姜黃素對鼻咽癌細(xì)胞系CNE-1 RECK基因表達(dá)及甲基化的影響

王柏琦，陳艷華，蔣麗琴，程愛蘭

(南華大學(xué) 1.附屬第二醫(yī)院 腫瘤內(nèi)科； 2.醫(yī)學(xué)院 腫瘤研究所, 湖南 衡陽 421001)

研究論文

姜黃素對鼻咽癌細(xì)胞系CNE-1RECK基因表達(dá)及甲基化的影響

王柏琦1,2，陳艷華1，蔣麗琴1，程愛蘭2*

(南華大學(xué) 1.附屬第二醫(yī)院 腫瘤內(nèi)科； 2.醫(yī)學(xué)院 腫瘤研究所, 湖南 衡陽 421001)

目的探討姜黃素對鼻咽癌細(xì)胞RECK基因表達(dá)及甲基化的影響，并探討可能的機(jī)制。方法體外培養(yǎng)鼻咽癌細(xì)胞系CNE-1，用1、10和30 μmol/L 姜黃素處理后，用Western blot和實時定量PCR分別檢測RECK基因以及DNA甲基化酶1(DNMT1)的蛋白和mRNA表達(dá)；高效液相色譜-電噴霧質(zhì)譜檢測RECK甲基化，同時用MTT檢測CNE-1細(xì)胞增殖，EMSA法檢測核轉(zhuǎn)錄因子Sp1的DNA結(jié)合活性。結(jié)果CNE-1細(xì)胞未刺激時RECK表達(dá)水平較低，而經(jīng)1～30 μmol/L姜黃素處理后，能顯著增強(qiáng)RECK蛋白和mRNA的表達(dá)(Plt;0.05)。30 μmol/L 姜黃素處理CNE-1細(xì)胞后，RECK啟動子甲基化水平降低至31% (Plt;0.05)，全基因組甲基化水平降低39% (Plt;0.05)，細(xì)胞系的甲基化活性減少了72% (Plt;0.05)。同時，姜黃素能顯著降低CNE-1細(xì)胞中DNMT1的蛋白和mRNA表達(dá) (Plt;0.05)，也能減低CNE-1細(xì)胞的存活率 (Plt;0.05)。EMSA結(jié)果顯示，姜黃素處理后，CNE-1細(xì)胞中Sp1的DNA活性顯著降低。結(jié)論姜黃素可能通過上調(diào)RECK基因表達(dá)，降低細(xì)胞內(nèi)甲基化水平，從而抑制CNE-1細(xì)胞生長。

鼻咽癌；伴有kazal域的富含半胱氨酸的逆轉(zhuǎn)誘導(dǎo)蛋白(RECK)；甲基化；姜黃素

鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma)是我國南方地區(qū)最常見的惡性腫瘤之一，其病情隱匿，惡性程度高且較早發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移[1]。鼻咽癌的病因很多，病毒感染、家族史、營養(yǎng)狀況、年齡等因素均與本病的發(fā)生存在一定關(guān)聯(lián)[2]。近年來，DNA甲基化等表觀遺傳學(xué)的改變在腫瘤中的發(fā)病日益受到重視[3]?！?br>