TGF—β1對糖尿病腎病的早期診斷價值

張衛群等

【摘要】 目的 通過對不同時期糖尿病腎病（DN）患者血清和尿中轉化生長因子（TGF-β1）的檢測， 探討TGF-β1在DN早期診斷中的意義。方法 根據24 h尿白蛋白排泄率（UAER）分為單純糖尿病（DM）組（T1組）32例， 早期DN組（T2組）41例和晚期DN組（T3組）13例， 并與23例正常人（C1組）作比較。用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法（ELISA）分別檢測各組血清pTGF-β1和尿液中uTGF-β1水平， 比較各組之間兩項指標的差異， 以正常組單側95%的上限值（X±1.64S）為正常值高限， 確定陽性判定標準， 并以UAER為金標準， 進行T1組和T2組的診斷性能評價。同時用相應方法檢測各標本中尿微量白蛋白（mAlb）， 最后確定TGF-β1對DN早期診斷的價值。結果 T1、T2、T3組pTGF-β1、uTGF-β1、mAlb較C1組明顯升高， 差異有統計學意義（P<0.05）。相關分析顯示pTGF-β1、uTGF-β1與UAER正相關， pTGF-β1和uTGF-β1的異常比UAER出現更早， 檢測pTGF-β1和uTGF-β1水平可作為早期發現DN的敏感指標之一， 其中以uTGF-β1的臨床靈敏度更高。結論 uTGF-β1聯合尿mAlb能早期診斷DN， 并提高診斷的性能。

【關鍵詞】 糖尿病腎病；轉化生長因子；尿微量白蛋白

【Abstract】 Objective To explore the clinical significance of transforming growth factor beta-1 （TGF-β1） in the early diagnosis of diabetic nephropathy （DN）， through detections of plasma TGF-β1 （pTGF-β1） and urinary TGF-β1 （uTGF-β1） levels in different periods of DN patients. Methods According to 24 h urinary albumin excretion rate （UAER）， patients were divided into diabetes mellitus （DM） group （T1 group， n=32）， early DN group （T2 group， n=41）， and advanced DN group （T3 group， n=13）. These groups were compared with healthy people （C1 group， n=23）. Enzyme linked immune sorbent assay （ELISA） was used to detect levels of pTGF-β1 and uTGF-β1 in all the groups. The differences between the two indexes of the groups were compared. The upper limit value of normal group unilateral 95 % （X±1.64S） was set as maximum normal value to determine positive decision standard， and UAER was taken as golden standard to assess the effects of T1 and T2 groups. Urinary microalbuminuria （mAlb） levels were detected in all groups to determine the early diagnostic value of TGF-β1 for DN. Results Levels of pTGF-β1 and uTGF-β1 and mAlb significantly increased in T1， T2 and T3 groups， compared with that in C1 group. and the difference was statistically significant （P<0.05）. Correlation analysis showed that pTGF-β1 and uTGF-β1 were positively correlated with UAER. The changes of pTGF-β1 and uTGF-β1 appeared earlier than UAER， thus the detection of pTGF-β1 and uTGF-β1 could be one of the sensitive indexes of early DN， and uTGF-β1 had the higher clinical sensitivity. Conclusion Combination of uTGF-β1 and mAlb can provide early diagnosis of DN and improve diagnostic performance.

【Key words】 Diabetic nephropathy； Transforming growth factor； Microalbuminuria

TGF-β1是一種分子量為25 kD的多肽， TGF-β1是對細胞生長、分化和多種生理、病理過程起重要調節的細胞因子， 可抑制腎小管、腎小球上皮細胞生長。在糖尿病腎病中起重要作用， 它可以導致腎臟的多種病理形態的改變[1， 2]。作者通過檢測2型糖尿病患者pTGF-β1、uTGF-β1并確定指標， 提高對DN的早期診斷水平。endprint

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2013年3～11月本院內分泌科收治的2型DM患者86例， 其中男 39例， 女47例， 年齡35～75歲， 根據UAER分為三組：T1組為單純DM組， 32例（UAER< 30 mg/24 h）， 平均病程（4.21±2.32）年；T2組為早期DN組， 41例（出現持續性微量蛋白尿 ， UAER 30～300 mg/24 h）， 平均病程（10.60±3.72）年；T3組為晚期DN組， 13例（UAER >300 mg/24 h）， 平均病程（15.14±4.62）年。取本院2013年8～10月門診體檢者23 例為正常對照組（C1組）， 其中男10例， 女13例， 年齡42～56歲， 為空腹血糖（FBG）、尿素氮（BUN）、肌酐（CREA）、血脂、血壓正常， 無心、肝、腎等重要臟器疾病， 無內分泌及遺傳代謝性疾病史。

