HPLC法測定蒙藥材胡枝子不同部位中槲皮素的含量

鄭 敏 陳廣榮 張栓珍 劉 靜

(1.內(nèi)蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院,內(nèi)蒙古 呼和浩特 010020； 2.內(nèi)蒙古自治區(qū)醫(yī)科大學(xué)附屬人民醫(yī)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010020； 3.內(nèi)蒙古自治區(qū)中醫(yī)醫(yī)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010020)

本品系蒙醫(yī)習(xí)用藥材(蒙名胡吉斯)為豆科植物胡枝子Lespedeza bicolor Turcz.，別名二色胡枝子、隨軍茶、橫條。全區(qū)都有分布，生于丘陵坡地、灌木叢中。胡枝子全株能入藥。具有潤肺解熱、利尿止血，用于感冒發(fā)熱，眩暈頭痛，咳嗦，尿路感染[1]。胡枝子化學(xué)成分包括黃酮、生物堿、萜類、有機酸及甾醇類等，以上成分具有抗炎抑菌、降血糖、抗氧化、抗輻射、抗癌、抗腫瘤以及增強免疫能力等藥理活性[2]。槲皮素可作為藥材質(zhì)量控制成分。

1 儀器與試劑

1.1 儀器 1100型高效液相色譜儀 (美國安捷倫公司)，TJ-912型色譜分析平臺(太極計算機公司), 色譜柱ODS-C18 (4.6mm×200mm，5μm，蘭州化物所)。

1.2 試藥 槲皮素(0081-9304)對照品由中國藥品生物制品檢定所提供，甲醇為色譜純，其他試劑均為分析純，水為純化水；胡枝子采自內(nèi)蒙古大青山壩口子。

2 實驗方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱ODS-C18 (4.6mm×200mm，5μm)，流動相：甲醇-水-磷酸(300∶250∶1)，波長：360nm，進樣量：10μL。在此條件下樣品中槲皮素與其它組分有較好的分離，見圖1。

2.2 對照品溶液的制備 精密稱取干燥至恒質(zhì)量的槲皮素對照品適量，置棕色量瓶中，甲醇溶解，配制成1mL含0.058 mg 槲皮素溶液，作為對照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備 取本品花、葉、莖、根，粉碎，過100目篩，精密稱定0.5g，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇10mL，稱定質(zhì)量，超聲處理30min ，放冷，稱重，用甲醇補足減失的質(zhì)量，搖勻， 濾過，取續(xù)濾液備用，即得。

2.4 線性關(guān)系考察 分別精密量取槲皮素對照品溶液0.5，1，2，4，8μL，按上述色譜條件進行測定。結(jié)果，在0.029 ～0.464mg·mL-1濃度范圍內(nèi)以峰面積(A)與對照品質(zhì)量濃度(C)進行回歸，其線性關(guān)系良好。回歸方程：A=25177834C -295090， r=0.999。

2.5 穩(wěn)定性考察 取同1份供試品溶液(葉)，分別在0，1，2，4,8h進樣測定，以槲皮素峰面積值計算RSD=0.71%。結(jié)果表明，供試品溶液在8h內(nèi)穩(wěn)定。

2.6 精密度實驗及重復(fù)性考察 吸取同一批供試品溶液(葉)，在上述色譜條件下重復(fù)進樣6次，測得槲皮素峰面積RSD=0.68%，結(jié)果，精密度考察符合要求。取同批藥材(葉)按2.3項下平行制備6份樣品溶液，并按2.1項下測定，槲皮素的平均含量=0.27%， RSD=0.78%，重復(fù)性考察符合要求。

2.7 加樣回收率測定 取同批藥材地上部位已知含量的樣品6份，每份取約200mg，精密稱定，依次分別加入1mL(每mL含槲皮素0.058 mg)對照品溶液，按供試品溶液的制備操作，測定含量，計算回收率。槲皮素平均回收率為98.6%，RSD=1.88%。準(zhǔn)確度測定符合要求。

3 樣品測定

取胡枝子藥材不同部位，按2.3 項下方法制備供試品溶液，按擬定的色譜條件測定槲皮素含量，花0.20%，葉0.27%，莖0.10% ，根0.01%，槲皮素平均含量為0.145%。

4 結(jié)論

本文對胡枝子中槲皮素含量進行測定研究，研究結(jié)果表明，槲皮素含量，花0.20%,葉0.27%，莖0.10% ，根0.01%，槲皮素平均含量為0.145%。采用HPLC法測定胡枝子槲皮素含量，方法簡便、快速、準(zhǔn)確，可作為胡枝子質(zhì)量控制方法之一。

[1]內(nèi)蒙古自治區(qū)衛(wèi)生局.內(nèi)蒙古中草藥[M].內(nèi)蒙古自治區(qū)人民出版社，1972，297.

[2] 張帆，齊小花，鄒明強，等.胡枝子中化學(xué)成分及黃酮類物質(zhì)提取與分析的研究進展[J].時珍國醫(yī)國藥,2008,19(12):2885.