天麻通心腦方對垂體后葉素致大鼠急性心肌缺血的保護作用

熊金富　陳清華　彭磊等

摘要：目的觀察天麻通心腦方對急性心肌缺血大鼠的保護作用。方法大鼠陰莖背靜脈注射垂體后葉素（Pit）誘發大鼠急性心肌缺血，監測大鼠在心肌缺血各時間點內標準Ⅱ導聯心電圖ST段（J點）偏移情況，檢測心肌缺血模型大鼠血清CK、LDH、SOD、MDA水平。結果天麻通心腦方各劑量組對Pit致急性心肌缺血大鼠各時間點ST段（J）點偏移有明顯的抑制作用；各劑量組能明顯降低大鼠血清CK、LDH、MDA水平，增強SOD活性，差異具有顯著性（P<0.05或P<0.01）。結論天麻通心腦方具有良好的抗心肌缺血的作用，其作用機制可能與拮抗血管加壓素，競爭性結合V1、V2受體和抗過氧化脂質有關。

關鍵詞：天麻通心腦方；心肌缺血；保護作用

中圖分類號：R965文獻標志碼：A文章編號：1007-2349（2014）05-0075-03

近年來，隨著人們生活節奏的加快和生活方式的轉變，全世界冠心病發病率逐年增高，并且呈低齡化趨勢，40歲以下人群患冠心病的風險逐年遞增。有資料顯示：預計到2020年，心血管疾病將超過感染性疾病成為人類致死和致殘的首要原因[1]。心肌缺血有發生心肌梗塞和猝死的危險，因此早發現、早診斷、早治療以及預防性用藥就成為防治冠心病改善預后降低死亡率的關鍵。

天麻通心腦方是鄭進教授治療心腦血管疾病的常用方劑，具有益氣活血，通絡止痛之功效。通過對60例心肌缺血、心絞痛患者的初步臨床觀察，結果顯示天麻通心腦方抗心肌缺血總有效率為84%。本方采用民族藥與中藥配伍，極具民族醫學特色，組方合理，臨床療效確切，具有良好的開發應用前景。

1材料與方法

1.1實驗動物SD雄性大鼠，SPF級，體重（180±20）g，購自成都達碩實驗動物有限公司，合格證號：0017193。

1.2藥品和試劑天麻通心腦方（由云南省高校民族藥現代研究重點實驗室制備）；CK試劑盒（南京建成生物工程制藥所，批號：20131209）；LDH試劑盒（南京建成生物工程制藥所，批號：20131209）；SOD試劑盒（南京建成生物工程制藥所，批號：20131209）；MDA試劑盒（南京建成生物工程制藥所，批號：20131209）；垂體后葉素注射液（上海第一生化制藥有限公司，批號：130302）；單硝酸異山梨酯片（魯南貝特制藥有限公司，批號：07120332）。

1.3儀器ML191型PowerLab生物信號儀（ADInstruments公司），Infinite M200 酶標儀（Tecan公司）。

2實驗方法

2.1分組及給藥健康雄性SD大鼠48只，隨機分成6組：正常對照組，模型組，陽性對照組，天麻通心腦方低劑量組（1.53 g /kg）、中劑量組（3.06 g /kg）、高劑量組（6.12 g/ kg）。正常對照組及模型組給予等體積蒸餾水，陽性對照組給予單硝酸異山梨酯片（消心痛）1.08 mg/kg，灌胃體積10 mL/kg，各組分別連續灌胃給藥10 d。

2.2造模方法大鼠末次給藥90 min后，10%水合氯醛0.3 mL/100 g腹腔注射麻醉（麻醉前禁食12 h），仰臥位固定于大鼠解剖臺上，正常對照組大鼠陰莖背靜脈注射生理鹽水，其余組別大鼠陰莖背靜脈注射Pit0.6U/kg復制大鼠急性心肌缺血模型。大鼠注射Pit后，ECG表現為J點或S-T段抬高或壓低0.1mv以上，T波先高聳后低平、雙相或倒置，P-R間期延長，心率降低為造模成功標志。