1. 2 方法 早晨空腹抽取靜脈血， 離心分離血清， 收集24 h尿液， 準確記錄尿量， 混勻后取5 ml， -70℃保存待測。血、尿TGF-β1采用雙抗體夾心ELISA 法， 定量檢測。mAlb采用免疫增強比濁法， 使用日立7600-020全自動生化分析儀。

1. 3 統計學方法 研究所得數據采用SPSS15.0 統計學軟件進行統計分析。計量資料以均數±標準差（ x-±s）表示， 采用t檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。相關分析應用Person相關分析。

2 結果

2. 1 各組TGF-β1、mAlb檢測結果見表1。

2. 2 Person相關分析 L1AER與pTGF-β1（r=0.993， P=0.018）、uTGF-β1（r=0.990， P=0.010）， P均<0.05， 結果正性相關。

2. 3 TGF-β1對DN的診斷性能以以C1組單側95%的上限值（X±1.64S）為正常值高限， 確定pTGF-β1>29.1 pg/ml， uTGF-β1>38.7 pg/ml為陽性。據此進行DN的早期診斷， 結果見表2。

由表2可知， T1組pTGF-β1對DN 診斷的陽性率為53.1% （17/32 ）， uTGF-β1的陽性率56.3%（18/32）。而在pTGF-β1， uTGF-β1正常時UAER陽性率分別為28.6%（6/21）和22.2%（4/18）， 由此可見pTGF-β1， uTGF-β1的異常較UAER早。以UAER為金標準， 進行pTGF-β1對DN 診斷的性能評價， pTGF-β1靈敏度為85.36%， 特異度為46.87%；uTGF-β1靈敏度為90.24%， 特異度為43.75%。

3 討論

DN的發生是隱蔽的， DN在早期存在可逆性， 故近年大量研究集中在早期的診斷和干預。近年來也有研究發現， UAER<30 mg/24 h時， 其腎臟也可存在較嚴重的損害[3， 4]。因此作為一種反映腎小球損害的非侵入性指標， UAER也有一定的局限性， 出現持續性蛋白尿、高血壓、水腫及腎功能不全表現時， 雖診斷明確， 但腎病已達2級以上， 屬不可逆性變， 已失去了預防和有效治療時機[5， 6]。

本研究結果表明， 2型糖尿病患者pTGF-β1、uTGF-β1較正常人明顯升高， 在微量蛋白尿組血清pTGF-β1、uTGF-β1較正常人升高， 差異有統計學意義（P<0.05）。相關分析顯示pTGF-β1、uTGF-β1與UAER正相關， pTGF-β1和uTGF-β1的變化比mAlb出現更早， 檢測pTGF-β1和uTGF-β1水平可作為早期發現DN的敏感指標之一， 其中以uTGF-β1的臨床靈敏度更高。提示過度表達TGF-β1是糖尿病腎病發生進展的一個重要機制。

參考文獻

[1] Tamaki K， Yoshimura J， Okuda S. Molecular biology in regulation ofkidney function： TGF-beta （transforming growth factor-beta）. Nippon Rinsho， 2006， 64（ Suppl2）：297-301.

[2] Chen S， Hong SW， Iglesia-dela， et al. The key role of the transforming growth factor-beta system in the pathogenesis of diabetic nephropathy. Ren Fail， 2001， 23（3-4）：470-481.

[3] 蘇琴， 朱關則.尿微量白蛋白在糖尿病腎損傷早期診斷中的價值.中華檢驗醫學雜志， 2005， 28（7）：740-741.

[4] 肖嫵. 2型糖尿病尿微量白蛋白與大血管病變的相關關系研究.中國基層醫藥， 2004， 11（3）：338.

[5] 江中林， 姜國良. TGF-β1在糖尿病腎病早期診斷中的應用. 放射免疫學雜志， 2005， 18（3）：195-196.

[6] Tsapenko MV， Nwoko RE， Borland TM， et al. Measurement of urinary TGF-β1 in patients with diabetes mellitus and normal controls. Clin Biochem， 2013， 46（15）：1430-1435.

