長春花花粉的貯藏技術

劉慧+賀漫媚+張繼方+王偉

摘要：采用離體培養法，研究不同開花時間和不同貯藏方式對長春花花粉萌發率的影響。結果表明：不同開花時間的長春花花粉都保持較高的可育率，其離體培養萌發率保持在90%以上；常溫貯藏、5 ℃低溫貯藏和5 ℃低溫干燥貯藏3種方式間的花粉萌發率差異顯著，短時間保存宜選用5 ℃低溫貯藏，長時間保存宜選用5 ℃低溫干燥貯藏。

關鍵詞：長春花；貯藏；花粉；活力

中圖分類號：S682.01 文獻標志碼：A

文章編號：1002-1302（2014）08-0172-02

長春花（Catharanthus roseus G. Don.）為夾竹桃科（Apocynaceae）長春花屬（Catharanthus）多年生草本植物，原產于南非、東部非洲及美洲熱帶，常綠直立亞灌木或多年生草本，株高30～60 cm，幼枝綠色或紅褐色，全株無毛，莖直立，多分枝，葉對生。植物花粉生命力及其貯藏特性是開花生物學特性研究中的一項重要內容，在常規育種特別是人工輔助授粉或雜交授粉時，需要早期采集和貯藏花粉。自Hirata證實長春花具有較強生物堿研究以來^[1]，國內外學者開始關注長春花，尤其是對長春花生物堿進行了大量的研究，此外，關于長春花的組織培養，國內外研究者也開展了大量工作^[1-4]。對于長春花花粉貯藏技術方面的研究目前尚未系統報道。通過研究本地長春花品系白長春花（C. roseus cv. albus）、黃長春花（C. roseus cv. flavus）和進口長春花品系的農藝性狀及其花粉在自然條件下衰敗和花粉貯藏技術，為解決長春花遠距離雜交、解決花期不遇問題奠定理論基礎，同時為進行長春花雜交制種、新品系的培育提供技術支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗長春花品系及其農藝性狀調查

參試長春花品系如表1所見。2012年7月調查各品系的農藝性狀，包括株高、花徑、株幅、花朵數及花色，利用SAS 8.0對不同品系各性狀進行Duncans檢驗。

1.2 花粉活力測定

1.2.1 測定方法 將試驗用培養皿洗凈晾干，和配制好的培養基一起消毒；消毒完成后，將培養基倒入培養皿，培養基盡量薄而均勻；自然冷卻后，用棉花棒蘸上花粉，輕彈到培養基上，通過顯微鏡觀察花粉的萌發情況，統計花粉萌發率來衡量花粉品質及活力。花粉萌發率計算公式：花粉萌發率=目鏡視野中萌發花粉粒數/目鏡視野中花粉粒總數×100%。所有操作均在超凈工作臺上完成。

1.2.2 試驗內容 （1）長春花不同開花時間花粉活力變化：采集本地長春花開花第1天至第7天的花朵，收集新鮮花粉進行離體培養，檢測花粉活力。每種花粉5個培養皿，每培養皿取3個視野進行觀察，每隔1 h進行1次花粉活力測定，直至觀察6 h，統計萌發率。（2）不同貯藏方式對長春花花粉活力的影響：分別將常溫貯藏、5 ℃低溫貯藏和5 ℃低溫干燥貯藏的花粉各1份，每天進行離體培養，直至第15天，每種花粉5個培養皿，每培養皿取3個視野進行觀察，統計萌發率。

2 結果與分析

2.1 不同長春花品系農藝特性調查

由表2、表3可見，除冠幅外，參試不同長春花品系的農藝性狀之間均存在很大差異；花色種類繁多，以紅色為主；各品種的株高分布在18.38～25.12 cm之間，這與本地長春花株高差異非常大；最矮的是6號品系（Pacifica Orchid Deep），株高均值為18.38 cm，最大株高的為3號品系（Cora Punch），其株高均值為25.12 cm；不同品系間冠幅差異不顯著，其單株間存在一定差異，可能與個體的營養生長環境有關；不同品系間花徑差異極顯著，最小花徑為2號品系，為4.04 cm，最大花徑為4號品系， 達到5.20 cm；不同品系間花朵數差異也很大，從8.3朵到15.9朵，花朵數最多的為11號品系。

