紀勇平,趙龍友, 莊 杰,周 斌
(麗水市中心血站,浙江麗水323000)
人類血型抗原的基因頻率與分布狀況,隨著民族和地域的不同,會有很大的差異性。畬族作為我國一個歷史悠久的散居少數民族,全國約有人口70萬,公元二世紀至五世紀就已經在長江中下游居住,目前主要分布在浙江和福建省的交界地帶,而浙江麗水為其主要的聚居區。目前國內對于畬族稀有血型的篩查和研究較為局限,部分紅細胞血型的頻率尚不清楚。為獲得畬族人群更多的血型抗原信息資料,進一步開展紅細胞血型抗原的生物學研究,同時解決臨床稀有血型輸配血困難等問題,我們對浙江麗水地區3 580例非血緣關系的麗水地區畬族獻血者樣本進行了抗Ena、抗 H、抗 Lub、抗 Ge、Jk(a-b-)、抗 Wrb和成人i陽性等紅細胞稀有血型的頻率與分布情況進行了研究。
1.樣本來源 選擇無血緣關系且父母3代均為畬族的獻血者為研究對象,共計3 580例,其中男2 055例,女1 525例,年齡18~55周歲。其中O型樣本1 498例。分別采取靜脈血3 mL,用EDTA抗凝,將受檢者血樣配制成3%紅細胞懸液備用。
2.試劑儀器 抗-H、抗-i、和鼠源性抗-GPA、抗-GPC 、抗-Lub(批號:20120710)、抗-Wrb以及羊抗鼠IgG(二抗)均由上海市血液中心提供。分析純尿素試劑:使用前配制為2 mol/L濃度的應用液。KA-2200血庫專用離心機(KUBOTA公司)、振蕩器(Heidolph Titramax 101)、平板離心機(KUBOTA 8100),U型96孔微量板(蘇州康容生物公司)。
3.篩選方法 96孔微量板法篩選成人i陽性血型、孟買/類孟買血型和Ge-血型 在96孔微量板中加入3%受檢紅細胞懸液20μL,并加入對應的抗體應用液20μL。置振蕩器上振蕩15 s混勻后在平板離心機以90×g離心5 min,輕敲板側觀察結果,紅細胞凝集為陽性,反之為陰性。……