[收稿日期：2014-06-03]endprint

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2013年3～11月本院內分泌科收治的2型DM患者86例， 其中男 39例， 女47例， 年齡35～75歲， 根據UAER分為三組：T1組為單純DM組， 32例（UAER< 30 mg/24 h）， 平均病程（4.21±2.32）年；T2組為早期DN組， 41例（出現持續性微量蛋白尿 ， UAER 30～300 mg/24 h）， 平均病程（10.60±3.72）年；T3組為晚期DN組， 13例（UAER >300 mg/24 h）， 平均病程（15.14±4.62）年。取本院2013年8～10月門診體檢者23 例為正常對照組（C1組）， 其中男10例， 女13例， 年齡42～56歲， 為空腹血糖（FBG）、尿素氮（BUN）、肌酐（CREA）、血脂、血壓正常， 無心、肝、腎等重要臟器疾病， 無內分泌及遺傳代謝性疾病史。

1. 2 方法 早晨空腹抽取靜脈血， 離心分離血清， 收集24 h尿液， 準確記錄尿量， 混勻后取5 ml， -70℃保存待測。血、尿TGF-β1采用雙抗體夾心ELISA 法， 定量檢測。mAlb采用免疫增強比濁法， 使用日立7600-020全自動生化分析儀。

1. 3 統計學方法 研究所得數據采用SPSS15.0 統計學軟件進行統計分析。計量資料以均數±標準差（ x-±s）表示， 采用t檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。相關分析應用Person相關分析。

2 結果

2. 1 各組TGF-β1、mAlb檢測結果見表1。

2. 2 Person相關分析 L1AER與pTGF-β1（r=0.993， P=0.018）、uTGF-β1（r=0.990， P=0.010）， P均<0.05， 結果正性相關。

2. 3 TGF-β1對DN的診斷性能以以C1組單側95%的上限值（X±1.64S）為正常值高限， 確定pTGF-β1>29.1 pg/ml， uTGF-β1>38.7 pg/ml為陽性。據此進行DN的早期診斷， 結果見表2。

由表2可知， T1組pTGF-β1對DN 診斷的陽性率為53.1% （17/32 ）， uTGF-β1的陽性率56.3%（18/32）。而在pTGF-β1， uTGF-β1正常時UAER陽性率分別為28.6%（6/21）和22.2%（4/18）， 由此可見pTGF-β1， uTGF-β1的異常較UAER早。以UAER為金標準， 進行pTGF-β1對DN 診斷的性能評價， pTGF-β1靈敏度為85.36%， 特異度為46.87%；uTGF-β1靈敏度為90.24%， 特異度為43.75%。

3 討論

DN的發生是隱蔽的， DN在早期存在可逆性， 故近年大量研究集中在早期的診斷和干預。近年來也有研究發現， UAER<30 mg/24 h時， 其腎臟也可存在較嚴重的損害[3， 4]。因此作為一種反映腎小球損害的非侵入性指標， UAER也有一定的局限性， 出現持續性蛋白尿、高血壓、水腫及腎功能不全表現時， 雖診斷明確， 但腎病已達2級以上， 屬不可逆性變， 已失去了預防和有效治療時機[5， 6]。

本研究結果表明， 2型糖尿病患者pTGF-β1、uTGF-β1較正常人明顯升高， 在微量蛋白尿組血清pTGF-β1、uTGF-β1較正常人升高， 差異有統計學意義（P<0.05）。相關分析顯示pTGF-β1、uTGF-β1與UAER正相關， pTGF-β1和uTGF-β1的變化比mAlb出現更早， 檢測pTGF-β1和uTGF-β1水平可作為早期發現DN的敏感指標之一， 其中以uTGF-β1的臨床靈敏度更高。提示過度表達TGF-β1是糖尿病腎病發生進展的一個重要機制。

參考文獻

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[5] 江中林， 姜國良. TGF-β1在糖尿病腎病早期診斷中的應用. 放射免疫學雜志， 2005， 18（3）：195-196.

[6] Tsapenko MV， Nwoko RE， Borland TM， et al. Measurement of urinary TGF-β1 in patients with diabetes mellitus and normal controls. Clin Biochem， 2013， 46（15）：1430-1435.

