喉鱗癌中三磷酸腺苷酶家族蛋白2、抗磷酸化致癌基因和張力蛋白同源的磷酸酶基因的表達及意義

朱赟 王小紅

1.浙江省鄞州第二醫院耳鼻咽喉科，浙江寧波315100；2.浙江省腫瘤醫院化療中心，浙江杭州310022

喉鱗癌中三磷酸腺苷酶家族蛋白2、抗磷酸化致癌基因和張力蛋白同源的磷酸酶基因的表達及意義

朱赟1王小紅2

1.浙江省鄞州第二醫院耳鼻咽喉科，浙江寧波315100；2.浙江省腫瘤醫院化療中心，浙江杭州310022

目的檢測喉鱗癌中三磷酸腺苷酶家族蛋白2（ATAD2）、抗磷酸化致癌基因（C-MYC）和張力蛋白同源的磷酸酶基因（PTEN）的表達，分析其臨床價值。方法收集2012年3月～2014年2月經寧波市鄞州第二醫院診斷并行喉鱗癌根治術的患者99例，選擇術中留取的癌組織標本作為觀察組，選擇其中78例患者癌旁正常組織標本為對照組。采用免疫組化檢測二組中ATAD2、C-MYC和PTEN的表達。結果觀察組中ATAD2（63.64%比12.82%）和C-MYC（70.71%比16.67%）表達的陽性率明顯高于對照組，PTEN的表達明顯低于對照組（20.20%比82.50%），差異有高度統計學意義（P＜0.01）。觀察組中ATAD2、C-MYC和PTEN表達的陽性率與腫瘤體積、淋巴結轉移、脈管浸潤和Ki67的表達有關（P＜0.05）。相關性分析顯示觀察組中ATAD2與C-MYC的表達呈正相關（r=0.43，P＜0.05），ATAD2與PTEN的表達呈負相關（r=-0.46，P＜0.05）。結論喉鱗癌組織中ATAD2、C-MYC高表達、PTEN低表達，對腫瘤的發生和進展有促進作用，ATAD2與C-MYC、PTEN可能具有一定的協同作用。

喉鱗癌；三磷酸腺苷酶家族蛋白2；抗磷酸化致癌基因；張力蛋白同源的磷酸酶基因

喉鱗癌臨床常見，病變發展過程中基因和蛋白異常表達是其重要的促進因素。三磷酸腺苷酶家族蛋白2（ATAD2）是一種雌、雄激素受體，研究認為抗磷酸化致癌基因（C-MYC）可能與多種基因的活化物和調節通路有關[1-2]。近年來研究認為ATAD2高表達可以有效促進腫瘤的進展[3-4]。張力蛋白同源的磷酸酶基因（PTEN）可以調節腫瘤細胞中DNA合成及細胞的分化，對腫瘤進展有促進作用[5-6]。PTEN是臨床標記預后常用的蛋白，能對細胞信號通路中的信號分子起作用，并通過誘導細胞周期阻滯和調節細胞凋亡發揮抑制腫瘤的作用[7-8]。本研究重點探討喉鱗癌中ATAD2、C-MYC和PTEN的表達，并分析其臨床意義，現報道如下：

1 材料與方法

1.1 實驗材料

收集2012年3月～2014年2月，寧波市鄞州第二醫院經診斷并行喉鱗癌根治術的患者99例，選擇術中留取的癌組織標本作為觀察組，選擇其中78例患者的距腫瘤邊緣大于3 cm，并經病理證實為正常鱗狀上皮的喉黏膜組織為對照組。所有標本均經病理主治醫師再次閱片確認，并排除術前行放、化療的患者。觀察組中男58例，女41例，年齡40～81歲，平均（62.6± 5.4）歲；對照組中男40例，女38例，年齡40～79歲，平均（60.5±5.2）歲。兩組性別、年齡的一般資料比較，差異有統計學意義（P＜0.05），具有可比性。

1.2 方法

免疫組化檢測ATAD2、C-MYC和PTEN蛋白的表達，應用免疫組織化學技術二步法，DAB染色，嚴格實驗步驟。ATAD2、C-MYC和PTEN蛋白檢測結果的判定方法：ATAD2陽性部位是細胞核，C-MYC和PTEN陽性部位是細胞質和/或細胞膜；選擇10個400倍的高倍視野對上皮細胞進行觀察，計算陽性細胞數與總細胞數的比值，取平均值，≥25%為陽性，＜25%為陰性。

采用統計軟件SAS 6.12對數據進行分析，正態分布計量資料以均數±標準差表示，兩組間比較采用t檢驗；計數資料以率表示，采用χ2檢驗。相關性分析采用線性相關性分析法。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組中ATAD2、C-MYC和PTEN蛋白表達情況

ATAD2和C-MYC在觀察組中的表達陽性率明顯高于對照組，PTEN的表達陽性率明顯低于對照組，差異有高度統計學意義（P＜0.01）。見表1。

2.2 觀察組中不同臨床特征ATAD2、CMYC和PTEN表達情況

觀察組中ATAD2、C-MYC和PTEN的表達與腫瘤最大徑、淋巴結轉移、脈管浸潤和Ki67的表達有關。見表2。

2.3 觀察組中ATAD2、C-MYC和PTEN表達的相關性分析

發熱是多種疾病所共有的病理過程，除去病因外，對發熱本身的治療應針對病情，權衡利弊。對一些原因不明的發熱，不能急于降低體溫，以免掩蓋病情、延誤診斷和抑制機體的免疫功能。

