短柱肖菝葜的資源調(diào)查及品質(zhì)分析△

關(guān)扎根，吳尚英，李安平，3，張興安，賈學(xué)思，楊霞，魏紅國，王瑞珍

(1.山西振東道地藥材開發(fā)有限公司，山西 長治 047100；2.山西長治縣農(nóng)業(yè)局，山西 長治 047100；3.山西中醫(yī)學(xué)院，山西 太原 030024)

國家發(fā)改委中藥高技術(shù)產(chǎn)業(yè)化發(fā)展專項(復(fù)方苦參注射液優(yōu)質(zhì)原料藥材生產(chǎn)基地建設(shè))

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吳尚英，研究方向：藥用植物栽培，Tel：(0355)8096033，E-mail：yingzi841024@163.com

短柱肖菝葜的資源調(diào)查及品質(zhì)分析△

關(guān)扎根1，吳尚英2*，李安平1，3，張興安1，賈學(xué)思1，楊霞1，魏紅國1，王瑞珍1

(1.山西振東道地藥材開發(fā)有限公司，山西 長治 047100；2.山西長治縣農(nóng)業(yè)局，山西 長治 047100；3.山西中醫(yī)學(xué)院，山西 太原 030024)

目的探討短柱肖菝葜的資源品質(zhì)與生態(tài)環(huán)境的關(guān)系。方法通過對全國短柱肖菝葜的資源調(diào)查，得到采集樣品和生態(tài)環(huán)境資料；采用高效液相色譜法測定甲基氧化偶氮甲醇櫻草糖苷的含量。結(jié)果不同產(chǎn)地短柱肖菝葜中甲基氧化偶氮甲醇櫻草糖苷的含量差異明顯。結(jié)論短柱肖菝葜的品質(zhì)與其生態(tài)環(huán)境之間具有一定的相關(guān)性。

短柱肖菝葜；資源調(diào)查；甲基氧化偶氮甲醇櫻草糖苷；品質(zhì)分析

短柱肖菝葜HeterosmilaxyunnanensisGagnep.為菝葜科(Smilakaceae)肖菝葜屬多年生攀緣灌木，其干燥塊莖藥用，具有清熱、除濕、解毒、通利關(guān)節(jié)之功能，臨床用于濕熱淋濁，帶下，癰腫，瘰癘，疥癬，梅毒，筋骨攣痛以及鉤端螺旋體病，民間習(xí)稱“白土苓”[1]，收載于四川、貴州、湖南省中藥材標(biāo)準(zhǔn)中，與《中國藥典》收載的土茯苓不僅藥名相近，且歷代本草常以土茯苓記載，與土茯苓混用[2]。

隨著短柱肖菝葜抗腫瘤作用的不斷開發(fā)和利用，其臨床應(yīng)用也逐漸擴(kuò)大，短柱肖菝葜需求量急劇增加。目前短柱肖菝葜廣泛分布于湖南、湖北、廣西、四川、貴州、云南等地。由于產(chǎn)地生長環(huán)境的不同，導(dǎo)致不同產(chǎn)地之間藥材質(zhì)量存在很大的差異，這不利于現(xiàn)代制藥工程規(guī)范化生產(chǎn)要求。為了合理開發(fā)資源和提高臨床療效，本課題組對湖北、湖南、廣西、云南、甘肅、貴州、四川、重慶、陜西、山西等9省短柱肖菝葜的資源進(jìn)行了調(diào)查和樣本采集；以甲基氧化偶氮甲醇櫻草糖苷的含量作為評價指標(biāo)[3-4]，對比不同地區(qū)短柱肖菝葜的質(zhì)量差異，為合理利用菝葜藥材資源以及實施GAP種植提供科學(xué)依據(jù)。

1 儀器與試藥

乙腈(色譜純，美國Honeywell公司)；娃哈哈純凈水；無水乙醇(色譜純，天津市豐越化學(xué)品有限公司)；其他試劑均為分析純。甲基氧化偶氮甲醇櫻草糖苷對照品為山西振東光明研究院制備，用于含量測定(面積歸一法測定質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為：99%)。

Agilent 1260高效液相色譜儀(VWD檢測器)，SHANGPINGFA2104(1/1萬)電子天平。

2 方法與結(jié)果

2.1 資源調(diào)查

2.1.1 調(diào)查內(nèi)容與方法 本課題組于2011年6～8月對湖北、湖南、廣西、云南、甘肅、貴州、四川、重慶、陜西、山西等9省的短柱肖菝葜植物資源進(jìn)行了調(diào)查，收集了其生態(tài)環(huán)境資料和樣品，包括短柱肖菝葜的植物標(biāo)本、藥材樣品、生態(tài)數(shù)據(jù)及土樣等。

2.1.2 調(diào)查結(jié)果 各地共采集樣品27個，經(jīng)植物標(biāo)本鑒定，在湖南、湖北、廣西、云南、貴州5省采集到的9個標(biāo)本為短柱肖菝葜，其中代表性的樣品及其分布地的生態(tài)環(huán)境情況見表1。

