紫外分光光度法測定蔬果中維生素C含量

2014-12-19 06:21:54閆桂甫徐慧琴

河南科技 2014年2期

閆桂甫徐慧琴

（河南省輕工業學校，河南鄭州 450062）

維生素C 是可溶于水的無色結晶，是一種分子結構最簡單的維生素，具有防治壞血病的功能，所以在醫藥上常把它叫做抗壞血酸[1]。維生素C 能促進骨膠原的生物合成，利于組織創傷口的更快愈合，促進膠原蛋白的合成，豐富的膠原蛋白有助于防止癌細胞的擴散；VC 的抗氧化作用可以抵御自由基對細胞的傷害防止細胞的變異；阻斷亞硝酸鹽和仲胺形成強致癌物亞硝胺，有助于預防癌癥。防止牙齦出血，促進牙齒和骨骼的生長，防止牙床出血，防止關節痛、腰腿痛，促進氨基酸中酪氨酸和色氨酸的代謝，延長肌體壽命，增強肌體對外界環境的抗應激能力和免疫力，改善脂肪和類脂特別是膽固醇的代謝，預防心血管病。維生素C 使難以吸收利用的三價鐵還原成二價鐵，促進腸道對鐵的吸收，提高肝臟對鐵的利用率，有助于治療缺鐵性貧血。廣泛存在于多種新鮮的蔬菜和水果中，蔬菜和水果是人類攝取維生素C 的重要來源。因此，準確測定蔬果中維生素C 的含量，對人們日常飲食具有重要的指導意義。

近年來報道的測定方法主要有2,4 二硝基苯肼比色法[2]、滴定法[3]、紫外分光光度法[4]、高效液相色譜法[5]等。由于紫外分光光度法具有儀器普遍、選擇性高、操作簡單等優點，因此，本文選擇紫外分光光度法。

1 實驗原理

維生素C 在紫外區246.0nm 處有最大吸收，并且線性良好，因此可以采用紫外分光光度法進行測量。

2 儀器和試劑

2.1 儀器

紫外分光光度計、電子天平、恒溫水浴鍋。

2.2 試劑

CuCl2、HAc，所用試劑均為分析純，試驗用水均為二次蒸餾水。

3 實驗

3.1 溶液配制

（1）混酸的配制：7ml8%的HAc 與3ml3%的H3PO4混合稀釋定容至50ml 容量瓶中。

（2）氯化銅溶液（1mg/ml）的配制：準確稱取無水CuCl20.0021g，用二次蒸餾水溶解，轉移至100ml 的容量瓶中，并用蒸餾水定容至刻度線,稀釋到10ug/ml 備用。

（3）標準溶液的配制：100ug/mlVc 標準溶液的配制：稱取0.0504g 抗壞血酸，以10ml 混酸溶解，并以蒸餾水定容到500 ml 容量瓶中，稀釋至10ug/ml 備用。

準確移取10ug/mlVc 標準溶液0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00ml 于6 個50ml 的容量瓶中；分別量取濃度為10ug/ml 的氯化銅溶液3.00ml 加入容量瓶中，用少量二次蒸餾水稀釋，插勻；在70℃恒溫水浴加熱反應5min 后，用二次蒸餾水稀釋至刻度，放置20min；以試劑空白為參比，在246.0nm 波長處分別測定各溶液吸光度；以維生素C 濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制標準曲線。

（4）樣品的處理和樣品溶液的配制：將蔬菜或水果洗凈，取可食部分10 克左右，精確稱量，記下數值。切碎，放入研缽中充分研磨成汁液，用漏斗加脫脂棉進行過濾，得維生素C 汁液。轉移到50ml 容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度，并根據Vc 含不同分別稀釋10-1 000 倍，待測。

備注：蘋果、梨、香蕉、桃稀釋10 倍，白菜花、青蘿卜、胡蘿卜稀釋20 倍，西蘭花、青蘿卜纓和胡蘿卜纓稀釋20 倍，獼猴桃稀釋100 倍，鮮棗和酸棗稀釋1 000 倍。