[收稿日期：2014-06-03]endprint

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2013年3～11月本院內分泌科收治的2型DM患者86例， 其中男 39例， 女47例， 年齡35～75歲， 根據UAER分為三組：T1組為單純DM組， 32例（UAER< 30 mg/24 h）， 平均病程（4.21±2.32）年；T2組為早期DN組， 41例（出現持續性微量蛋白尿 ， UAER 30～300 mg/24 h）， 平均病程（10.60±3.72）年；T3組為晚期DN組， 13例（UAER >300 mg/24 h）， 平均病程（15.14±4.62）年。取本院2013年8～10月門診體檢者23 例為正常對照組（C1組）， 其中男10例， 女13例， 年齡42～56歲， 為空腹血糖（FBG）、尿素氮（BUN）、肌酐（CREA）、血脂、血壓正常， 無心、肝、腎等重要臟器疾病， 無內分泌及遺傳代謝性疾病史。

1. 2 方法 早晨空腹抽取靜脈血， 離心分離血清， 收集24 h尿液， 準確記錄尿量， 混勻后取5 ml， -70℃保存待測。血、尿TGF-β1采用雙抗體夾心ELISA 法， 定量檢測。mAlb采用免疫增強比濁法， 使用日立7600-020全自動生化分析儀。

1. 3 統計學方法 研究所得數據采用SPSS15.0 統計學軟件進行統計分析。計量資料以均數±標準差（ x-±s）表示， 采用t檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。相關分析應用Person相關分析。

2 結果

2. 1 各組TGF-β1、mAlb檢測結果見表1。

2. 2 Person相關分析 L1AER與pTGF-β1（r=0.993， P=0.018）、uTGF-β1（r=0.990， P=0.010）， P均<0.05， 結果正性相關。

2. 3 TGF-β1對DN的診斷性能以以C1組單側95%的上限值（X±1.64S）為正常值高限， 確定pTGF-β1>29.1 pg/ml， uTGF-β1>38.7 pg/ml為陽性。據此進行DN的早期診斷， 結果見表2。

由表2可知， T1組pTGF-β1對DN 診斷的陽性率為53.1% （17/32 ）， uTGF-β1的陽性率56.3%（18/32）。而在pTGF-β1， uTGF-β1正常時UAER陽性率分別為28.6%（6/21）和22.2%（4/18）， 由此可見pTGF-β1， uTGF-β1的異常較UAER早。以UAER為金標準， 進行pTGF-β1對DN 診斷的性能評價， pTGF-β1靈敏度為85.36%， 特異度為46.87%；uTGF-β1靈敏度為90.24%， 特異度為43.75%。

3 討論

DN的發生是隱蔽的， DN在早期存在可逆性， 故近年大量研究集中在早期的診斷和干預。近年來也有研究發現， UAER<30 mg/24 h時， 其腎臟也可存在較嚴重的損害[3， 4]。因此作為一種反映腎小球損害的非侵入性指標， UAER也有一定的局限性， 出現持續性蛋白尿、高血壓、水腫及腎功能不全表現時， 雖診斷明確， 但腎病已達2級以上， 屬不可逆性變， 已失去了預防和有效治療時機[5， 6]。

本研究結果表明， 2型糖尿病患者pTGF-β1、uTGF-β1較正常人明顯升高， 在微量蛋白尿組血清pTGF-β1、uTGF-β1較正常人升高， 差異有統計學意義（P<0.05）。相關分析顯示pTGF-β1、uTGF-β1與UAER正相關， pTGF-β1和uTGF-β1的變化比mAlb出現更早， 檢測pTGF-β1和uTGF-β1水平可作為早期發現DN的敏感指標之一， 其中以uTGF-β1的臨床靈敏度更高。提示過度表達TGF-β1是糖尿病腎病發生進展的一個重要機制。

參考文獻

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[4] 肖嫵. 2型糖尿病尿微量白蛋白與大血管病變的相關關系研究.中國基層醫藥， 2004， 11（3）：338.

[5] 江中林， 姜國良. TGF-β1在糖尿病腎病早期診斷中的應用. 放射免疫學雜志， 2005， 18（3）：195-196.

[6] Tsapenko MV， Nwoko RE， Borland TM， et al. Measurement of urinary TGF-β1 in patients with diabetes mellitus and normal controls. Clin Biochem， 2013， 46（15）：1430-1435.

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