慢性乙型肝炎肝組織鐵含量與其分級分期的關系及臨床意義

王志東 張子軍

鐵在人體中含量約為4 g, 主要存在兩類功能性結構中。一種含量占70%左右, 以紅細胞中的血紅蛋白、肌纖維中的肌紅蛋白的形式存在；另一種含量占30%, 以鐵蛋白或含鐵血黃素等貯存鐵的形式貯存于骨髓和肝、脾中。鐵是線粒體呼吸鏈和核糖核酸氧化酶及還原酶的組成成分, 在體內氧化-還原反應中起著重要作用。而肝臟是其貯存和代謝的重要器官, 因此, 肝臟鐵代謝異常與肝臟疾病密切相關。通過對2006年1月～2013年12月115例慢性乙型肝炎的肝組織中的沉積性含鐵血黃素染色, 以期了解其與慢性乙型肝炎分級和分期的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 慢性乙型肝炎患者共計115例。男75例,女40例, 年齡21～61歲, 平均年齡31.4歲。慢性乙型肝炎診斷的分級和分期根據2005年9月中華醫學會傳染病與寄生蟲病學分會、肝病學分會聯合修訂的《病毒性肝炎防治方案》進行。依據分級和分期的結果進行分組［輕度(A)、中度(B)、重度(C)］, 每組33例；另設肝硬化組(16例)。總計四組。

1.2 研究方法 以中性甲醛固定肝穿組織、85%～100%梯度酒精脫水、二甲苯透明、650石蠟包埋。切片厚度3～4 μm, 每例切4張, 分別進行常規染色(HE法)、網狀纖維染色(Gomori法)、膠原纖維染色(Masson法)和含鐵血黃素染色(Schmeltzer法)［1］。切片根據常規染色、網狀纖維染色、膠原纖維染色進行慢性乙型肝炎的分級和分期；鐵染色結果觀察：①顯色程度：分弱、中、強, 分別用1、2、3表示。②顯色范圍：a.高倍視野顯色范圍<1/4；b.高倍視野顯色范圍1/4～2/4；c.高倍視野顯色范圍2/4～3/4；d.高倍視野顯色范圍>3/4。③顯色指數=顯色程度×顯色范圍：取其均數為每張切片檢測指標的最終顯色指數。

1.3 統計學方法 采用統計學軟件SPSS13.0進行數據處理。計量資料以均數±標準差(±s)表示, 采用t檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 網狀纖維染色中, 網狀纖維被染成黑色, 背景呈淡黃色；膠原纖維染色中, 膠原纖維被染成綠色, 背景呈紅色。

2.2 含鐵血黃素染色中, 鐵顆粒被染為藍色, 背景呈淡紅色。在輕、中度兩組可見肝細胞內少量陽性表達；重度及肝硬化組陽性表達細胞數明顯增多, 并與肝纖維化程度呈明顯的正相關性。重度肝炎及肝硬化組織中含鐵血黃素染色的表達明顯高于輕度及中度慢性肝炎(P<0.01)。見表1。

表1 慢性乙型肝炎分級分期含鐵血黃素(±s)

表1 慢性乙型肝炎分級分期含鐵血黃素(±s)

注：重度肝炎及肝硬化組織中含鐵血黃素表達明顯高于輕度及中度慢性肝炎, aP<0.01

項目 含鐵血黃素輕度A(G0-2S0-2)1.50±1.26中度B(G3S3)3.30±1.64重度C(G4S4)6.00±3.63a肝硬化 8.01±3.28a

3 討論

肝臟鐵負荷增加所導致的結果常表現為肝臟纖維化或肝硬化。其病理組織學表現為肝組織門脈區最先積聚鐵而最易受損, 肝細胞中存在異常多的棕色色素(含鐵血黃素沉積)與組織內增多的結締組織, 在鐵過載后期表現更為明顯。

這項研究結果表明, 慢性乙型肝炎肝組織分級分期的逐漸增高, 肝組織內含鐵血黃素染色指數也逐漸增加, 特別在重型肝炎和肝硬化的肝組織中增加明顯。慢性乙型肝炎肝組織中含鐵血黃素染色指數增加, 推測和下列因素相關：①肝細胞壞死時, 細胞中的貯存鐵進入血液, 進而又被其他細胞吸收。②肝臟炎癥, 門脈壓力增高, 導致脾功能亢進, 紅細胞破壞增加, 血中血紅蛋白增加, 肝細胞吸收鐵負荷增加。③肝臟炎癥導致其鐵轉化的能力下降。

肝臟纖維化與鐵過剩程度有關, 有作者發現鐵過剩的大鼠肝貯脂細胞內膠原合成及Disse間隙內膠原沉積增加, 提示鐵可直接促進肝膠原合成［2］。鐵過剩可促進自由基及脂質過氧化的發生與溶酶體破壞, 導致細胞損傷［3］。鐵過剩引起肝纖維化可能也因自由基與膠質過氧化使溶酶體破壞導致細胞損傷, 激活間質膠原合成系統, 從而引起肝纖維化。

Sebastiani等［4］通過回顧性研究發現：慢性乙型肝炎患者, 肝臟鐵沉積和血清鐵水平升高都很常見, 而血清鐵的水平與鐵蛋白水平正相關, 從而間接說明慢性乙型肝炎患者的血清鐵蛋白水平是普遍升高的。馮紅萍［5］對89例慢性乙型重癥肝炎患者動態檢測甲胎蛋白與血清鐵蛋白的變化情況時發現, 血清鐵蛋白隨病情加重而逐漸升高, 以重癥肝炎升高最為顯著。而且, 隨著病情的轉化, 血清鐵蛋白水平也隨之變化, 最終生存下來的患者血清鐵蛋白由高轉低, 而最終死亡的患者血清鐵蛋白則持續處于高水平, 證實了血清鐵蛋白與肝臟病變嚴重程度一致。

從既往的研究成果及本項研究結果看, 在乙型肝炎的發病過程中, 機體鐵負荷過重增加了肝細胞的損傷。若采取一些減輕機體鐵負荷的方法, 如：低鐵飲食、避免不必要的大量輸血等, 可能會減輕乙肝患者的肝損傷。

［1］中華醫學會編叢.臨床技術操作規范病理學分冊.北京：人民軍醫出版社, 2004(04):1.

［2］Pietrangelo A, Rocchi E, Schiaffonati L, et al.Liver gene expression during chronic dietary iron overload in rats.Hepatology, 1990(11):798.

［3］Ozaki M, Kawabata T, Awai M.Iron-catalyzed Hydroxyl radicals in vitro.Biochem , 1998(250):589.

［4］Sebastiani G, Tempesta D, Alberti A.Hepatic iron overload is common in chronic hepatitis B and is more severe in patients coinfected with hepatitis D virus.J Viral Hepat, 2012(19):170-176.

［5］馮紅萍.甲胎蛋白與血清鐵蛋白聯合檢測在慢性乙型重癥肝炎中的臨床意義.現代診斷與治療, 2007(18):232-233.