基于吲哚半花菁結構的比值式p H熒光探針

曾 科，周彬彬，龍一國

(1.中南大學化學化工學院，湖南長沙 410083;2.湖南省食品質量監督檢驗研究院，湖南長沙 410000)

具有類花菁染料結構的化合物具有優越的光譜性能［1-3］，當前已被廣泛應用于生物標記［4-5］、熒光成像［6-8］、靶向治療等［9］諸多領域。同時，由于該類分子的光譜性能對周圍環境的變化異常敏感，也常被用于研究溶劑極性性質［10-11］。基于花菁類染料對周圍化學環境敏感這一特點［12］，目前，采用該結構并將其應用于溶液pH值檢測的工作少有報道［13］。顯然，合理設計花菁染料并研究其pH響應過程對該類分子的環境敏感行為研究具有重要意義。

本文設計合成了一種吲哚類半花菁探針，研究了該探針隨pH值變化而產生的光譜性質改變以及其分子結構的影響，并研究了其細胞毒性，希望能為該類染料在生物領域進一步應用提供參考。

1 實驗部分

1.1 試劑與儀器

二甲基亞砜、苯肼、3-甲基-2-丁酮、對羥基苯甲醛均為分析純。

F4600熒光分光光度計;UV-2450紫外-可見分光光度計;Bio-TeK ELx800型酶聯免疫檢測儀。

1.2 實驗方法

探針的合成路線如下:

1-乙基-2-［2-(4-羥基苯基)-乙烯基］-3，3-二甲基吲哚氫碘化物(CyP)

1.2.1 A的合成 將5 mL苯肼和15 mL 3-甲基-2-丁酮加至100 mL圓底燒瓶中，再加入冰醋酸25 mL，加熱，120℃回流反應5 h。將反應溶液倒入約100 g碎冰中，靜置于－20℃冰箱中2 h，取出，倒入分液漏斗，用二氯甲烷萃取，用飽和的氯化鈉溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥，旋蒸除去有機溶劑，用少量二氯甲烷溶解固體產物，用柱層析提純，以石油醚/乙酸乙酯(v/v)=6∶1的混合溶劑作為淋洗液，45℃旋轉蒸發除去淋洗液，得到中間產物A，產率80%。……