2.2 長春花不同開花時間花粉活力的變化

由圖1可見，長春花不同開花時間的花粉活力都保持在較高的水平，花粉萌發率第1天就達到最高，為99.82%，到第7天花瓣即將脫落，花粉萌發率仍保持在95%以上，不同時間花粉萌發率差異不明顯。這說明長春花從開始開花到落花，其花粉活力都保持在一個較高的水平，有較高的可育率，隨時可以收集花粉進行雜交授粉。

2.3 不同貯藏方式對長春花粉活力的影響

由圖2可見，常溫貯藏下，花粉活力隨貯藏時間的增加呈明顯下降趨勢，貯藏15 d后，花粉萌發率僅為7.56%，且花粉管明顯縮短；5 ℃低溫貯藏的花粉活力一直保持在較高水平，貯藏半個月后，其花粉活力仍達到80%以上；5 ℃低溫干燥處理4 d后的花粉，其花粉萌發率保持在50%左右，不同處理間差異較大，變化范圍在30%～70%之間，隨著貯藏時間延長，其活力變化不大。

3 小結

對15個進口長春花品系的農藝特性進行調查，結果表明，除了冠幅外，不同品種的農藝性狀之間均存在很大差異，尤其是不同品系花朵數差異顯著；花色種類繁多，以紅色為主。對長春花不同開花時間的花粉進行活力進行檢測，結果表明，長春花不同開花時間的花粉都保持較高的可育率，其花粉離體培養萌發率保持在90%以上。對不同貯藏方式的長春花花粉活力進行研究，結果表明，常溫貯藏、5 ℃低溫貯藏和5 ℃低溫干燥貯藏3種貯藏方式間花粉萌發率差異顯著，短時間保存宜選用5 ℃低溫貯藏，長時間進行長春花花粉保存，宜選用5 ℃低溫干燥貯藏。長春花干燥處理后導致花粉活力大大降低，這可能是由于長春花花粉活力對水分的要求相對較高所導致，這與絲瓜、玉米、甘薯等花粉離體萌發的研究結果^[5-7]一致，高濕度是許多植物花粉活力降低的重要因素^[7]。

低溫冷凍貯藏的溫度大概在-20～-15 ℃。一般來說，花粉冷凍貯藏比冷藏效果好，如西南樺花粉在-20 ℃下干燥貯藏效果最佳^[8]；楊傳友等發現12種果樹14個品種的花粉在冷凍室的貯藏效果比冷藏室好，花粉萌發率可提高7.5%～27.2%^[9]。超低溫（-80 ℃）能最大限度地抑制生理代謝強度，Knowlton第1次報道了-180 ℃貯存后的金魚草（Antrirrhinum majus）花粉仍具有生活力，降低花粉含水量能夠提高冰凍保存的生存率^[10]，目前已經進行了30多種植物花粉的超低溫保存研究^[11]。對長春花花粉進行冷凍低溫貯藏（-5 ℃）和超低溫（-80 ℃）貯藏，結果表明，0 ℃以下低溫不利于常規處理花粉的保存，冷凍貯藏1 h即喪失活力，而對于干燥真空貯藏的花粉則能起到延長保存時間的作用。

參考文獻：

[1]Hirata K，Yamanaka A，Kurano N，et al. Production of indole alkaloids in multiple shoot culture of Catharanthus roseus（L）G. Don.[J]. Agricultural and Biological Chemistry，1987，51（5）：1311-1317.

[2]楊玉敏，元英進，胡宗定. 正交試驗法優化長春花分化培養基[J]. 天然產物研究與開發，1993，5（3）：34-37.