2.3檢測指標連續觀察并描計給予Pit后15、30 s、1、3、5、10、15 min大鼠標準Ⅱ導聯心電圖的變化情況。若大鼠ST 段不明顯，則可觀察各時間點J點位移變化。J點位移測量以P- R段為基線，每個時間點測5個連續的波形，取其平均值。大鼠心電圖記錄完畢后，腹主動脈取5 mL血液左右，靜置40 min左右，3000 r/min低速離心15 min，取上清液制備血清標本，-20℃凍存，檢測大鼠血清MDA含量及SOD、CK、LDH活性。

3結果

3.1對急性心肌缺血大鼠心電圖的影響結果見表1。正常對照組與模型組比較各時間點J點位移具有顯著性差異（P<0.01），提示造模成功。天麻通心腦方各劑量組與模型組比較，在心肌缺血后各時間段J點位移與模型組有顯著性差異（P<0.05或P<0.01）。提示天麻通心腦方能明顯改善心肌缺血大鼠心電圖的異常改變。

4討論

垂體后葉素（Pit）中包含兩種主要激素：催產素和血管加壓素。血管加壓素通過特定的加壓素受體發揮其縮血管效應。其受體類型主要包括V1和V2受體[2]。V1受體又可分為V1a和V1b 兩種亞型。V1a受體主要分布于血管平滑肌，該受體興奮主要導致血管收縮，可引起冠狀動脈痙攣，增大血管外周阻力，增加心臟后負荷，導致心肌供血不足及心肌損傷，出現異常心電圖改變，主要反映在S-T段、T波異常及心率變化。V1b 受體主要分布于腎集合小管，該受體興奮與水的重吸收有關。

當心肌收縮時，由于冠狀動脈受到壓迫，灌注冠狀動脈的血流被暫時阻斷。心肌舒張時，血流進入冠狀動脈，為冠狀動脈供應所需血液和氧氣。當冠狀動脈發生狹窄時，冠狀動脈灌注量明顯下降，冠脈血流的攜氧能力也隨之明顯下降，而此時心肌耗氧能力代償性的增強，患者表現出相應的缺血缺氧癥狀。有研究表明，當人體處于缺血缺氧時，機體各個器官組織細胞內鈣離子均會濃度升高，嚴重時還會引發鈣超載，導致細胞死亡[3]。

此外，心肌缺血缺氧會產生大量的氧自由基，破壞生物膜的完整性，缺血損傷心肌細胞內的CK、LDH釋放到血液中，致使血液中的CK、LDH活性增高。由于機體的自我保護，短時間的缺血缺氧心肌組織會進入“心肌頓抑”的緩沖機制。在此狀態下，心肌細胞結構、功能和代謝發生了改變，但尚不足以造成心肌壞死，而且這個病理過程并非不可逆，實際上為治療心肌缺血提供了一段寶貴的時間，因此盡早恢復心肌供血供氧是關鍵。氧自由基主要經線粒體的氧化磷酸化途徑產生，并且在超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽過氧化物酶（Glutathione peroxidase，GSH-Px）的作用下分解為氧分子和水。SOD活性增強能夠清除體內過多的氧自由基，產生大量的氧分子，從而增加血液中的氧分子含量，緩解缺氧癥狀，明顯減緩“心肌頓抑”[4]。這也從側面說明，改善缺血缺氧狀態，對于治療冠心病心肌缺血、心絞痛，提高患者的存活率有著積極意義。

天麻通心腦方各劑量組能明顯改善急性心肌缺血大鼠異常心電圖改變，增強大鼠血清SOD活性，降低過氧化脂質代謝產物MDA及血清CK、LDH的含量。表明該方有較強的抗缺氧和過氧化脂質作用，減輕心肌損傷程度，能有效改善心肌缺血、心絞痛患者缺血缺氧狀態，從而提高患者存活率。其作用機制可能與拮抗血管加壓素，競爭性結合V1、V2受體和抗過氧化脂質有關。參考文獻：

[1]Daniel G，Hackam，Sonia S，et al.FRCP 新的動脈粥樣硬化性血管疾病危險因素重要證回顧[J].美國醫學會雜志中文版，2004，23（5）：245.

[2]白波，高明燦.生理學[M].北京：人民衛生出版社，2013：81.

[3]郭靜，蒲詠梅，張東才.鈣離子信號與細胞凋亡[J].生物物理學報，2005，21（1）：1-17.

