關(guān)于抑制急性壞死性胰腺炎細(xì)菌移位的實(shí)驗(yàn)研究

秦?zé)橆?翟曉峰

江蘇省南通市第一人民醫(yī)院胃腸甲乳外科 226001

有關(guān)資料表明，急性壞死性胰腺炎的病原菌主要通過(guò)破損的腸道屏障入血，繼而形成全身感染與膿毒血癥。因此抑制這種細(xì)菌移位對(duì)于控制急性壞死性胰腺炎有著十分重要的作用。目前有關(guān)文獻(xiàn)表明，參附注射液［1］以及清胰利膽顆粒［2］對(duì)于這種細(xì)菌移位作用有著較好的抑制效果。筆者通過(guò)對(duì)人造ANP大鼠模型進(jìn)行藥物實(shí)驗(yàn)，觀察對(duì)比參附注射液與清胰利膽顆粒對(duì)于抑制急性壞死性胰腺炎細(xì)菌移位的作用，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 選取60只SD大鼠作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，由復(fù)旦大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，體重在150～250g之間。將這些大鼠隨機(jī)分為4組，每組15只。這四組大鼠的性別、重量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥品 牛磺膽酸鈉（美國(guó)SIGMA公司出品，批號(hào)：SL04204），氯胺酮注射液（重慶藥友制藥有限責(zé)任公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H50021104），參附注射液（雅安三九藥業(yè)有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字Z51020664），清胰利膽顆粒（吉林省撫松制藥股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字Z22024308）。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 動(dòng)物模型的建立。將60只SD大鼠分為對(duì)照組、ANP（急性壞死性胰腺炎）組、參附注射液組以及清胰利膽顆粒組，每組15只。對(duì)照組大鼠進(jìn)行假手術(shù)，腹腔注射氯胺酮（120mg／kg）進(jìn)行麻醉，后用酒精對(duì)腹部進(jìn)行消毒，消毒3次后對(duì)大鼠進(jìn)行手術(shù)：開(kāi)腹，找到胰腺，翻動(dòng)胰腺5次后將其放回原位，仔細(xì)縫合腹腔，注意手術(shù)需要在完全無(wú)菌的條件下進(jìn)行。ANP組、參附注射液組與清胰利膽顆粒組大鼠進(jìn)行ANP造模，造模方法如下：麻醉、消毒與開(kāi)腹過(guò)程與對(duì)照組相同，待找到胰腺后將牛磺膽酸鈉（3mg／kg）注入胰腺被膜下，注射3min后即可發(fā)現(xiàn)大鼠胰腺有充血水腫的征象，造模完畢關(guān)腹［3］。對(duì)照組與ANP組于術(shù)后6h與12h經(jīng)皮下注射生理鹽水（12ml／kg）作為對(duì)照，參附注射液組于術(shù)后6h與12h經(jīng)皮下注射參附注射液（12ml／kg），清胰利膽顆粒組于術(shù)后6h與12h經(jīng)皮下注射清胰利膽顆粒液（250g／L，12ml／kg），注射完畢后繼續(xù)喂養(yǎng)。

1.3.2 細(xì)菌培養(yǎng)。于18h后初死大鼠，收集下腔靜脈血與腹水。在完全無(wú)菌的條件下取大鼠腸系膜淋巴結(jié)，置于生理鹽水中研磨呈懸液。將所制標(biāo)本放入35℃的溫箱中進(jìn)行培養(yǎng)。1d后統(tǒng)計(jì)細(xì)菌生長(zhǎng)情況，計(jì)算每ml標(biāo)本的細(xì)菌數(shù)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 所有數(shù)據(jù)錄入SPSS19.0軟件進(jìn)行處理，計(jì)量數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)，P＜0.05，差距具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)得知，對(duì)照組的各部位病原菌落計(jì)數(shù)要明顯低于ANP組、參附注射液組與清胰利膽顆粒組（P＜0.01）；參附注射液組與清胰利膽顆粒組的各部位病原菌落計(jì)數(shù)要明顯低于ANP組（P＜0.01）；參附注射液組與清胰利膽顆粒組的各部位病原菌落計(jì)數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），詳細(xì)結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 四組大鼠的各部位病原菌落計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果（±SD）

表1 四組大鼠的各部位病原菌落計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果（±SD）

腸系膜淋巴結(jié)組別 n （×103／g）腹水（×109／ml）下腔靜脈血（×109／ml）0.13±0.06 ANP組 15 359.73±43.87 1 390.76±139.43 878.43±117.46參附注射液組 15 59.52±14.75 387.98±72.09 256.64±54.64清胰利膽顆粒組 15 61.98±15.25 392.58±73.40對(duì)照組 15 33.56±12.98 0.04±0.01 261.36±55.87

3 討論

目前國(guó)內(nèi)學(xué)者認(rèn)為本病病理生理學(xué)變化為胰腺自我消化形成的產(chǎn)物刺激機(jī)體產(chǎn)生炎性介質(zhì)與其他多種細(xì)胞因子，引起淋巴細(xì)胞與巨噬細(xì)胞的聚集，對(duì)體內(nèi)各臟器造成破壞。其中腸道首當(dāng)其沖，表現(xiàn)為腸道黏膜結(jié)構(gòu)破壞，繼而微循環(huán)出現(xiàn)障礙，造成腸道的屏障功能受損，大量細(xì)菌入血播散至身體其他臟器，引起全身感染、膿毒血癥，繼發(fā)多器官功能衰竭。

參附注射液為參附湯加工提煉的產(chǎn)物，其成分有烏頭類(lèi)生物堿與人參皂甙。可以改善腸道的微循環(huán)，增強(qiáng)機(jī)體抵抗力，促進(jìn)胃腸道的蠕動(dòng)，降低腸黏膜的損傷［4］，因而對(duì)于防治上述細(xì)菌移位作用有效。清胰利膽顆粒可以有效地保護(hù)胰腺細(xì)胞，抑制炎性介質(zhì)的作用，減輕內(nèi)毒素血癥，同時(shí)還具有改善腸道黏膜通透性，促進(jìn)腸道蠕動(dòng)，抑制細(xì)菌異常繁殖等作用，故可以減少細(xì)菌移位的發(fā)生。

從本實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)分析得知，參附注射液與清胰利膽顆粒可以有效地抑制急性壞死性胰腺炎的細(xì)菌移位。

［1］張紅，畢旭東，葛春林，等.參附注射液對(duì)實(shí)驗(yàn)性急性壞死性胰腺炎腸道細(xì)菌移位的影響〔J〕.中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合外科雜志，2006，12（5）：485－488.

［2］肖青川，兌丹華，蘭天罡，等.清胰Ⅱ號(hào)顆粒劑對(duì)急性壞死性胰腺炎大鼠腸道細(xì)菌移位的影響〔J〕.中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志，2009，29（10）：905－908.

［3］谷俊朝，秦兆寅，王宇.急性壞死性胰腺炎合并多器官損害實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的建立〔J〕.中華實(shí)驗(yàn)外科雜志，1998，15（3）：395.

［4］劉先義，胡剛，夏中元，等.參附注射液對(duì)大鼠腸缺血再灌注損傷防治作用的實(shí)驗(yàn)研究〔J〕.實(shí)用醫(yī)學(xué)進(jìn)修雜志，2004，32（2）：83.