[3]黃 勇，郭善利，錢關澤，等. 長春花的組織培養與快速繁殖[J]. 植物生理學通訊，2000，36（1）：39.

[4]郭勝娟. 長春花細胞培養與快速繁殖的初步研究[D]. 武漢：華中農業大學，2004.

[5]王少先，李普安，喬明亮. 蔬菜作物花粉生物學特性的研究——Ⅰ：絲瓜花粉的萌發特性[J]. 洛陽農專學報，1995，2（1）：22-27.

[6]史桂榮. 玉米花粉生活力的研究[J]. 黑龍江農業科學，1996（2）：13-15.

[7]王慶美，郗光輝，王大箴，等. 甘薯花粉離體萌發及不同保存方法對其生活力的影響[J]. 萊陽農學院學報，1996，13（3）：28-31.

[8]程 偉，趙志剛，郭俊杰，等. 西南樺花粉低溫貯藏試驗初報[J]. 浙江林業科技，2007，27（6）：49-52.

[9]楊傳友，畢 杰，楊先棟. 十二種果樹花粉貯藏試驗[J]. 果樹科學，1994，11（2）：103-104.

[10]Lwanami Y. Storage in an organic solvent as a mean for preserving viability pollen grain[J]. Stain Technology，1972，47（4）：137-139.

[11]趙樹仁，武麗英，姚民昌，等. 番茄花粉超低溫保存的研究[J]. 園藝學報，1993，20（1）：66-70.

摘要：采用離體培養法，研究不同開花時間和不同貯藏方式對長春花花粉萌發率的影響。結果表明：不同開花時間的長春花花粉都保持較高的可育率，其離體培養萌發率保持在90%以上；常溫貯藏、5 ℃低溫貯藏和5 ℃低溫干燥貯藏3種方式間的花粉萌發率差異顯著，短時間保存宜選用5 ℃低溫貯藏，長時間保存宜選用5 ℃低溫干燥貯藏。

關鍵詞：長春花；貯藏；花粉；活力

中圖分類號：S682.01 文獻標志碼：A

文章編號：1002-1302（2014）08-0172-02

長春花（Catharanthus roseus G. Don.）為夾竹桃科（Apocynaceae）長春花屬（Catharanthus）多年生草本植物，原產于南非、東部非洲及美洲熱帶，常綠直立亞灌木或多年生草本，株高30～60 cm，幼枝綠色或紅褐色，全株無毛，莖直立，多分枝，葉對生。植物花粉生命力及其貯藏特性是開花生物學特性研究中的一項重要內容，在常規育種特別是人工輔助授粉或雜交授粉時，需要早期采集和貯藏花粉。自Hirata證實長春花具有較強生物堿研究以來^[1]，國內外學者開始關注長春花，尤其是對長春花生物堿進行了大量的研究，此外，關于長春花的組織培養，國內外研究者也開展了大量工作^[1-4]。對于長春花花粉貯藏技術方面的研究目前尚未系統報道。通過研究本地長春花品系白長春花（C. roseus cv. albus）、黃長春花（C. roseus cv. flavus）和進口長春花品系的農藝性狀及其花粉在自然條件下衰敗和花粉貯藏技術，為解決長春花遠距離雜交、解決花期不遇問題奠定理論基礎，同時為進行長春花雜交制種、新品系的培育提供技術支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗長春花品系及其農藝性狀調查

參試長春花品系如表1所見。2012年7月調查各品系的農藝性狀，包括株高、花徑、株幅、花朵數及花色，利用SAS 8.0對不同品系各性狀進行Duncans檢驗。

1.2 花粉活力測定

1.2.1 測定方法 將試驗用培養皿洗凈晾干，和配制好的培養基一起消毒；消毒完成后，將培養基倒入培養皿，培養基盡量薄而均勻；自然冷卻后，用棉花棒蘸上花粉，輕彈到培養基上，通過顯微鏡觀察花粉的萌發情況，統計花粉萌發率來衡量花粉品質及活力。花粉萌發率計算公式：花粉萌發率=目鏡視野中萌發花粉粒數/目鏡視野中花粉粒總數×100%。所有操作均在超凈工作臺上完成。

