胎盤蛋白13檢測在子癇前期患者妊娠中晚期血清中的變化分析

汪瓊華　顏瑜

【摘要】 目的：研究探討妊娠子癇前期患者血清中的胎盤蛋白13（PP13）含量與孕婦妊娠孕周長短的變化關系。方法：回顧性分析本院收治的44例子癇前期患者的臨床資料。將其分為輕度子癇前期組16例和重度子癇前期組28例；另外選擇30例正常健康孕婦設為對照組。采用ELISA檢測方法測定孕婦在不同孕周時血清中的PP13的含量。結果：輕、重度子癇前期組血清中PP13的含量均顯著高于正常孕婦組（P<0.05）；且重度子癇前期組顯著高于輕度子癇前期組（P<0.05）；各組妊娠晚期血清中PP13的含量顯著高于妊娠中期（P<0.05）；相對于妊娠中期，子癇前期組妊娠晚期孕婦血清中PP13含量的增加值顯著高于正常孕婦組（P<0.05）。結論：重度子癇前期孕婦血清中的PP13的含量高于輕度子癇前期孕婦，子癇前期患者血清中的PP13的含量高于正常孕婦，隨著妊娠時間的延長，孕婦血清內PP13的含量有所增高。

【關鍵詞】 胎盤蛋白13； 子癇前期孕婦； 妊娠中晚期

子癇前期在婦產科臨床上一種較為多見的妊娠并發病癥，一般出現在孕婦妊娠20周以后，主要的臨床表現為患者出血蛋白尿、高血壓以及水腫等，同時伴有全身不同程度的損傷，嚴重患者甚至可能出現心力衰竭，抽搐，彌漫性血管內凝血以及胎盤早剝等嚴重并發癥。隨著醫學的快速發展，已經有越來越多的研究表明，胎盤血管重鑄發生障礙以及滋養細胞浸潤不足是子癇前期病情發展的關鍵環

節[1]。而近年的醫學研究表明，胎盤蛋白13（placental protein 13，PP13）對于胎盤內血管的重鑄形成以及滋養細胞的浸潤起到重要的調節作用[2]。因此，本研究對本院收治的44例子癇前期患者的臨床資料進行回顧性分析，探討妊娠子癇前期患者血清中的胎盤蛋白13含量與孕婦妊娠孕周長短的變化關系，為進一步認識子癇前期的發病規律提供實驗參考?，F將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2010年12月-2012年12月本院收治的44例子癇前期患者，其中輕度子癇前期患者16例，重度子癇前期患者28例，同時選取30例正常健康孕婦進行對照?；颊吣挲g22.3～36.8歲，平均（27.65±4.17）歲。其中29例患者為首次妊娠患者，15例患者為二次妊娠患者。三組研究對象的年齡、孕周等一般資料比較差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。所有研究對象均無慢性高血壓、近期感染、心臟病、糖尿病以及腎臟病史[3]。

1.2 方法 對所有孕婦在不同孕周采用ELISA檢測方法測定孕婦血清中的胎盤蛋白13（PP13）的含量，比較不同孕周的子癇前期患者以及正常妊娠孕婦的胎盤蛋白含量的變化。

1.3 研究對象血清胎盤蛋白13樣品的收集與測定 分別于試驗設計的時間點（妊娠中晚期）對患者進行靜脈采血3 mL，血液收集于管中，放置3 h后于3000轉/min的條件下離心15 min，取上清液。血清樣品在-80 ℃下保存。采用ELISA試劑盒測定，酶標儀在450 nm條件下測定吸光度[4]。具體測定方法：首先將ELISA試劑盒在室溫中（22～25 ℃）放置半個小時，讓其平衡。打開試劑盒從中取出固相載體反應板。將上述實驗所需各種工作液在規定時間內配制好。在相對應的固相載體反應板的孔中加入100 ?L標準品以及100 ?L待測樣品溶液。將酶標板封閉上蓋，在37 ℃的環境中孵育90 min。待抗原抗體特異性結合反應完畢后，使用自動洗板機將酶標板中的液體吸收出去。

在反應板的每個孔中加入100 ?L事先配制好的已被生物素標記的胎盤蛋白13抗體工作液。封閉酶標板，在37 ℃的環境中孵育1 h。使用實現配制好的PBS洗滌液對酶標板各個孔洗滌3次，每次加入PBS洗滌液需浸泡30 s。在反應板的每個孔中加入100 ?L事先配制好的已和過氧化物酶結合的親和素溶液。封閉酶標板，在37 ℃的環境中孵育半個小時。使用實現配制好的PBS洗滌液對酶標板各個孔洗滌5次，每次加入PBS洗滌液需浸泡1 min。