表1 短柱肖菝葜不同分布地及生態(tài)環(huán)境情況

2.2甲基氧化偶氮甲醇櫻草糖苷的測定

2.2.1色譜條件 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-0.01 mol·L-1醋酸銨溶液(濃氨水調(diào)節(jié)pH值至8.0)(3∶97)為流動相，檢測波長215 nm，流速0.6 mL·min-1。理論板數(shù)按甲基氧化偶氮甲醇櫻草糖苷峰計算應(yīng)不低于2 000。

2.2.2標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備 取甲基氧化偶氮甲醇櫻草糖苷對照品適量，精密稱定約12 mg，置20 mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取1 mL置20 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。(每1 mL含0.03 mg甲基氧化偶氮甲醇櫻草糖苷)

2.2.3供試品溶液的制備 取本品粉末(過四號篩)約0.2 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入水50 mL，稱定重量，超聲處理1 h，放冷，再稱定重量，加水補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.2.4樣品測定 取9批采自不同產(chǎn)地的短柱肖菝葜藥材參照2.2.3項下方法進(jìn)行樣品制備，然后進(jìn)行液相分析，測定其中甲基氧化偶氮甲醇櫻草糖苷的含量，結(jié)果見表2。

表2 不同產(chǎn)地短柱肖菝葜藥材中甲基氧化偶氮甲醇櫻草糖苷的含量測定結(jié)果

3 結(jié)論與討論

從甲基氧化偶氮甲醇櫻草糖苷的含量測定結(jié)果來看，不同產(chǎn)地的短柱肖菝葜中甲基氧化偶氮甲醇櫻草糖苷的含量差異明顯，以湖北恩施市龔家坪的含量最高，為0.66%，湖南、貴州的含量次之，廣西玉林沙河的含量最低，為0.01%。短柱肖菝葜為多年生植物，其生長年限難以辨別，本次資源調(diào)查采集的短柱肖菝葜存在地域群落不同和生長年限的差異，因此測定的甲基氧化偶氮甲醇櫻草糖苷的含量存在較大差異，需通過進(jìn)一步的深入研究種質(zhì)和生長年限來對比其含量的不同。

從短柱肖菝葜的資源調(diào)查和品質(zhì)分析的結(jié)果來看，菝葜藥材質(zhì)量差異可能與菝葜產(chǎn)地的經(jīng)緯度、海拔、土壤性質(zhì)以及地理環(huán)境有關(guān)，從中可以初步得出適合短柱肖菝葜生長的生態(tài)環(huán)境特點：(1)主要分布在海拔50～1 600 m的環(huán)境中，但甲基氧化偶氮甲醇櫻草糖苷含量較高的短柱肖菝葜集中生長在400～1 100 m的海拔區(qū)段；(2)從經(jīng)緯度來看，緯度影響差異不大，隨著經(jīng)度的增加，甲基氧化偶氮甲醇櫻草糖苷的含量也在增加，從而說明地理環(huán)境對短柱肖菝葜的品質(zhì)存在一定的影響。(3)從土壤性質(zhì)來看，短柱肖菝葜適宜生長的土壤是富含腐殖質(zhì)的中高肥力土壤，對土壤質(zhì)地要求不嚴(yán)，在沙土、粘土、壤土中均可生長。(4)短柱肖菝葜主要分布于喀斯特地貌區(qū)的灌木或中小喬木的次生林地，喜溫暖濕潤，在通風(fēng)良好、半陰的環(huán)境生長最好。

[1] 秦文杰，王鋼力，林瑞超.短柱肖菝葜化學(xué)成分的研究[J].中草藥，2007，38(10)：1466-1468.

[2] 蒯玉花，海麗娜，菅曉勇，等.肖菝葜屬藥用植物的研究進(jìn)展[J].中國實驗方劑學(xué)雜志，2010，16(11)：207-209.

[3] 秦文杰.短柱肖菝葜化學(xué)成分及質(zhì)量控制研究[D].北京中醫(yī)藥大學(xué)，2007.

[4] 喬蕾.中藥白土茯苓質(zhì)量控制方法研究[D].沈陽藥科大學(xué)，2007.

HeterosmilaxyunnanensisMedicinalPlantsResourceInvestigationandQualityAnalysis

GUANZhagen1，WUShangying2*，LIAnping1，3，ZHANGXing’an1，JIAXuesi1，YANGXia1，WEIHongguo1，WANGRuizhen1

(1.Thefamous-regiondrugofDevelopmentCo.，Ltd.ofShanXiZhenDong，Changzhi047100，China；2.ChangzhiCountyBureauofAgriculture，Changzhi047100，China；3.ShanxiUniversityofTraditionalChineseMedicine，Taiyuan030024，China)

Objective：Discuss the relationship betweenHeterosmilaxyunnanensisquality and its growing environment.MethodsRepresentative growing district ofHeterosmilaxyunnanensiswas selected for resource investigation.The information of samples and the environment were collected.The content of macrozamin was determined by HPLC.ResultsMacrozamin content inHeterosmilaxyunnanensisfrom different districts were obviously different.ConclusionThere is certain relativity between the quality ofHeterosmilaxyunnanensisand its growing environment.

Heterosmilaxyunnanensis；Resource investigation；Macrozamin；Quality analysis

10.13313/j.issn.1673-4890.2014.06.004

2014-02-28)