乙型肝炎患者血清標志物的檢測方法及臨床意義探討

靳四海 夏艷麗

乙型肝炎是常見的傳染病，調(diào)查表明全球約3.6億人患有慢性乙型肝炎，每年死亡人口100萬以上[1]。我國乙肝發(fā)病率高，乙肝表面抗原陽性率高達9.10%，嚴重威脅患者的健康。目前，乙肝的主要監(jiān)測方法為血清標志物檢測，血清標志物即乙肝兩對半，包括乙肝病毒表面抗原（HBsAg）、乙肝病毒表面抗體（HBeAg）、乙肝病毒e抗原（抗HB）、乙肝病毒e抗體（抗HBc）、乙肝病毒核心抗體（抗HBS）[2]，這些標志物表明患者血清的病毒表達水平，間接反映了病毒復制程度，在乙肝的診斷預后上有極其重要的作用，也是傳染性分析、流行病學調(diào)查的重點。傳統(tǒng)檢測方法為酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA），隨著電化學發(fā)光法、時間分辨免疫熒光法的進步，血清標志物檢測又有了更多的方法[3]。本研究評價了不同方法的檢測結(jié)，為臨床提供依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年5月～2014年5月洛陽東方醫(yī)院收治的已確診的乙型肝炎患者165例（男106例，女59例），年齡27～52歲，平均年齡（27.3±3.4）歲，隨機均分為3組（n=55）。所有患者均符合乙肝診斷標準[4]。A組：男24例，女31 例，平均年齡(35.3±1.2)歲，平均病程(l.6±0.4)年；B 組：男29例，女26例，平均年齡(35.5±1.4)歲，平均病程(l.5±0.7)年，C組：男25例，女30例，平均年齡(34.9±1.7)歲，平均病程(l.7±0.2)年。3組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義，具有可比性。

1.2 乙肝血清學檢測

1.2.1 乙肝抗原 表面抗原(HBsAg)：標明為現(xiàn)癥感染，超過半年為慢性感染；e抗原(HBeAg) ：病毒復制標志，但結(jié)果為陰性不能確證無病毒復制。

1.2.2 乙肝抗體 表面抗體(抗HBs)：表明HBsAg轉(zhuǎn)陰后恢復，具有免疫力；e抗體(抗HBe)：同時存在HBsAg轉(zhuǎn)陰表明預后良好；核心抗體(抗HB)：表明既往感染或現(xiàn)癥，與免疫力及病情恢復無關(guān)。

1.3 方法 按標準程序進行采血、分離和保存工作。采取對比試驗，將165例乙型肝炎患者隨機分為3組。A組患者使用電化學發(fā)光法，B組患者使用時間分辨免疫熒光法，C組患者使用酶聯(lián)免疫吸附法，3組同時檢測血清標志物，并比較檢測結(jié)果。試驗由專業(yè)人員按儀器說明書操作，電化學發(fā)光法使用電化學發(fā)光免疫分析檢測患者血清標記物，時間分辨免疫熒光法用ANYTEST時間分辨免疫熒光分析儀檢測，酶聯(lián)免疫吸附試驗使用ALISEI 全自動酶標儀檢測，以Cut-off值判定檢測結(jié)果，超過表示陽性，小于表示陰性。

1.4 統(tǒng)計學方法 所有數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0統(tǒng)計學軟件進行處理，計量資料采用“±s”表示，組間比較采用t檢驗。計數(shù)資料用例數(shù)（n）表示，計數(shù)資料組間率（%）的比較采用χ2檢驗；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 乙肝抗原檢測結(jié)果比較 3組的HBsAg和HBeAg陽性率比較，差異無統(tǒng)計學意義。見表1。

表1 3組乙肝抗原檢測結(jié)果比較[n(%)]