將顯色劑四甲基聯苯胺（TMB）加入酶標板的各個孔中，每孔90 ?L，讓反應體系在37 ℃的環境中反應15 min。顯色劑四甲基聯苯胺（TMB）加入之前要在37 ℃的環境中實現平衡半個小時。最后加入100 ?L顯色劑四甲基聯苯胺（TMB）終止液。

按照上述步驟測定標準曲線上各個濃度的標準品的OD值，用以繪制標準曲線。標準品的濃度為縱坐標，各個濃度的標準品的OD值為橫坐標。再在450 nm處測定待測樣品的OD值，然后根據標準曲線得出相應的待測樣品MMP-3的濃度。

1.4 統計學處理 采用SPSS 17.0統計學軟件對數據進行處理，計量資料以（x±s）表示，比較采用t檢驗，計數資料采用 字2檢驗進行分析，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組妊娠期胎盤蛋白13含量的比較 正常孕婦組血清中胎盤蛋白13的含量為（62.24±16.81）pg/mL，輕度子癇前期組（137.92±23.46）pg/mL，重度子癇前期組為（186.74±29.82）pg/mL。輕、重度子癇前期組血清中胎盤蛋白13的含量顯著高于正常孕婦組，差異有統計學意義（P<0.05）；且重度子癇前期組高于輕度子癇前期組，差異有統計學意義（P<0.05）。

2.2 同組內妊娠中晚期血清中胎盤蛋白13含量的比較 同組內妊娠晚期血清中胎盤蛋白13的含量顯著高于妊娠中期，差異有統計學意義（P<0.05）；相對于妊娠中期，子癇前期組妊娠晚期孕婦血清中胎盤蛋白13含量的增加值顯著高于正常孕婦組（P<0.05），見表1。

表1 同組內妊娠中晚期血清中胎盤蛋白13含量的

比較（x±s） pg/mL

組別 孕28～32周 孕33～36周 P值endprint

正常孕婦組（n=30） 57.61±2.47 75.32±4.82 <0.05

輕度子癇前期組（n=16） 136.57±12.92 162.35±21.22 <0.05

重度子癇前期組（n=28） 153.33±17.62 191.14±26.53 <0.05

3 討論

近年來，子癇前期成為了導致圍產兒死亡，孕婦不良預后的臨床高危因素之一[5]。因此，子癇前期是婦產科病理學研究的重點研究內容[6-7]。目前，醫學研究人員還無法完全清楚的闡釋子癇前期的發病機制與確切的病因，關于子癇前期發病機制目前學術界比較認同的幾種觀點有，遺傳學說、免疫機制、異常滋養細胞侵入肌肉層、血管內皮細胞受到損傷等等[8-9]。

胎盤蛋白13的主要生物學功能包括以下幾點：（1）糖結合活性：有研究表明胎盤蛋白13和多種糖類的結合性較好，因此胎盤蛋白可以較為有力的凝集血紅細胞。（2）磷酸化：胎盤蛋白13可以磷酸化，其磷酸化生物學過程可能與酪氨酸激酶有關。（3）溶血磷脂酶活性，胎盤蛋白13的該性質的具體生物學作用尚未明確，可能參與了種植，維持孕婦妊娠。（4）與β/γ肌動蛋白以及膜聯蛋白相結合：目前認為膜聯蛋白在成熟微絨毛以及胎盤分化的過程中起到了一定的作用[10]。

對于胎盤蛋白13在子癇前期患者血清中含量的變化，可能是由于子癇前期患者孕中期胎盤蛋白13的mRNA水平的下降，以及子癇前期中滋養層的細胞壞死，刷狀緣膜顯著減少。目前醫學研究工作者普遍認為，胎盤蛋白13在胎兒發育過程中的幾個方面都發揮了作用。有研究表明，胎盤蛋白13可以誘發鈣離子介導的去極化過程，從而引起滋養層膜釋放花生四烯酸以及亞油酸，以此作為底物加速前列環素以及血栓素的合成。子癇前期患者血清中的胎盤蛋白13提取物對于脂肪酸、促凝血素以及前列腺素的促進釋放作用并不明顯，從而引起胎盤中舒血管因子和縮血管因子的比例改變，最終導致胎盤病理的出現[11-12]。

本研究結果表明，重度子癇前期孕婦血清中的胎盤蛋白13的含量高于輕度子癇前期孕婦，子癇前期患者血清中的胎盤蛋白13的含量高于正常孕婦血清中蛋白13含量，隨著妊娠時間的延長，孕婦血清內胎盤蛋白13的含量有所增高。