線性進行相關性分析顯示：ATAD2與C-MYC呈正相關（r=0.43，P=0.0420），ATAD2與PTEN呈負相關（r=-0.46，P=0.0371）。

3 討論

喉鱗癌常見于中老年人，腫瘤常由異型增生的鱗狀上皮發展而來，在此過程中，多種基因和蛋白的表達出現異常。ATAD2定位在染色體8q24，是ATP酶家族的重要成員[9-10]。目前研究顯示ATAD2蛋白為含有220個氨基酸的蛋白，其結構中有典型的ATP結合位點，此位點也是ATAD2對下游蛋白合成與分解重要的調控點[11-12]。近來多項研究認為ATAD2高表達與腫瘤的進展有關[13-14]。C-MYC是癌基因，可以和DNA進行有效地結合，并調控轉錄因子。也有研究認為CMYC是細胞周期的調控開關之一，即決定從G0/G1期進入S期[15]。也有觀點認為C-MYC異常表達對細胞的正常生長發育及癌變起重要作用[16]。PTEN作為機體首先發現的磷酸酯酶活性的蛋白，可以引起細胞內第二信使磷脂酰肌醇（3，4，5）-三磷酸（PIP3）出現去磷酸化，抑制細胞的增殖過程[17]。也有研究顯示腫瘤在進展中PTEN低表達時可以引起內皮細胞遷移能力增強及腫瘤血管的新生，進而加速腫瘤進展[18]。

表1 兩組三磷酸腺苷酶家族蛋白2、抗磷酸化致癌基因和張力蛋白同源的磷酸酶基因蛋白表達情況[n（%）]

表2 觀察組中不同臨床特征三磷酸腺苷酶家族蛋白2、抗磷酸化致癌基因和張力蛋白同源的磷酸酶基因表達情況[n（%）]

免疫組化技術成熟，其標記的蛋白表達準確、客觀。實驗結果顯示ATAD2和C-MYC的表達在觀察組中升高（P＜0.05），PTEN的表達在觀察組中下降（P＜0.05），提示ATAD2、C-MYC高表達、PTEN低表達促進腫瘤的發生。實驗結果顯示觀察組中ATAD2、C-MYC和PTEN表達的陽性率與腫瘤體積、淋巴結轉移、脈管浸潤和Ki67的表達有關（P＜0.05），提示三者異常表達促進腫瘤的生長、淋巴結播散、脈管侵犯和細胞的增殖過程。由于以上因素均為臨床判斷腫瘤生物學行為、預后的重要指標，因此三者異常表達可能在一定程度上提示患者預后情況。本實驗的相關性分析顯示觀察組中ATAD2和C-MYC的表達呈正相關（r=0.43，P＜0.05），ATAD2和PTEN的表達呈負相關（r=-0.46，P＜0.05），提示ATAD2可以調節CMYC和PTEN的表達，三者具有一定的協同作用。有研究顯示ATAD2與C-MYC可能與中介蛋白和活化物相關，即ATAD2與C-MYC對下游蛋白的調節作用可能更趨于一致，引起腫瘤的惡性轉化和進展[19-20]。也有觀點認為ATAD2是雌激素受體的共活化物，可以由前列腺素等誘導而激活，激活的ATAD2作用于雌激素受體的下游靶基因，如C-MYC和E2F等，進而引起細胞的增殖，加速腫瘤的生長和浸潤[21]。但是關于ATAD2、C-MYC和PTEN協同作用的具體調節機制有待更多基礎實驗證實。

綜上所述，喉鱗癌組織中ATAD2、C-MYC高表達、PTEN低表達，對腫瘤的發生和進展有促進作用，ATAD2與C-MYC、PTEN可能具有一定的協同作用。

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Expression and significance of ATAD2,C-MYC and PTEN in laryngeal squamous carcinoma

ZHU Yun1WANG Xiaohong2
1.Department of Otolaryngology,Yinzhou Second Hospital,Zhejiang Province,Ningbo 315100,China;2.Chemotherapy Center,Zhejiang Provincial Tumor Hospital,Zhejiang Province,Hangzhou 310022,China

ObjectiveTo detect the expressions of ATAD2,C-MYC and PTEN in laryngeal squamous carcinonma,analyze their clinical significance.MethodsFrom March 2012 to February 2014,in Yinzhou Second Hospital,99 patients diagnosed and underwent laryngeal squamous carcinoma radical prostatectomy were collected,intraoperative carcinoma tissue samples were selected as observation group,normal tissue adjacent to carcinoma samples of 78 cases from these laryngeal squamous carcinonma patients were selected as control group.Expressions of ATAD2,C-MYC and PTEN were detected by IHC methods in two groups.ResultsThe positive rate of ATAD2(63.64%vs12.82%)and C-MYC (70.71%vs16.67%)were in the observation group higher than those in control group,the positive rate of PTEN in the observation group were lower than that in control group(20.20%vs82.50%),the differences were statistically significant(P＜0.01).The positive rate of ATAD2,C-MYC and PTEN were correlated with tumor size,lymph node metastasis,vascular invasion and Ki67 expression(P＜0.05).In observation group,there was a positive relationship between ATAD2 and C-MYC(r=0.43,P＜0.05),and a negative relationship between ATAD2 and PTEN in observation group (r=-0.46,P＜0.05).ConclusionThe higher-expressions of ATAD2 and C-MYC,lower-expression of PTEN can promote occurrence and development in laryngeal squmous carcinoma.ATAD2 and C-MYC,ATAD2 and PTEN may have a syngergistic effect.

Laryngeal squmous carcinoma;ATAD2;C-MYC;PTEN;IHC

R739.65

A

1673-7210（2015）07（b）-0004-04

2015-01-05本文編輯：蘇暢）

國家自然科學基金資助項目（31370910）。

朱赟（1981.10-），女，碩士；研究方向：耳科學。