[4]林榮，郭繼鴻.心血管疾病的現代觀點[M]，北京：北京大學醫學出版社，2005：59-60.endprint

摘要：目的觀察天麻通心腦方對急性心肌缺血大鼠的保護作用。方法大鼠陰莖背靜脈注射垂體后葉素（Pit）誘發大鼠急性心肌缺血，監測大鼠在心肌缺血各時間點內標準Ⅱ導聯心電圖ST段（J點）偏移情況，檢測心肌缺血模型大鼠血清CK、LDH、SOD、MDA水平。結果天麻通心腦方各劑量組對Pit致急性心肌缺血大鼠各時間點ST段（J）點偏移有明顯的抑制作用；各劑量組能明顯降低大鼠血清CK、LDH、MDA水平，增強SOD活性，差異具有顯著性（P<0.05或P<0.01）。結論天麻通心腦方具有良好的抗心肌缺血的作用，其作用機制可能與拮抗血管加壓素，競爭性結合V1、V2受體和抗過氧化脂質有關。

關鍵詞：天麻通心腦方；心肌缺血；保護作用

中圖分類號：R965文獻標志碼：A文章編號：1007-2349（2014）05-0075-03

近年來，隨著人們生活節奏的加快和生活方式的轉變，全世界冠心病發病率逐年增高，并且呈低齡化趨勢，40歲以下人群患冠心病的風險逐年遞增。有資料顯示：預計到2020年，心血管疾病將超過感染性疾病成為人類致死和致殘的首要原因[1]。心肌缺血有發生心肌梗塞和猝死的危險，因此早發現、早診斷、早治療以及預防性用藥就成為防治冠心病改善預后降低死亡率的關鍵。

天麻通心腦方是鄭進教授治療心腦血管疾病的常用方劑，具有益氣活血，通絡止痛之功效。通過對60例心肌缺血、心絞痛患者的初步臨床觀察，結果顯示天麻通心腦方抗心肌缺血總有效率為84%。本方采用民族藥與中藥配伍，極具民族醫學特色，組方合理，臨床療效確切，具有良好的開發應用前景。

1材料與方法

1.1實驗動物SD雄性大鼠，SPF級，體重（180±20）g，購自成都達碩實驗動物有限公司，合格證號：0017193。

1.2藥品和試劑天麻通心腦方（由云南省高校民族藥現代研究重點實驗室制備）；CK試劑盒（南京建成生物工程制藥所，批號：20131209）；LDH試劑盒（南京建成生物工程制藥所，批號：20131209）；SOD試劑盒（南京建成生物工程制藥所，批號：20131209）；MDA試劑盒（南京建成生物工程制藥所，批號：20131209）；垂體后葉素注射液（上海第一生化制藥有限公司，批號：130302）；單硝酸異山梨酯片（魯南貝特制藥有限公司，批號：07120332）。

1.3儀器ML191型PowerLab生物信號儀（ADInstruments公司），Infinite M200 酶標儀（Tecan公司）。

2實驗方法

2.1分組及給藥健康雄性SD大鼠48只，隨機分成6組：正常對照組，模型組，陽性對照組，天麻通心腦方低劑量組（1.53 g /kg）、中劑量組（3.06 g /kg）、高劑量組（6.12 g/ kg）。正常對照組及模型組給予等體積蒸餾水，陽性對照組給予單硝酸異山梨酯片（消心痛）1.08 mg/kg，灌胃體積10 mL/kg，各組分別連續灌胃給藥10 d。

2.2造模方法大鼠末次給藥90 min后，10%水合氯醛0.3 mL/100 g腹腔注射麻醉（麻醉前禁食12 h），仰臥位固定于大鼠解剖臺上，正常對照組大鼠陰莖背靜脈注射生理鹽水，其余組別大鼠陰莖背靜脈注射Pit0.6U/kg復制大鼠急性心肌缺血模型。大鼠注射Pit后，ECG表現為J點或S-T段抬高或壓低0.1mv以上，T波先高聳后低平、雙相或倒置，P-R間期延長，心率降低為造模成功標志。

