四季秋海棠組培快繁技術研究

雷 穎，吳莉紅

（甘肅林業職業技術學院園林工程系，甘肅 天水 741020）

四季秋海棠組培快繁技術研究

雷 穎，吳莉紅

（甘肅林業職業技術學院園林工程系，甘肅 天水 741020）

以四季秋海棠莖切段為外植體，研究四季秋海棠組培快繁技術。結果表明，在MS+500 mg/L LH+ 3.0 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA培養基上，不定芽誘導效果較好，分化率達100%。適合四季秋海棠繼代培養的培養基為MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA+0.3 mg/L GA3和MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA+0.5 mg/L GA3。適宜的生根培養基為1/2 MS+0.2 mg/L IAA，生根率為100%，移栽后成活率達97%。

四季秋海棠；組織培養；快速繁殖

四季秋海棠（Begonia semper florens Link et Otto.），別名瓜子海棠或玻璃秋海棠，是秋海棠科秋海棠屬多年生宿根花卉［1～2］。株高20～40 cm，莖稍多汁，葉互生、翠綠色、卵圓形至廣橢圓形，葉基部偏斜，聚傘花序腋生，花大；因其花、葉、莖都呈肉質，酷似玻璃而得名。玻璃海棠枝葉青翠，花色妖艷濃郁，如同盛裝美人，如栽培得當，可四季開花，是良好的室內小型盆栽觀賞花卉。亦作花壇用花，溫暖地區或溫暖季節可布置于庭院或花壇［3］。

四季秋海棠容榮花貴，易養護管理，頗受廣大消費者喜愛，有較大的推廣和應用空間。但在我國北方，種子早期未熟先落，采用扦插繁殖數量有限，因此應用組織培養技術繁殖試管苗具有重要的意義。我們通過試驗研究取得了較好的培養方案，增殖率高，幼苗健壯，移栽成活率高，可為四季秋海棠規模化生產提供技術支持。

1 材料與方法

1.1 材料

培養材料為甘肅林業職業技術學院花卉品種示范基地種植的四季秋海棠幼苗或幼嫩新枝。

1.2 方法

1.2.1 外植體建立 選取四季秋海棠幼苗或幼莖，剪去葉片，切成2～3 cm小段，用清水處理干凈，在超凈工作臺上用70%酒精浸泡30 s，用無菌水沖3遍，再轉入0.1%升汞浸5 min，用無菌水沖洗5遍［4～6］，然后置于高壓滅菌過的鋪有濾紙的培養皿中，剪成長0.5～1.0 cm，含有1個節的小莖段，接種在分化培養基中進行培養。

1.2.2 初代培養 初代培養以MS+500 mg/L LH為基礎培養基［7～8］，分別添加0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 mg/L 6-BA和0.1、0.2、0.3、0.4 mg/L NAA，觀察記載平均芽數、苗高等指標，20 d后統計分化率。

1.2.3 繼代培養 將初代培養所得的簇生嫩莖切成長1.0～1.5 cm的小段，轉接到以MS為基本培養基，添加1.0、2.0、3.0、4.0 mg/L 6-BA和0.1、0.3、0.5 mg/L NAA和0.1、0.3、0.5 mg/L IAA以及0.1、0.2、0.3、0.5、0.8、1.0 mg/L GA3的繼代培養基中培養。觀察記載生長情況，30 d后統計玻璃苗比例。

1.2.4 生根培養 將繼代培養所得的嫩莖切下，轉入以1/2MS為基本培養基，分別添加0.1 mg/L NAA和0.1、0.2、0.5 mg/L IAA以及0.1、0.3 mg/L IBA的生根培養基中培養，觀察生根情況，20 d后統計生根率。

1.2.5 移栽 將生根后的試管苗不開蓋在溫室中置3 d后，開蓋置6 d，然后移栽于珍珠巖的基質中，每天噴水3次，15 d后上盆，統計成活率。

1.3 培養條件

所有培養基都添加蔗糖3%、瓊脂0.6%，pH 5.6。培養基在1.5 kg/cm2壓力、121℃濕熱滅菌20 min［9］。培養室溫度為（20±2）℃［10］，光照14 h/d，光照度2 000 Lx［11］。

2 結果與分析

2.1 初代培養

從表1可知，四季秋海棠初代培養基中，在一定范圍內，隨著6-BA和NAA的濃度的增大，分化率增大、平均芽數增多、平均苗高增高，其中MS+500 mg/L LH+3.0 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA培養基對叢生芽的誘導率較高，為100%，平均芽數為6.0。但當6-BA濃度大于3.0 mg/L、NAA濃度大于0.4 mg/L時，平均芽數減少，平均苗高降低，且分化時間推遲。可見，MS+500 mg/L LH+ 3.0 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA培養基適合四季秋海棠的初代培養。

2.2 繼代培養

30 d后的增殖結果因激素配比不同而異（表2），嫩莖增殖倍數隨6-BA濃度的增高呈現增大后減少的趨勢，濃度過高會影響芽苗的高生長，且有玻璃化現象產生。從試驗結果可知，MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA與MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA是四季秋海棠較為理想的繼代培養基，增殖倍數分別為 7.1和 7.8，但 MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA培養基中的芽苗玻璃化程度相對較高。

表1 不同培養基上四季秋海棠初代培養結果

表2 不同培養基上四季秋海棠繼代培養結果

在四季秋海棠的繼代培養過程中，6-BA對芽苗的增殖起著決定性的作用，但其濃度較高時，芽苗高生長受到擬制，且會出現玻璃苗［12～13］，而濃度降低分化率又隨之下降。在原基礎上加入不同濃度的GA3進行試驗［14］，20 d后的結果（表3）顯示，加入一定濃度的GA3對芽苗高生長具有顯著影響，且隨著GA3濃度的升高，苗高呈增高趨勢，但當GA3濃度大于1.0 mg/L時，苗莖細弱，葉片皺縮，降低GA3濃度可恢復正常。GA3濃度為0.1～0.5 mg/L時植株玻璃化程度較低，芽苗分化較好。綜合分析以上結果，適合四季秋海棠繼代培養的培養基為MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA+0.3 mg/L GA3和MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA+0.5 mg/L GA3。

表3 添加GA3對四季秋海棠繼代生長的影響

表4 不同生根培養基四季秋海棠試管苗生根情況

2.3 試管苗生根與移栽

生根培養20 d后觀察，以添加一定濃度的IAA培養基生根效果較好（表4），每個嫩莖基部有根3～5條，長約3～5 cm，IAA濃度為0.2 mg/L時效果更好，再生后的完整植株苗形美觀，色澤深綠，移栽后成活率高達97%。

3 小結

試驗結果表明，MS+500 mg/L LH+3.0 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA培養基對叢生芽的誘導率較高，為100%，平均芽數為6.0個，是四季秋海棠最適合的初代培養基。在繼代培養階段，對芽苗增殖產生明顯影響的因素是6-BA，但當濃度較高時會使芽苗出現玻璃化，而GA3的加入使玻璃苗的概率顯著降低。適合四季秋海棠繼代培養的培養基為MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA+0.3 mg/L GA3和MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA+0.5 mg/L GA3。添加濃度為0.2 mg/L的IAA，有利于四季秋海棠試管苗的生根。

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（本文責編：陳 珩）

S682.1；Q813.1

A

1001-1463（2015）02-0034-03

10.3969/j.issn.1001-1463.2015.02.013

2014-08-15；

2014-12-02

雷 穎（1966—），女，甘肅天水人，副教授，主要從事遺傳育種學與園林植物栽培養護學的教學與研究。聯系電話：（0）13629388692。