1.2.2 試驗內容 （1）長春花不同開花時間花粉活力變化：采集本地長春花開花第1天至第7天的花朵，收集新鮮花粉進行離體培養，檢測花粉活力。每種花粉5個培養皿，每培養皿取3個視野進行觀察，每隔1 h進行1次花粉活力測定，直至觀察6 h，統計萌發率。（2）不同貯藏方式對長春花花粉活力的影響：分別將常溫貯藏、5 ℃低溫貯藏和5 ℃低溫干燥貯藏的花粉各1份，每天進行離體培養，直至第15天，每種花粉5個培養皿，每培養皿取3個視野進行觀察，統計萌發率。

2 結果與分析

2.1 不同長春花品系農藝特性調查

由表2、表3可見，除冠幅外，參試不同長春花品系的農藝性狀之間均存在很大差異；花色種類繁多，以紅色為主；各品種的株高分布在18.38～25.12 cm之間，這與本地長春花株高差異非常大；最矮的是6號品系（Pacifica Orchid Deep），株高均值為18.38 cm，最大株高的為3號品系（Cora Punch），其株高均值為25.12 cm；不同品系間冠幅差異不顯著，其單株間存在一定差異，可能與個體的營養生長環境有關；不同品系間花徑差異極顯著，最小花徑為2號品系，為4.04 cm，最大花徑為4號品系， 達到5.20 cm；不同品系間花朵數差異也很大，從8.3朵到15.9朵，花朵數最多的為11號品系。

2.2 長春花不同開花時間花粉活力的變化

由圖1可見，長春花不同開花時間的花粉活力都保持在較高的水平，花粉萌發率第1天就達到最高，為99.82%，到第7天花瓣即將脫落，花粉萌發率仍保持在95%以上，不同時間花粉萌發率差異不明顯。這說明長春花從開始開花到落花，其花粉活力都保持在一個較高的水平，有較高的可育率，隨時可以收集花粉進行雜交授粉。

2.3 不同貯藏方式對長春花粉活力的影響

由圖2可見，常溫貯藏下，花粉活力隨貯藏時間的增加呈明顯下降趨勢，貯藏15 d后，花粉萌發率僅為7.56%，且花粉管明顯縮短；5 ℃低溫貯藏的花粉活力一直保持在較高水平，貯藏半個月后，其花粉活力仍達到80%以上；5 ℃低溫干燥處理4 d后的花粉，其花粉萌發率保持在50%左右，不同處理間差異較大，變化范圍在30%～70%之間，隨著貯藏時間延長，其活力變化不大。

3 小結

對15個進口長春花品系的農藝特性進行調查，結果表明，除了冠幅外，不同品種的農藝性狀之間均存在很大差異，尤其是不同品系花朵數差異顯著；花色種類繁多，以紅色為主。對長春花不同開花時間的花粉進行活力進行檢測，結果表明，長春花不同開花時間的花粉都保持較高的可育率，其花粉離體培養萌發率保持在90%以上。對不同貯藏方式的長春花花粉活力進行研究，結果表明，常溫貯藏、5 ℃低溫貯藏和5 ℃低溫干燥貯藏3種貯藏方式間花粉萌發率差異顯著，短時間保存宜選用5 ℃低溫貯藏，長時間進行長春花花粉保存，宜選用5 ℃低溫干燥貯藏。長春花干燥處理后導致花粉活力大大降低，這可能是由于長春花花粉活力對水分的要求相對較高所導致，這與絲瓜、玉米、甘薯等花粉離體萌發的研究結果^[5-7]一致，高濕度是許多植物花粉活力降低的重要因素^[7]。