2.3檢測指標連續觀察并描計給予Pit后15、30 s、1、3、5、10、15 min大鼠標準Ⅱ導聯心電圖的變化情況。若大鼠ST 段不明顯，則可觀察各時間點J點位移變化。J點位移測量以P- R段為基線，每個時間點測5個連續的波形，取其平均值。大鼠心電圖記錄完畢后，腹主動脈取5 mL血液左右，靜置40 min左右，3000 r/min低速離心15 min，取上清液制備血清標本，-20℃凍存，檢測大鼠血清MDA含量及SOD、CK、LDH活性。

3結果

3.1對急性心肌缺血大鼠心電圖的影響結果見表1。正常對照組與模型組比較各時間點J點位移具有顯著性差異（P<0.01），提示造模成功。天麻通心腦方各劑量組與模型組比較，在心肌缺血后各時間段J點位移與模型組有顯著性差異（P<0.05或P<0.01）。提示天麻通心腦方能明顯改善心肌缺血大鼠心電圖的異常改變。

4討論

垂體后葉素（Pit）中包含兩種主要激素：催產素和血管加壓素。血管加壓素通過特定的加壓素受體發揮其縮血管效應。其受體類型主要包括V1和V2受體[2]。V1受體又可分為V1a和V1b 兩種亞型。V1a受體主要分布于血管平滑肌，該受體興奮主要導致血管收縮，可引起冠狀動脈痙攣，增大血管外周阻力，增加心臟后負荷，導致心肌供血不足及心肌損傷，出現異常心電圖改變，主要反映在S-T段、T波異常及心率變化。V1b 受體主要分布于腎集合小管，該受體興奮與水的重吸收有關。

當心肌收縮時，由于冠狀動脈受到壓迫，灌注冠狀動脈的血流被暫時阻斷。心肌舒張時，血流進入冠狀動脈，為冠狀動脈供應所需血液和氧氣。當冠狀動脈發生狹窄時，冠狀動脈灌注量明顯下降，冠脈血流的攜氧能力也隨之明顯下降，而此時心肌耗氧能力代償性的增強，患者表現出相應的缺血缺氧癥狀。有研究表明，當人體處于缺血缺氧時，機體各個器官組織細胞內鈣離子均會濃度升高，嚴重時還會引發鈣超載，導致細胞死亡[3]。

此外，心肌缺血缺氧會產生大量的氧自由基，破壞生物膜的完整性，缺血損傷心肌細胞內的CK、LDH釋放到血液中，致使血液中的CK、LDH活性增高。由于機體的自我保護，短時間的缺血缺氧心肌組織會進入“心肌頓抑”的緩沖機制。在此狀態下，心肌細胞結構、功能和代謝發生了改變，但尚不足以造成心肌壞死，而且這個病理過程并非不可逆，實際上為治療心肌缺血提供了一段寶貴的時間，因此盡早恢復心肌供血供氧是關鍵。氧自由基主要經線粒體的氧化磷酸化途徑產生，并且在超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽過氧化物酶（Glutathione peroxidase，GSH-Px）的作用下分解為氧分子和水。SOD活性增強能夠清除體內過多的氧自由基，產生大量的氧分子，從而增加血液中的氧分子含量，緩解缺氧癥狀，明顯減緩“心肌頓抑”[4]。這也從側面說明，改善缺血缺氧狀態，對于治療冠心病心肌缺血、心絞痛，提高患者的存活率有著積極意義。

天麻通心腦方各劑量組能明顯改善急性心肌缺血大鼠異常心電圖改變，增強大鼠血清SOD活性，降低過氧化脂質代謝產物MDA及血清CK、LDH的含量。表明該方有較強的抗缺氧和過氧化脂質作用，減輕心肌損傷程度，能有效改善心肌缺血、心絞痛患者缺血缺氧狀態，從而提高患者存活率。其作用機制可能與拮抗血管加壓素，競爭性結合V1、V2受體和抗過氧化脂質有關。參考文獻：

[1]Daniel G，Hackam，Sonia S，et al.FRCP 新的動脈粥樣硬化性血管疾病危險因素重要證回顧[J].美國醫學會雜志中文版，2004，23（5）：245.

[2]白波，高明燦.生理學[M].北京：人民衛生出版社，2013：81.

[3]郭靜，蒲詠梅，張東才.鈣離子信號與細胞凋亡[J].生物物理學報，2005，21（1）：1-17.

