李 霞,伍亞云,郭建華,劉俊宏(.湖北省十堰市竹山縣婦幼保健院檢驗科 4400;.湖北省十堰市中西醫結合醫院檢驗科 44000;.湖北醫藥學院附屬太和醫院檢驗部,湖北十堰 44000)
正常情況下,漿膜腔內僅有少量液體起潤滑作用,病理情況下可有大量液體潴留而形成漿膜腔積液,常分為漏出液和滲出液[1]。漿膜腔積液常規檢查的目的是鑒別漿膜腔積液的性質,為臨床診斷治療提供依據。漿膜腔積液常規分析的質量控制,在分析中、分析后的檢驗質量控制中,實驗室已有了較明確的質量控制措施,并有嚴格的規章制度、操作規程、室內質控、室間質評[2]。而分析前質量控制卻是一個容易被忽視但又非常重要的環節。作者對28份漿膜腔積液分析前的不同環節,包括標本放置時間、標本檢查前混勻程度、計數池充池后放置時間進行對比分析,以找出漿膜腔積液常規檢查前的影響因素,消除不必要的誤差,提高檢驗質量,現報道如下。
1.1 一般材料隨機抽取竹山縣婦幼保健院門診和住院就醫患者漿膜腔積液28份。其中男18例,女10例,年齡21~87歲,平均60歲。
1.2檢驗器材求精XB-K-25計數板(上海醫用光學儀器廠一分廠生產),CX31RTSF-OLYMPUS顯微鏡,日本B80型自動平衡離心機(河北安新白洋離心機廠生產)。
1.3 檢測方法
1.3.1 漿膜腔積液分別放置1、3、5、10h后常規分析 分別記錄其紅細胞數量、有核細胞數量取均值。通過對比分析,觀察其結果與放置時間的關系。
1.3.2 漿膜腔積液標本混勻后常規分析、不混勻常規分析分別記錄紅細胞數量、有核細胞數量取均值,通過對比分析,觀察其前后結果的差異。
1.3.3 計數池充池后漿膜腔積液放置0、1、3、5min細胞計數檢查 分別記錄紅細胞數量、有核細胞數量。通過對比分析,觀察其不同放置時間下計數結果的差異。
1.4 統計學處理采用SPSS17.0軟件對數據進行統計學分析,檢測結果比較采用t檢驗及方差檢驗,以α=0.05為檢驗水準,P<0.05為差異有統計學意義。
2.1 漿膜腔積液放置不同時間后常規分析結果比較漿膜腔積液取出后,標本中紅細胞數量隨放置時間的延長而降低。3h與1h比較,紅細胞數減少,差異無統計學意義(P>0.05);1h與5h及10h比較,差異有統計學意義(P<0.05)。標本中有核細胞數量隨放置時間的延長無明顯改變,差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 不同放置時間紅細胞、有核細胞結果比較(109/L,x±s)
2.2 漿膜腔積液標本混勻與不混勻常規分析結果比較漿膜腔積液取出后,標本混勻與不混勻常規分析,其紅細胞數量和有核細胞數量差異均有統計學意義(P<0.05),見表2。
表2 漿膜腔積液標本混勻與不混勻分析結果比較(109/L,±s)

表2 漿膜腔積液標本混勻與不混勻分析結果比較(109/L,±s)
注:與不混勻組比較,aP<0.05。
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2.3 計數池充池后不同放置時間計數分析漿膜腔積液取出后計數細胞時,計數池充池后放置0、1、3、5min,其紅細胞數0min與3min及5min分別比較,差異均有統計學意義(P<0.05);但0min與1min、3min與5min比較,差異無統計學意義(P>0.05)。有核細胞計數,0min與3min、5min分別比較,差異均有統計學意義(P<0.05);0min與1min、3min與5min比較,差異無統計學意義(P>0.05)。見表3。
表3 計數池充池后不同放置時間紅細胞、有核細胞計數結果比較(109/L,±s)

表3 計數池充池后不同放置時間紅細胞、有核細胞計數結果比較(109/L,±s)
注:與3、5min比較,aP<0.05。
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臨床實驗室全面質量控制分為分析前、中、后3個主要過程。分析前質量控制是指從醫生選擇檢測項目,提出檢測申請單,直至將檢測標本送至實驗室階段的質量控制[3-4]。而分析前質量控制卻是一個容易被忽視卻非常重要的環節,實驗室工作人員在對每份標本的分析前預處理過程,更顯得尤其重要。分析的每一步前期準備是否合格,都會對檢驗結果產生非常大的影響。有研究表明,臨床實驗室的誤差大部分發生于標本的分析前階段,分析前階段的誤差比例占總誤差的半數以上[5-7]。因此,如何做好分析前質量控制已成為當務之急。