低溫冷凍貯藏的溫度大概在-20～-15 ℃。一般來說，花粉冷凍貯藏比冷藏效果好，如西南樺花粉在-20 ℃下干燥貯藏效果最佳^[8]；楊傳友等發現12種果樹14個品種的花粉在冷凍室的貯藏效果比冷藏室好，花粉萌發率可提高7.5%～27.2%^[9]。超低溫（-80 ℃）能最大限度地抑制生理代謝強度，Knowlton第1次報道了-180 ℃貯存后的金魚草（Antrirrhinum majus）花粉仍具有生活力，降低花粉含水量能夠提高冰凍保存的生存率^[10]，目前已經進行了30多種植物花粉的超低溫保存研究^[11]。對長春花花粉進行冷凍低溫貯藏（-5 ℃）和超低溫（-80 ℃）貯藏，結果表明，0 ℃以下低溫不利于常規處理花粉的保存，冷凍貯藏1 h即喪失活力，而對于干燥真空貯藏的花粉則能起到延長保存時間的作用。

參考文獻：

[1]Hirata K，Yamanaka A，Kurano N，et al. Production of indole alkaloids in multiple shoot culture of Catharanthus roseus（L）G. Don.[J]. Agricultural and Biological Chemistry，1987，51（5）：1311-1317.

[2]楊玉敏，元英進，胡宗定. 正交試驗法優化長春花分化培養基[J]. 天然產物研究與開發，1993，5（3）：34-37.

[3]黃 勇，郭善利，錢關澤，等. 長春花的組織培養與快速繁殖[J]. 植物生理學通訊，2000，36（1）：39.

[4]郭勝娟. 長春花細胞培養與快速繁殖的初步研究[D]. 武漢：華中農業大學，2004.

[5]王少先，李普安，喬明亮. 蔬菜作物花粉生物學特性的研究——Ⅰ：絲瓜花粉的萌發特性[J]. 洛陽農專學報，1995，2（1）：22-27.

[6]史桂榮. 玉米花粉生活力的研究[J]. 黑龍江農業科學，1996（2）：13-15.

[7]王慶美，郗光輝，王大箴，等. 甘薯花粉離體萌發及不同保存方法對其生活力的影響[J]. 萊陽農學院學報，1996，13（3）：28-31.

[8]程 偉，趙志剛，郭俊杰，等. 西南樺花粉低溫貯藏試驗初報[J]. 浙江林業科技，2007，27（6）：49-52.

[9]楊傳友，畢 杰，楊先棟. 十二種果樹花粉貯藏試驗[J]. 果樹科學，1994，11（2）：103-104.

[10]Lwanami Y. Storage in an organic solvent as a mean for preserving viability pollen grain[J]. Stain Technology，1972，47（4）：137-139.

[11]趙樹仁，武麗英，姚民昌，等. 番茄花粉超低溫保存的研究[J]. 園藝學報，1993，20（1）：66-70.

摘要：采用離體培養法，研究不同開花時間和不同貯藏方式對長春花花粉萌發率的影響。結果表明：不同開花時間的長春花花粉都保持較高的可育率，其離體培養萌發率保持在90%以上；常溫貯藏、5 ℃低溫貯藏和5 ℃低溫干燥貯藏3種方式間的花粉萌發率差異顯著，短時間保存宜選用5 ℃低溫貯藏，長時間保存宜選用5 ℃低溫干燥貯藏。

關鍵詞：長春花；貯藏；花粉；活力

中圖分類號：S682.01 文獻標志碼：A

文章編號：1002-1302（2014）08-0172-02

長春花（Catharanthus roseus G. Don.）為夾竹桃科（Apocynaceae）長春花屬（Catharanthus）多年生草本植物，原產于南非、東部非洲及美洲熱帶，常綠直立亞灌木或多年生草本，株高30～60 cm，幼枝綠色或紅褐色，全株無毛，莖直立，多分枝，葉對生。植物花粉生命力及其貯藏特性是開花生物學特性研究中的一項重要內容，在常規育種特別是人工輔助授粉或雜交授粉時，需要早期采集和貯藏花粉。自Hirata證實長春花具有較強生物堿研究以來^[1]，國內外學者開始關注長春花，尤其是對長春花生物堿進行了大量的研究，此外，關于長春花的組織培養，國內外研究者也開展了大量工作^[1-4]。對于長春花花粉貯藏技術方面的研究目前尚未系統報道。通過研究本地長春花品系白長春花（C. roseus cv. albus）、黃長春花（C. roseus cv. flavus）和進口長春花品系的農藝性狀及其花粉在自然條件下衰敗和花粉貯藏技術，為解決長春花遠距離雜交、解決花期不遇問題奠定理論基礎，同時為進行長春花雜交制種、新品系的培育提供技術支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗長春花品系及其農藝性狀調查