[4]林榮，郭繼鴻.心血管疾病的現代觀點[M]，北京：北京大學醫學出版社，2005：59-60.endprint

摘要：目的觀察天麻通心腦方對急性心肌缺血大鼠的保護作用。方法大鼠陰莖背靜脈注射垂體后葉素（Pit）誘發大鼠急性心肌缺血，監測大鼠在心肌缺血各時間點內標準Ⅱ導聯心電圖ST段（J點）偏移情況，檢測心肌缺血模型大鼠血清CK、LDH、SOD、MDA水平。結果天麻通心腦方各劑量組對Pit致急性心肌缺血大鼠各時間點ST段（J）點偏移有明顯的抑制作用；各劑量組能明顯降低大鼠血清CK、LDH、MDA水平，增強SOD活性，差異具有顯著性（P<0.05或P<0.01）。結論天麻通心腦方具有良好的抗心肌缺血的作用，其作用機制可能與拮抗血管加壓素，競爭性結合V1、V2受體和抗過氧化脂質有關。

關鍵詞：天麻通心腦方；心肌缺血；保護作用

中圖分類號：R965文獻標志碼：A文章編號：1007-2349（2014）05-0075-03

近年來，隨著人們生活節奏的加快和生活方式的轉變，全世界冠心病發病率逐年增高，并且呈低齡化趨勢，40歲以下人群患冠心病的風險逐年遞增。有資料顯示：預計到2020年，心血管疾病將超過感染性疾病成為人類致死和致殘的首要原因[1]。心肌缺血有發生心肌梗塞和猝死的危險，因此早發現、早診斷、早治療以及預防性用藥就成為防治冠心病改善預后降低死亡率的關鍵。

天麻通心腦方是鄭進教授治療心腦血管疾病的常用方劑，具有益氣活血，通絡止痛之功效。通過對60例心肌缺血、心絞痛患者的初步臨床觀察，結果顯示天麻通心腦方抗心肌缺血總有效率為84%。本方采用民族藥與中藥配伍，極具民族醫學特色，組方合理，臨床療效確切，具有良好的開發應用前景。

1材料與方法

1.1實驗動物SD雄性大鼠，SPF級，體重（180±20）g，購自成都達碩實驗動物有限公司，合格證號：0017193。

1.2藥品和試劑天麻通心腦方（由云南省高校民族藥現代研究重點實驗室制備）；CK試劑盒（南京建成生物工程制藥所，批號：20131209）；LDH試劑盒（南京建成生物工程制藥所，批號：20131209）；SOD試劑盒（南京建成生物工程制藥所，批號：20131209）；MDA試劑盒（南京建成生物工程制藥所，批號：20131209）；垂體后葉素注射液（上海第一生化制藥有限公司，批號：130302）；單硝酸異山梨酯片（魯南貝特制藥有限公司，批號：07120332）。

1.3儀器ML191型PowerLab生物信號儀（ADInstruments公司），Infinite M200 酶標儀（Tecan公司）。

2實驗方法

2.1分組及給藥健康雄性SD大鼠48只，隨機分成6組：正常對照組，模型組，陽性對照組，天麻通心腦方低劑量組（1.53 g /kg）、中劑量組（3.06 g /kg）、高劑量組（6.12 g/ kg）。正常對照組及模型組給予等體積蒸餾水，陽性對照組給予單硝酸異山梨酯片（消心痛）1.08 mg/kg，灌胃體積10 mL/kg，各組分別連續灌胃給藥10 d。

2.2造模方法大鼠末次給藥90 min后，10%水合氯醛0.3 mL/100 g腹腔注射麻醉（麻醉前禁食12 h），仰臥位固定于大鼠解剖臺上，正常對照組大鼠陰莖背靜脈注射生理鹽水，其余組別大鼠陰莖背靜脈注射Pit0.6U/kg復制大鼠急性心肌缺血模型。大鼠注射Pit后，ECG表現為J點或S-T段抬高或壓低0.1mv以上，T波先高聳后低平、雙相或倒置，P-R間期延長，心率降低為造模成功標志。