綜上所述，孕婦血清中胎盤蛋白13的含量是隨著孕周的增加而上升的，這與國外的研究結果保持一致。這也從另一個角度說明隨著胎盤面積的不斷增大，滋養細胞的凋亡數量也隨著孕婦孕周時長增加而不斷上升，滋養細胞由于不斷的增殖和凋亡，周而復始，使得組織結構得以重鑄，功能得到完善，妊娠可以正常的繼續進行。同時本研究結果也說明了，胎盤蛋白13的異常表達，是造成孕婦子癇前期的重要關鍵因素。其在促進血管生成以及滋養細胞浸潤的進程起著關鍵的作用。

參考文獻

[1]王瑜，張曦，程國梅，等.子癇前期患者胎盤組織中轉化生長因子β1，血管細胞黏附分子1及E選擇素表達的研究[J].中華婦產科雜志，2006，41（8）：514-517.

[2] Than N，Abdul Rahman O，Magenheim R，et al.Plaeental protein 13 （galeetin-13） has deereased plaeental expression but inereased shedding and maternal serum concentrations in Patients presenting with preterm preeclampsia and HELLP syndrome[J].Virehows Arch，2008，453（4）：387-400.

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[8]徐佳，馬向東.胎盤蛋白13與妊娠相關疾病[J].中國婦幼健康研究，2011，22（1）：105-107.

[9]曾小燕，顏建英.胎盤蛋白13與子癇前期發病的研究進展[J].醫學綜述，2010，16（7）：997-999.

[10]王晨虹，涂新枝，周璐，等.孕婦血清胎盤蛋白 13 水平變化對早發型重度子癇前期的預測價值[J].實用婦產科雜志，2010，26（10）：781-783.

[11]吳星光，胡璇，劉增佑，等.子癇前期患者妊娠早晚期血清胎盤蛋白13變化的研究[J].血栓與止血學，2013，19（4）：164-166.

[12]徐佳，馬向東.胎盤蛋白13與妊娠相關疾病[J].中國婦幼健康研究，2011，22（1）：105-107.

（收稿日期：2014-03-30） （本文編輯：蔡元元）endprint

正常孕婦組（n=30） 57.61±2.47 75.32±4.82 <0.05

輕度子癇前期組（n=16） 136.57±12.92 162.35±21.22 <0.05

重度子癇前期組（n=28） 153.33±17.62 191.14±26.53 <0.05

3 討論

近年來，子癇前期成為了導致圍產兒死亡，孕婦不良預后的臨床高危因素之一[5]。因此，子癇前期是婦產科病理學研究的重點研究內容[6-7]。目前，醫學研究人員還無法完全清楚的闡釋子癇前期的發病機制與確切的病因，關于子癇前期發病機制目前學術界比較認同的幾種觀點有，遺傳學說、免疫機制、異常滋養細胞侵入肌肉層、血管內皮細胞受到損傷等等[8-9]。

胎盤蛋白13的主要生物學功能包括以下幾點：（1）糖結合活性：有研究表明胎盤蛋白13和多種糖類的結合性較好，因此胎盤蛋白可以較為有力的凝集血紅細胞。（2）磷酸化：胎盤蛋白13可以磷酸化，其磷酸化生物學過程可能與酪氨酸激酶有關。（3）溶血磷脂酶活性，胎盤蛋白13的該性質的具體生物學作用尚未明確，可能參與了種植，維持孕婦妊娠。（4）與β/γ肌動蛋白以及膜聯蛋白相結合：目前認為膜聯蛋白在成熟微絨毛以及胎盤分化的過程中起到了一定的作用[10]。

對于胎盤蛋白13在子癇前期患者血清中含量的變化，可能是由于子癇前期患者孕中期胎盤蛋白13的mRNA水平的下降，以及子癇前期中滋養層的細胞壞死，刷狀緣膜顯著減少。目前醫學研究工作者普遍認為，胎盤蛋白13在胎兒發育過程中的幾個方面都發揮了作用。有研究表明，胎盤蛋白13可以誘發鈣離子介導的去極化過程，從而引起滋養層膜釋放花生四烯酸以及亞油酸，以此作為底物加速前列環素以及血栓素的合成。子癇前期患者血清中的胎盤蛋白13提取物對于脂肪酸、促凝血素以及前列腺素的促進釋放作用并不明顯，從而引起胎盤中舒血管因子和縮血管因子的比例改變，最終導致胎盤病理的出現[11-12]。

本研究結果表明，重度子癇前期孕婦血清中的胎盤蛋白13的含量高于輕度子癇前期孕婦，子癇前期患者血清中的胎盤蛋白13的含量高于正常孕婦血清中蛋白13含量，隨著妊娠時間的延長，孕婦血清內胎盤蛋白13的含量有所增高。