參試長春花品系如表1所見。2012年7月調查各品系的農藝性狀，包括株高、花徑、株幅、花朵數及花色，利用SAS 8.0對不同品系各性狀進行Duncans檢驗。

1.2 花粉活力測定

1.2.1 測定方法 將試驗用培養皿洗凈晾干，和配制好的培養基一起消毒；消毒完成后，將培養基倒入培養皿，培養基盡量薄而均勻；自然冷卻后，用棉花棒蘸上花粉，輕彈到培養基上，通過顯微鏡觀察花粉的萌發情況，統計花粉萌發率來衡量花粉品質及活力。花粉萌發率計算公式：花粉萌發率=目鏡視野中萌發花粉粒數/目鏡視野中花粉粒總數×100%。所有操作均在超凈工作臺上完成。

1.2.2 試驗內容 （1）長春花不同開花時間花粉活力變化：采集本地長春花開花第1天至第7天的花朵，收集新鮮花粉進行離體培養，檢測花粉活力。每種花粉5個培養皿，每培養皿取3個視野進行觀察，每隔1 h進行1次花粉活力測定，直至觀察6 h，統計萌發率。（2）不同貯藏方式對長春花花粉活力的影響：分別將常溫貯藏、5 ℃低溫貯藏和5 ℃低溫干燥貯藏的花粉各1份，每天進行離體培養，直至第15天，每種花粉5個培養皿，每培養皿取3個視野進行觀察，統計萌發率。

2 結果與分析

2.1 不同長春花品系農藝特性調查

由表2、表3可見，除冠幅外，參試不同長春花品系的農藝性狀之間均存在很大差異；花色種類繁多，以紅色為主；各品種的株高分布在18.38～25.12 cm之間，這與本地長春花株高差異非常大；最矮的是6號品系（Pacifica Orchid Deep），株高均值為18.38 cm，最大株高的為3號品系（Cora Punch），其株高均值為25.12 cm；不同品系間冠幅差異不顯著，其單株間存在一定差異，可能與個體的營養生長環境有關；不同品系間花徑差異極顯著，最小花徑為2號品系，為4.04 cm，最大花徑為4號品系， 達到5.20 cm；不同品系間花朵數差異也很大，從8.3朵到15.9朵，花朵數最多的為11號品系。

2.2 長春花不同開花時間花粉活力的變化

由圖1可見，長春花不同開花時間的花粉活力都保持在較高的水平，花粉萌發率第1天就達到最高，為99.82%，到第7天花瓣即將脫落，花粉萌發率仍保持在95%以上，不同時間花粉萌發率差異不明顯。這說明長春花從開始開花到落花，其花粉活力都保持在一個較高的水平，有較高的可育率，隨時可以收集花粉進行雜交授粉。

2.3 不同貯藏方式對長春花粉活力的影響

由圖2可見，常溫貯藏下，花粉活力隨貯藏時間的增加呈明顯下降趨勢，貯藏15 d后，花粉萌發率僅為7.56%，且花粉管明顯縮短；5 ℃低溫貯藏的花粉活力一直保持在較高水平，貯藏半個月后，其花粉活力仍達到80%以上；5 ℃低溫干燥處理4 d后的花粉，其花粉萌發率保持在50%左右，不同處理間差異較大，變化范圍在30%～70%之間，隨著貯藏時間延長，其活力變化不大。