漿膜腔積液通常指胸膜腔(胸腔)、腹膜腔(腹腔)、心包腔積液等。其常規分析有助于鑒別滲出液與漏出液,為臨床診斷和治療提供依據。本文對28份漿膜腔積液常規分析前的不同環節,包括標本放置時間、標本檢查前混勻程度、計數池充池后放置時間進行對比分析,以找出漿膜腔積液常規檢查前的影響因素。漿膜腔積液由臨床醫生抽取后,如果不能及時送檢或送檢后實驗室沒有及時處理,經常會放置較長時間。在這段時間內,積液內細胞形態及數量會發生改變,如紅細胞溶解、間皮細胞腫脹變性等,對常規分析結果產生影響。本組分析結果顯示,漿膜腔積液取出后,標本中紅細胞數量隨放置時間的延長而降低。1h與3h比較,紅細胞數減少,但差異無統計學意義(P>0.05);1h與5h及10h比較,差異有統計學意義(P<0.05);標本中有核細胞數量隨放置時間的延長無明顯改變,差異無統計學意義(P>0.05)。表明漿膜腔積液內紅細胞,隨著放置時間的延長而破壞增加。其原因是積液離體后,隨著放置時間的延長,標本內中微生物(如細菌等)可分解積液中的糖類,導致積液滲透壓發生改變,可使滲透壓降低明顯,使紅細胞形態發生改變或破壞,導致紅細胞數量減少。而有核細胞在此環境影響下,其細胞形態可有明顯改變,如間皮細胞內出現空泡變性;或隨著滲透壓的改變,細胞內外水和離子的交換,導致有核細胞出現胞質和核腫脹變性,或核溶解現象,導致細胞形態上出現明顯改變,常常在細胞學檢查中出現誤認,而出現假陽性結果,在此提示漿膜腔積液細胞學檢查過程中應必須注意。標本中有核細胞形態雖有不同程度的改變,但有核細胞破壞不明顯,其細胞數量隨放置時間的延長無明顯改變,差異無統計學意義(P>0.05)。
臨床醫生抽吸漿膜腔積液后,由護士或護工將標本送到實驗室進行檢查,但由于工作忙碌或與實驗室之間的距離較遠,或至實驗室后沒有及時進行檢查,標本有一定時間的放置,其中的有核細胞、紅細胞會自然沉降。所以在進行漿膜腔積液常規分析時,必須將標本充分混合后再進行常規分析,如直接取上清液進行常規分析,其細胞數量會明顯減少。本研究結果顯示,漿膜腔積液取出后,標本混勻與不混勻常規分析,其紅細胞數量及有核細胞數量差異均有統計學意義(P<0.05)。因此,檢驗工作者的必須加強責任心,不能粗枝大葉,隨心所欲。同時,在漿膜腔積液常規計數分析前,計數池充池后必須放置一段時間,再進行計數,否則會有較多細胞浮于計數池表面而使計數結果降低。作者對計數池充池后放置0、1、3、5min,其紅細胞數0min與3min及5min分別比較,差異有統計學意義(P<0.05);但0min與1min、3min與5min比較,差異無統計學意義(P>0.05);有核細胞計數,0min與3min及5min分別比較,差異有統計學意義(P<0.05);0min與1min、3 min與5min比較,差異無統計學意義(P>0.05)。表明計數細胞過程時,必須在沖池后放置一定時間,否則會因為細胞懸浮于液面上,導致所計數細胞相互重疊或細胞未在一個平面上停留,導致少計數,而使細胞計數結果降低。顯微鏡的使用不當,也可使計數細胞減少,如聚光器未下降或光柵未關、光線太亮等都可使細胞計數出現明顯誤差。
漿膜腔積液常規檢查,是一個非常普通的常檢查項目,但在正常檢測過程中的許多細節,并非都能做到,之前有借用血細胞分析儀替代手工操作的先例,但由于漿膜腔積液中纖維蛋白較高、易凝固,常常引起血細胞分析儀管道堵塞,影響儀器的正常工作而被禁止。檢驗工作的質量控制是一個非常重要的內容,是每位檢驗工作者必須注意的工作環節,細節決定成敗,醫學檢驗的細節可影響檢驗結果的準確性。本文闡述的漿膜腔積液常規分析,雖然是一個比較簡單的常規檢驗項目,但在其分析過程中,每個醫學檢驗工作者在分析前是否都能嚴格操作,尚難確定。因此,漿膜腔積液常規分析前的質量控制,對提高檢驗結果的準確性非常重要。
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