綜上所述，孕婦血清中胎盤蛋白13的含量是隨著孕周的增加而上升的，這與國外的研究結果保持一致。這也從另一個角度說明隨著胎盤面積的不斷增大，滋養細胞的凋亡數量也隨著孕婦孕周時長增加而不斷上升，滋養細胞由于不斷的增殖和凋亡，周而復始，使得組織結構得以重鑄，功能得到完善，妊娠可以正常的繼續進行。同時本研究結果也說明了，胎盤蛋白13的異常表達，是造成孕婦子癇前期的重要關鍵因素。其在促進血管生成以及滋養細胞浸潤的進程起著關鍵的作用。

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[11]吳星光，胡璇，劉增佑，等.子癇前期患者妊娠早晚期血清胎盤蛋白13變化的研究[J].血栓與止血學，2013，19（4）：164-166.

[12]徐佳，馬向東.胎盤蛋白13與妊娠相關疾病[J].中國婦幼健康研究，2011，22（1）：105-107.

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正常孕婦組（n=30） 57.61±2.47 75.32±4.82 <0.05

輕度子癇前期組（n=16） 136.57±12.92 162.35±21.22 <0.05

重度子癇前期組（n=28） 153.33±17.62 191.14±26.53 <0.05

3 討論

近年來，子癇前期成為了導致圍產兒死亡，孕婦不良預后的臨床高危因素之一[5]。因此，子癇前期是婦產科病理學研究的重點研究內容[6-7]。目前，醫學研究人員還無法完全清楚的闡釋子癇前期的發病機制與確切的病因，關于子癇前期發病機制目前學術界比較認同的幾種觀點有，遺傳學說、免疫機制、異常滋養細胞侵入肌肉層、血管內皮細胞受到損傷等等[8-9]。

胎盤蛋白13的主要生物學功能包括以下幾點：（1）糖結合活性：有研究表明胎盤蛋白13和多種糖類的結合性較好，因此胎盤蛋白可以較為有力的凝集血紅細胞。（2）磷酸化：胎盤蛋白13可以磷酸化，其磷酸化生物學過程可能與酪氨酸激酶有關。（3）溶血磷脂酶活性，胎盤蛋白13的該性質的具體生物學作用尚未明確，可能參與了種植，維持孕婦妊娠。（4）與β/γ肌動蛋白以及膜聯蛋白相結合：目前認為膜聯蛋白在成熟微絨毛以及胎盤分化的過程中起到了一定的作用[10]。

對于胎盤蛋白13在子癇前期患者血清中含量的變化，可能是由于子癇前期患者孕中期胎盤蛋白13的mRNA水平的下降，以及子癇前期中滋養層的細胞壞死，刷狀緣膜顯著減少。目前醫學研究工作者普遍認為，胎盤蛋白13在胎兒發育過程中的幾個方面都發揮了作用。有研究表明，胎盤蛋白13可以誘發鈣離子介導的去極化過程，從而引起滋養層膜釋放花生四烯酸以及亞油酸，以此作為底物加速前列環素以及血栓素的合成。子癇前期患者血清中的胎盤蛋白13提取物對于脂肪酸、促凝血素以及前列腺素的促進釋放作用并不明顯，從而引起胎盤中舒血管因子和縮血管因子的比例改變，最終導致胎盤病理的出現[11-12]。

本研究結果表明，重度子癇前期孕婦血清中的胎盤蛋白13的含量高于輕度子癇前期孕婦，子癇前期患者血清中的胎盤蛋白13的含量高于正常孕婦血清中蛋白13含量，隨著妊娠時間的延長，孕婦血清內胎盤蛋白13的含量有所增高。

綜上所述，孕婦血清中胎盤蛋白13的含量是隨著孕周的增加而上升的，這與國外的研究結果保持一致。這也從另一個角度說明隨著胎盤面積的不斷增大，滋養細胞的凋亡數量也隨著孕婦孕周時長增加而不斷上升，滋養細胞由于不斷的增殖和凋亡，周而復始，使得組織結構得以重鑄，功能得到完善，妊娠可以正常的繼續進行。同時本研究結果也說明了，胎盤蛋白13的異常表達，是造成孕婦子癇前期的重要關鍵因素。其在促進血管生成以及滋養細胞浸潤的進程起著關鍵的作用。

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[7]孫媛，陳麗君.胎盤蛋白13和glycodelin在子癇前期患者血清中的表達[J].山東大學學報：醫學版，2010，48（4）：130-132.

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[10]王晨虹，涂新枝，周璐，等.孕婦血清胎盤蛋白 13 水平變化對早發型重度子癇前期的預測價值[J].實用婦產科雜志，2010，26（10）：781-783.

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[12]徐佳，馬向東.胎盤蛋白13與妊娠相關疾病[J].中國婦幼健康研究，2011，22（1）：105-107.

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