3 小結

對15個進口長春花品系的農藝特性進行調查，結果表明，除了冠幅外，不同品種的農藝性狀之間均存在很大差異，尤其是不同品系花朵數差異顯著；花色種類繁多，以紅色為主。對長春花不同開花時間的花粉進行活力進行檢測，結果表明，長春花不同開花時間的花粉都保持較高的可育率，其花粉離體培養萌發率保持在90%以上。對不同貯藏方式的長春花花粉活力進行研究，結果表明，常溫貯藏、5 ℃低溫貯藏和5 ℃低溫干燥貯藏3種貯藏方式間花粉萌發率差異顯著，短時間保存宜選用5 ℃低溫貯藏，長時間進行長春花花粉保存，宜選用5 ℃低溫干燥貯藏。長春花干燥處理后導致花粉活力大大降低，這可能是由于長春花花粉活力對水分的要求相對較高所導致，這與絲瓜、玉米、甘薯等花粉離體萌發的研究結果^[5-7]一致，高濕度是許多植物花粉活力降低的重要因素^[7]。

低溫冷凍貯藏的溫度大概在-20～-15 ℃。一般來說，花粉冷凍貯藏比冷藏效果好，如西南樺花粉在-20 ℃下干燥貯藏效果最佳^[8]；楊傳友等發現12種果樹14個品種的花粉在冷凍室的貯藏效果比冷藏室好，花粉萌發率可提高7.5%～27.2%^[9]。超低溫（-80 ℃）能最大限度地抑制生理代謝強度，Knowlton第1次報道了-180 ℃貯存后的金魚草（Antrirrhinum majus）花粉仍具有生活力，降低花粉含水量能夠提高冰凍保存的生存率^[10]，目前已經進行了30多種植物花粉的超低溫保存研究^[11]。對長春花花粉進行冷凍低溫貯藏（-5 ℃）和超低溫（-80 ℃）貯藏，結果表明，0 ℃以下低溫不利于常規處理花粉的保存，冷凍貯藏1 h即喪失活力，而對于干燥真空貯藏的花粉則能起到延長保存時間的作用。

參考文獻：

[1]Hirata K，Yamanaka A，Kurano N，et al. Production of indole alkaloids in multiple shoot culture of Catharanthus roseus（L）G. Don.[J]. Agricultural and Biological Chemistry，1987，51（5）：1311-1317.

[2]楊玉敏，元英進，胡宗定. 正交試驗法優化長春花分化培養基[J]. 天然產物研究與開發，1993，5（3）：34-37.

[3]黃 勇，郭善利，錢關澤，等. 長春花的組織培養與快速繁殖[J]. 植物生理學通訊，2000，36（1）：39.

[4]郭勝娟. 長春花細胞培養與快速繁殖的初步研究[D]. 武漢：華中農業大學，2004.

[5]王少先，李普安，喬明亮. 蔬菜作物花粉生物學特性的研究——Ⅰ：絲瓜花粉的萌發特性[J]. 洛陽農專學報，1995，2（1）：22-27.

[6]史桂榮. 玉米花粉生活力的研究[J]. 黑龍江農業科學，1996（2）：13-15.

[7]王慶美，郗光輝，王大箴，等. 甘薯花粉離體萌發及不同保存方法對其生活力的影響[J]. 萊陽農學院學報，1996，13（3）：28-31.

[8]程 偉，趙志剛，郭俊杰，等. 西南樺花粉低溫貯藏試驗初報[J]. 浙江林業科技，2007，27（6）：49-52.

[9]楊傳友，畢 杰，楊先棟. 十二種果樹花粉貯藏試驗[J]. 果樹科學，1994，11（2）：103-104.

[10]Lwanami Y. Storage in an organic solvent as a mean for preserving viability pollen grain[J]. Stain Technology，1972，47（4）：137-139.

[11]趙樹仁，武麗英，姚民昌，等. 番茄花粉超低溫保存的研究[J]. 園藝學報，1993，20（1）：66-70.