2.3檢測指標連續觀察并描計給予Pit后15、30 s、1、3、5、10、15 min大鼠標準Ⅱ導聯心電圖的變化情況。若大鼠ST 段不明顯，則可觀察各時間點J點位移變化。J點位移測量以P- R段為基線，每個時間點測5個連續的波形，取其平均值。大鼠心電圖記錄完畢后，腹主動脈取5 mL血液左右，靜置40 min左右，3000 r/min低速離心15 min，取上清液制備血清標本，-20℃凍存，檢測大鼠血清MDA含量及SOD、CK、LDH活性。

3結果

3.1對急性心肌缺血大鼠心電圖的影響結果見表1。正常對照組與模型組比較各時間點J點位移具有顯著性差異（P<0.01），提示造模成功。天麻通心腦方各劑量組與模型組比較，在心肌缺血后各時間段J點位移與模型組有顯著性差異（P<0.05或P<0.01）。提示天麻通心腦方能明顯改善心肌缺血大鼠心電圖的異常改變。

4討論

垂體后葉素（Pit）中包含兩種主要激素：催產素和血管加壓素。血管加壓素通過特定的加壓素受體發揮其縮血管效應。其受體類型主要包括V1和V2受體[2]。V1受體又可分為V1a和V1b 兩種亞型。V1a受體主要分布于血管平滑肌，該受體興奮主要導致血管收縮，可引起冠狀動脈痙攣，增大血管外周阻力，增加心臟后負荷，導致心肌供血不足及心肌損傷，出現異常心電圖改變，主要反映在S-T段、T波異常及心率變化。V1b 受體主要分布于腎集合小管，該受體興奮與水的重吸收有關。

當心肌收縮時，由于冠狀動脈受到壓迫，灌注冠狀動脈的血流被暫時阻斷。心肌舒張時，血流進入冠狀動脈，為冠狀動脈供應所需血液和氧氣。當冠狀動脈發生狹窄時，冠狀動脈灌注量明顯下降，冠脈血流的攜氧能力也隨之明顯下降，而此時心肌耗氧能力代償性的增強，患者表現出相應的缺血缺氧癥狀。有研究表明，當人體處于缺血缺氧時，機體各個器官組織細胞內鈣離子均會濃度升高，嚴重時還會引發鈣超載，導致細胞死亡[3]。

此外，心肌缺血缺氧會產生大量的氧自由基，破壞生物膜的完整性，缺血損傷心肌細胞內的CK、LDH釋放到血液中，致使血液中的CK、LDH活性增高。由于機體的自我保護，短時間的缺血缺氧心肌組織會進入“心肌頓抑”的緩沖機制。在此狀態下，心肌細胞結構、功能和代謝發生了改變，但尚不足以造成心肌壞死，而且這個病理過程并非不可逆，實際上為治療心肌缺血提供了一段寶貴的時間，因此盡早恢復心肌供血供氧是關鍵。氧自由基主要經線粒體的氧化磷酸化途徑產生，并且在超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽過氧化物酶（Glutathione peroxidase，GSH-Px）的作用下分解為氧分子和水。SOD活性增強能夠清除體內過多的氧自由基，產生大量的氧分子，從而增加血液中的氧分子含量，緩解缺氧癥狀，明顯減緩“心肌頓抑”[4]。這也從側面說明，改善缺血缺氧狀態，對于治療冠心病心肌缺血、心絞痛，提高患者的存活率有著積極意義。

天麻通心腦方各劑量組能明顯改善急性心肌缺血大鼠異常心電圖改變，增強大鼠血清SOD活性，降低過氧化脂質代謝產物MDA及血清CK、LDH的含量。表明該方有較強的抗缺氧和過氧化脂質作用，減輕心肌損傷程度，能有效改善心肌缺血、心絞痛患者缺血缺氧狀態，從而提高患者存活率。其作用機制可能與拮抗血管加壓素，競爭性結合V1、V2受體和抗過氧化脂質有關。參考文獻：

[1]Daniel G，Hackam，Sonia S，et al.FRCP 新的動脈粥樣硬化性血管疾病危險因素重要證回顧[J].美國醫學會雜志中文版，2004，23（5）：245.

[2]白波，高明燦.生理學[M].北京：人民衛生出版社，2013：81.

[3]郭靜，蒲詠梅，張東才.鈣離子信號與細胞凋亡[J].生物物理學報，2005，21（1）：1-17.

[4]林榮，郭繼鴻.心血管疾病的現代觀點[M]，北京：北京大學醫學出版社，2005：59-60.endprint