2.2 乙肝抗體檢測結(jié)果比較 3組的抗HBs、抗HBe和抗HB陽性率比較，差異無統(tǒng)計學意義。見表2。

表2 3組乙肝抗體檢測結(jié)果比較

3 討論

乙型肝炎是由乙肝病毒（HBV）引起的肝臟炎性病變，乙肝病毒（HBV）嚴重威脅著全球性人類的健康，目前全球超過3.5億人已經(jīng)感染乙肝病毒，中國是乙肝感染大國，感染率達到7.19%。HBV是肝癌(HCC)主要病因，在癌癥死亡率中位于第4位，男性患者中位于第3位。目前，我國約9400萬乙肝病毒感染者。HBV病毒通過皮膚、黏膜破損入侵機體，傳染源為患者的血液、精液、唾液和分泌物等。HbsAg是HBV感染的重要標志物。HBV感染后，大部分患者沒有臨床癥狀，但可檢測到血清HbsAg，但不能反應病毒復制及程度及預后。抗HBs陽性表示機體已產(chǎn)生免疫，表明患者已經(jīng)痊愈。陽性HBeAg表明病毒肝內(nèi)復制活躍，傳染性較強。抗Hbe主要存在于HBsAg陽性或乙肝患者恢復期。抗HBc 是感染后血清中最早出現(xiàn)的抗體。

乙型肝炎會逐漸發(fā)展為肝癌、肝硬化等疾病，嚴重危害患者健康，目前無有效的治療方法[5]。臨床主要通過乙肝疫苗減少乙肝的發(fā)生[6]。目前，血清標志物檢測為乙肝病毒的主要診斷方法，通過檢測5種乙肝標志物可針對性預防和治療[7-8]。酶聯(lián)免疫吸附試驗主要進行定性檢測，電化學發(fā)光法和時間分辨免疫熒光法主要用于定量檢測[9-10]。

綜上所述，本研究對檢測乙肝血清標志物3種方法的結(jié)果進行兩兩對照分析，表明電化學發(fā)光法和時間分辨免疫熒光法與酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測血清標志物具有一致性，3組間陽性率無明顯差異。酶聯(lián)免疫吸附試驗敏感性略低，但成本低，適合初篩。電化學發(fā)光法檢出率最高，但成本高，適合血站和手術(shù)，時間分辨免疫熒光法敏感性居中，試劑逐步國產(chǎn)化，可作為診斷的補充。

[1] 胥飚，余文靜，張莉萍，等.乙型肝炎患者HBV-DNA載量與HBV血清標志物、前S 1抗原的相關(guān)性[J].重慶醫(yī)學，2009，38(19):2430-2432.

[2] 李文楷，丁波，魏容，等.聯(lián)合檢測血清標志物、ALT和HBV-DNA對乙型肝炎患者診療的臨床意義[J].四川醫(yī)學，2013，34(1):154-156.

[3] 趙衛(wèi)，周盛杰.乙型肝炎患者血清標志物與HBV-DNA含量的相關(guān)性研究[J].海南醫(yī)學，2013，24(1):49-50.

[4] 蔡坤，王福利.乙型肝炎患者血清腺苷酸脫氨酶與肝纖維化血清標志物測定的意義[J].廣州醫(yī)學院學報，2014，42(1):49-51.

[5] 林琳.乙肝患者血清標志物和病毒含量的相關(guān)性研究[J].標記免疫分析與臨床，2011，18(2):70-72.

[6] 蔡勝華.乙肝血清標志物檢測與分析[J].現(xiàn)代預防醫(yī)學，2011，38(8):1520-1521，1524.

[7] 莫鳳明，伍德榮，張群先，等.時間分辨免疫熒光法測定乙肝病毒血清標志物的結(jié)果分析[J].現(xiàn)代預防醫(yī)學，2012，39(1):130-132.

[8] 陳勁松.乙型肝炎患者HBV DNA檢測與血清標志物及凝血四項相關(guān)性分析[J].臨床肝膽病雜志，2004，20(6):369-370.

[9] 申煥君，陳敬銀，張中偉，等.慢性乙型肝炎患者HBV血清標志物與HBV DNA 的相關(guān)性分析[J].傳染病信息，2013，26(2):111-114.

[10] 饒敏，陸偉，張占卿，等.慢性乙型肝炎患者肝組織 HBV cccDNA，總HBV DNA與血清HBV DNA的相關(guān)性及其與臨床的關(guān)系[J].肝臟，2012，17(6):381-384.