產(chǎn)木聚糖酶海洋微生物的篩選與誘變育種

黃小云，林娟，林小洪，王國(guó)增，葉秀云

(福州大學(xué)生物科學(xué)與工程學(xué)院，福建省海洋酶工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，福建福州 350116)

0 引言

木聚糖是植物細(xì)胞壁半纖維素的主要成分，包括由β－1，4糖苷鍵形成主鏈結(jié)構(gòu)和不同的側(cè)鏈取代基，常見(jiàn)的取代基包括4－O－甲基葡萄糖醛酸(4－O－Met－Hylglucuronic)、α－阿拉伯糖(α－arabinofuranose)及O－乙酰基(O－Acetyl group)等［1］．木聚糖的完全降解需要多種水解酶的協(xié)同作用［2］．木聚糖酶(EC 3．2．1．8)通過(guò)隨機(jī)切割木聚糖主鏈骨架上的β－1，4糖苷鍵產(chǎn)生不同長(zhǎng)度的低聚木糖［3］，是木聚糖降解酶系中最為關(guān)鍵的酶．

木聚糖酶的來(lái)源較廣泛，包括陸地植物組織、細(xì)菌、真菌和原生動(dòng)物等［3］，但大部分來(lái)源于陸地，對(duì)于海洋微生物的研究還比較少．海洋微生物所產(chǎn)的酶具有突出的特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì):具有顯著的耐壓、耐堿、耐鹽、耐冷和多物種等特性，這些優(yōu)越的性質(zhì)使得海洋酶資源在工業(yè)應(yīng)用和基礎(chǔ)研究等方面具有價(jià)值，從而賦予海洋微生物酶獨(dú)特的應(yīng)用前景［4］．木聚糖酶可作為食品添加劑用于改善焙烤食品的風(fēng)味［5］，在飼料中添加木聚糖酶可提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能［6］，用木聚糖酶對(duì)紙漿的預(yù)處理會(huì)大大減少化學(xué)漂白劑的用量［7］．由于其在各領(lǐng)域的重要作用，選育高產(chǎn)木聚糖酶的菌株成為目前木聚糖降解菌選育研究的熱點(diǎn)．

1 材料與方法

1．1 樣品

樣品分別來(lái)自北極泥樣，福州市平潭海域的水樣和泥樣，寧德市三都澳海域的泥樣和海藻，以及鮑魚(yú)內(nèi)臟等．

1．2 培養(yǎng)基

1)初篩培養(yǎng)基:自制甘蔗渣木聚糖15 g，NH4NO35 g，K2HPO42 g，MgSO4·7H2O 0．5 g，瓊脂20 g，人工海水［8］1 000 mL，pH 7．0;

2)種子培養(yǎng)……