 白細胞對精液黏稠度及pH 值的影響

2.2 白細胞對精液量及精子各主要參數的影響兩組患者年齡、禁欲時間及精液量等因素均無差異，但是白細胞精子癥組的精子濃度、前向運動精子(PR)百分率明顯低于非白細胞精子癥組，差異極顯著(P ＜0.01)。白細胞精子癥組的精子運動參數:曲線速度、直線速度和平均路徑速度均低于非白細胞精子癥組，差異極顯著(P 均＜0.01)，見表2。

表2 白細胞對精子各主要參數的影響

3 討論

精液質量是評價男性生育能力的重要指標，因此，男性精液質量的評估尤其重要。根據《世界衛生組織人類精液檢查與處理實驗室手冊》(第5版)進行精液檢查，要分析精液量、精子濃度、活率及活力和精液中白細胞數量等多項參數。精液中的白細胞主要來源于附睪，可被細菌和精液中損傷的精子激活，從而清除變形、退化和凋亡的精子，阻止損傷的精子進入女性生殖系統，提高受精幾率。然而炎癥細胞可以直接或間接釋放炎癥因子(ROS、蛋白酶、細胞因子和淋巴因子)與精子相互作用影響精子功能［1］。白細胞精子癥是導致男性不育的重要因素，精液中ROS 的增加是其引起不育的主要機制。

本研究表明，精液中白細胞增加可以導致精子主要參數呈現明顯降低，精子的活動力下降，我們研究發現白細胞與精子參數相關性與其他研究結果一致［5］。精子細胞膜包含大量脂肪酸，對氧化應激損傷敏感，白細胞是精液中ROS 的主要來源，過多的ROS 可以導致精子的活力降低、膜功能受損、線粒體膜電位改變及DNA 損傷，甚至精子細胞的凋亡［6，7］。白細胞精子癥引起的精子動態參數降低可能與精子膜功能受損及線粒體膜電位的改變有關，線粒體作為能量代謝的重要場所，產生ATP，為精子的快速運動提供能量。線粒體膜電位改變，導致ATP 合成減少，最終導致精子運動的動態參數降低［8］。白細胞中的過氧化物酶、彈性蛋白酶和膠原酶，及其產物白介素8、腫瘤壞死因子α 等也會對精子產生損傷，使精子運動能力降低。本研究結果表明:白細胞精子癥可導致精液pH 值、精子濃度、活率及運動參數降低，但對精液量及其粘稠度無明顯影響。目前，臨床對白細胞精子癥患者主要是抗炎或抗氧化治療，降低精子中白細胞濃度，也可通過補充鋅或復合性維生素改善精子活率及活力來提供男性患者生育能力。

［1］Agarwal A，Mulgund A，Alshahrani S，et al.Reactive oxygen species and sperm DNA damage in infertile men presenting with low level leukocytospermia［J］.Reprod Biol Endocrinol，2014，12(1):126

［2］Aitken RJ，Buckingham DW，Brindle J，et al.Analysis of sperm movement in relation to the oxidative stress created by leukocytes in washed sperm preparations and seminal plasma［J］.Hum Reprod，1995，10(8):2061

［3］Henkel R，Kierspel E，Stalf T，et al.Effect of reactive oxygen species produced by spermatozoa and leukocytes on sperm functions in non-leukocytospermic patients［J］.Fertil Steril，2005，83(3):635

［4］Fraczek M，Wiland E，Piasecka M，et al.Fertilizing potential of ejaculated human spermatozoa during in vitro semen bacterial infection［J］.Fertil Steril，2014，102(3):711

［5］Moskovtsev SI，Willis J，White J，et al.Leukocytospermia:relationship to sperm deoxyribonucleic acid integrity in patients evaluated for male factor infertility［J］.Fertil Steril，2007，88(3):737

［6］Sanchez V，Redmann K，Wistuba J，et al.Oxidative DNA damage in human sperm can be detected by Raman microspectroscopy［J］.Fertil Steril，2012，98(5):1124

［7］Kadirvel G，Periasamy S，Kumar S.Effect of cryopreservation on apoptotic-like events and its relationship with cryocapacitation of buffalo (Bubalus bubalis)sperm［J］.Reprod Domest Anim，2012，47(1):143

［8］Aitken RJ，Baker MA.Oxidative stress，spermatozoa and leukocytic infiltration:relationships forged by the opposing forces of microbial invasion and the search for perfection［J］.J Reprod Immunol，2013，100(1):11