建立“二腎一夾”腎性高血壓大鼠(2K1C-RHR)模型的體會

陳俊毅 周平安 張智鋒 王楠楠 陳翱 鄭嘉琪

作者簡介：陳俊毅（1993—），男，漢族，湖南永州人，2011級臨床醫學本科在校生，【摘要】目的：探討建立“二腎一夾”腎性高血壓大鼠（2K1C-RHR）模型制作過程中的經驗體會與技巧。方法：采用銀夾夾閉一側腎動脈造成其狹窄，導致該側腎臟缺血，另一側腎臟不觸及，其血壓升高主要原因是腎臟缺血而造成腎素增多，腎素—血管緊張素系統激活所致。結論：“二腎一夾”高血壓模型具有造模較為便捷有效，成功率高，同一性強等優點，與人類高血壓病理過程具有可比性。掌握注意事項及其相關技巧有助于高血壓相關實驗研究進一步更好的開展。

【關鍵詞】二腎一夾；高血壓；模型；大鼠

【中圖分類號】R722.12 【文獻標識碼】B【文章編號】1004-4949(2014)07-0030-01

基金項目：長沙醫學院2014年校級大學生研究性學習和創新性驗計劃項目，長醫教〔2014〕10號-91號；2014年湖南省大學生研究性學習和創新性實驗計劃項目，湘教通〔2014〕248號-537號；

高血壓為我國最常見的心血管疾病, 不僅發病因素復雜眾多, 且常有諸多并發癥,為了更好的研究高血壓的發病機制, 闡明各種藥物的作用機理, 并且開發出更多有效的藥物, 眾多醫學工作者成功的建立了多種高血壓的動物模型,，這對人類高血壓病的發病機制、并發癥的發生發展規律及防治措施起了重要的作用［1］。所建立的高血壓大鼠模型亦可分為二大類：自發性高血壓和繼發性大鼠模型，其中又以“二腎一夾”法較為經典、應用較為廣泛。本文即闡述了“二腎一夾”腎性高血壓大鼠（2K1C-RHR）模型建立過程中的些體會感悟。

1.器材

乙醚,七氟醚，蒸餾水，75%酒精，碘酒，青霉素G，不銹鋼U型夾，大鼠固定器，BP-6動物無創血壓測量儀

2.方法

2.1手術過程

取體重在180~220g的健康雄性SD大鼠，術前12h禁食不禁水，在七氟醚誘導、乙醚麻醉下，仰臥位固定手術臺上，頭部及四肢固定，充分暴露腹部，棉花紗布及手術器械經煮沸消毒。于大鼠左側腹部腎臟位置備皮減去毛發，先后用碘酒及75%酒精消毒皮膚，行縱向切口，長2.5~3cm，用止血鉗鈍性分離暴露腎臟，在靠近腹主動脈端用沙氏鑷分離出腎動脈（其標志為牽拉腎動脈腎臟會缺血顏色變白，腎臟皺縮)，用浸有生理鹽水紗布包住腎臟，用玻璃分針小心分離動脈，用一不銹鋼U型夾（內徑0.2mm，厚0.5mm）環繞左腎動脈，夾緊，造成左腎動脈狹窄，右腎不觸及，復位腎臟，檢查有無完全缺血。關閉切口，依次縫合肌肉和皮膚，用碘酒棉球消毒并用消毒紗布進行包扎。

2.2術后處理

術后給予相應保溫措施，手術燈35cm照射未蘇醒麻醉大鼠30min以上，術后腹腔注射青霉素2~3萬單位/只，此后連續三天每天一次，以避免感染。手術后動物以1%鹽水飼喂，持續三周，再以0.5%鹽水飼喂約一周緩沖后停喂鹽水，術后禁食12h后正常飼養。

2.3 相關指標測量

術后3~5天即可測量大鼠尾動脈收縮壓，每周測量二次，每次測壓三次，取其平均值，≥160mmHg（21.28KPa）者可認為是確定為兩腎一夾高血壓大鼠(2KIC—RHR)模型成功，否則為造模淘汰。

3.討論與體會

關于“二腎一夾”（2K1C-RHR）腎性高血壓大鼠模型的幾個值得注意的細節，直接關系到模型建造成功與否。

3.1 手術需嚴格消毒，否則易造成動物感染和死亡

3.2 該模型不是很穩定，維持時間周期不是很長，血壓測量有一定波動［2］

3.3.在分離腎動脈操作過程中應注意避免、保護其分支，如僅造成腎動脈分支狹窄則不能形成預期高血壓模型效果

3.4一般采用成年大鼠，因為幼年大鼠生長相對較為迅速，腎臟對血液需要量增加過快，容易導致腎動脈狹窄后腎壞死［3］，且幼年動物自身動脈就細，血壓不容易升高上去達不到預期效果

3.5手術操作要求較高，手術時分離腎動脈要靠近主動脈端，不然會有分支、撕裂等情況導致造模失敗。

3.7“二腎一夾”高血壓大鼠模型造模采用乙醚吸入麻醉方法，可能出現并發癥，麻醉過深、呼吸暫停。搶救方法：給行人工呼吸，左手扶大鼠頭部使其后仰，左手拇指壓住大鼠左鼻孔，右手用洗耳球或20ml注射器給另一側鼻孔進行通氣處理。

3.8腎動脈的狹窄程度要引起相應重視。在一定范圍內，腎動脈的狹窄水平與動物血壓升高速率和程度成正比例關系。但如果腎動脈狹窄不夠，則動物不能形成高血壓；如果腎動脈狹窄過度，則引起腎壞死，亦可導致嚴重腎功能不全造成動物死亡。故夾閉動脈時的程度不好把控。現在有諸多改良的方法多但大都不穩定，比如腹主動脈結扎，一腎一夾，雙腎雙夾，，要加用參附湯或糖皮質激素等，在手術后飲食上也要給予鹽水和高脂。

參考文獻

［1］ 王東,蔣湘蓮,聶亞雄等.高血壓大鼠模型的研究進展［J］.中國動脈硬化雜志,2006,14(3):271-273,276.

［2］蘇定馮. 血壓波動性在高血壓藥物治療中的意義［J］. 世界臨床藥物,2005,10:21-23+26.

［3］ 劉守鉀.毛茛總苷對大鼠腎性高血壓的影響及有效部位研究［D］.廣東藥學院,2011.DOI:10.7666/d.d155228.