曹占鳳,王艷,陳秀蓉
(1.甘肅省經濟作物技術推廣站,甘肅 蘭州 730030;2.甘肅中醫學院藥學院,甘肅 蘭州 730000;3.甘肅農業大學草業學院,草業生態系統教育部重點實驗室,中-美草地畜牧業可持續發展研究中心,甘肅 蘭州 730070)
甘肅省甘草病害種類調查及病原鑒定△
曹占鳳1,王艷2*,陳秀蓉3
(1.甘肅省經濟作物技術推廣站,甘肅 蘭州 730030;2.甘肅中醫學院藥學院,甘肅 蘭州 730000;3.甘肅農業大學草業學院,草業生態系統教育部重點實驗室,中-美草地畜牧業可持續發展研究中心,甘肅 蘭州 730070)
目的:為甘草病害綜合防治以及規范化種植提供理論依據。方法:2007~2013年對甘肅省民勤、岷縣、隴西、渭源,蘭州5個市縣的甘草病害進行了田間系統調查和室內病原鑒定。結果:共發現病害7種:褐斑病Cercosporaglycyrrhizae、銹病Uromycesglycyrrhiza、殼二孢輪紋病Ascochytaonobrychidis、灰霉病Botrytiscinerea、白粉病Erysiphesp.、鏈格孢黑斑病Alternariasp.和1種病毒病(毒源待定)。結論:甘肅省生產中甘草褐斑病和銹病發生為害嚴重,應引起重視,并研究安全有效的防控對策。
甘草;病害調查;病原鑒定
甘草GlycyrrhizauralensisFisch.又名烏拉爾甘草、美草、蜜草,為豆科多年生草本植物,是一味大宗藥材。以根和根莖入藥,性平、味甘,有清熱解毒、潤肺止咳、補脾益氣、調和諸藥的功效[1];廣泛分布于我國西北干旱區域的溫帶荒漠區和溫帶草原區域[2],全國以甘肅、寧夏和內蒙古所產甘草品質上乘。甘肅省主要分布于慶陽市以及河西走廊一線[3]。敦煌、瓜州、民勤、高臺、靖遠等地野生甘草面積較大,近年來,肅州、隴西、瓜州、榆中等地栽培甘草亦迅速增加。隨著國內外市場對甘草的需求量不斷增加,供求矛盾十分突出,以往主要靠野生資源供給,長期的濫采濫挖,導致野生甘草資源日趨枯竭,甘草的人工種植面積在逐步擴大。隨著栽培面積逐年擴大,病害發生日趨嚴重。國內記載甘草主要病害有褐斑病Cercosporaastragalis[4-5]、銹病(Uromycesglycyrrhiza/Uromycespunctutatus、白粉病Erysiphesp.[6]、斑點病Phomaherbarum[7]、根腐病Fusariumsp.[8]。2007~2013年對甘肅省野生及栽培甘草進行了病害調查和病原鑒定,旨在為甘草病害綜合防治以及規范化種植提供理論依據。
1.1 調查時期和地點
2007年9月~2013年10月,對民勤縣、渭源縣路原鄉及清源鎮大田,岷縣藥材示范園及大田、隴西藥材示范園及大田、甘肅中醫學院藥材園等5個市縣的32個田塊的甘草,在苗期、成株期、采收期進行了病害調查。
1.2 調查方法
采取五點取樣[9],每點調查十株,記載發病率,嚴重度。采集典型病株,壓制標本,保存并用于室內進行病原鑒定。
1.3 病原鑒定
對采集的標本描述其癥狀,鏡檢病原形態,測定50個孢子的大小。根據癥狀特點、病原形態、大小、參照有關資料[6-14]進行鑒定。
2.1 甘肅省甘草病害的發生情況
經田間系統調查和室內病原鑒定,發現甘肅省甘草病害有7種,其中病毒性病害1種,細菌性病害未見。
甘草褐斑病、銹病發生普遍且嚴重,7~8月高溫季節,降雨多、露時長、濕度大時病害發生嚴重。在我省甘草主栽區均有發生,發病率可達58%~80%,有些田塊發病率≥80%,嚴重度3~5級。育苗地發生較輕,二年生生產田發生嚴重。栽培甘草病害重于野生甘草。其余病害均發生在栽培地甘草。殼二孢輪紋病主要分布于隴西和岷縣,發病率15~20%,嚴重度1~2級;灰霉病主要分布于隴西和岷縣,發病率46%,嚴重度2~3級。白粉病輕度發生,主要分布于岷縣和民勤;鏈格孢黑斑病輕度發生,主要分布于涼州區和岷縣。病毒病7~8月在渭源輕度發生。
2.2 甘草病害癥狀及病原鑒定
2.2.1 甘草褐斑病 癥狀:主要為害葉片。葉部產生中型(2~8 mm)病斑,通常在葉脈一側或主脈與側脈分叉處的三角區發生,呈多角形、不規則形、長條形,褐色至黑褐色,病斑邊緣清晰或不清晰,環境潮濕條件下,斑上產生黑色點狀霉狀物,后期病斑上覆蓋一層厚厚的黑色霉狀物,及病菌的分生孢子梗及分生孢子。嚴重發病時,病斑相互連接,葉片變為淡紅褐色至紫黑色,大量脫落。葉柄上病斑長條形、長橢圓形,淡紫紅色至淡紫褐色。
病原:病原菌為有絲分裂孢子真菌中的甘草尾孢Cercosporaglycyrrhizae(Sǎvulescu & Sandu)Chupp。渭源路原標樣為:子座生于葉面,近球形、橢圓形,淡灰褐色,大小37.6~62.3 μm×29.4~47.0(平均50.7×39.8)μm(見圖1A);子座上有分生孢子梗9~34根束生,灰褐色,無隔,稍彎曲,頂部近平截,較圓,稍變狹,不分枝,具膝狀節,孢痕明顯,大小25.9~44.7 μm×3.5~4.7 μm(平均32.7×3.8)μm。(見圖1B、C);分生孢子無色,鼠尾狀、鞭狀、直或稍彎曲,基部粗,上部細,0~6個隔膜,多為2~4個隔膜,基部平截,大小33.4~119.4 μm×2.3~4.5 μm(平均73.4×3.6)μm。有的分生孢子很長,達144.59~206.65 μm(平均176.6 μm),具11~12個隔膜(見圖1D)。
渭源清源鎮及隴西標樣:分生孢子梗簇生(多5根以上),淡褐色至褐色,具0~3個隔膜,大小14.1~34.1×4.7 μm。分生孢子無色、淡青褐色,透明,直或稍彎曲,基部平截,頂端鈍圓,具3~9個隔膜,多為5~6個,大小44.7~134.4 μm×1.8~4.1 μm(平均71.0×3.4)μm,未見典型子座結構。

A.分生孢子座 B、C.分生孢子梗 D.分生孢子圖1 Cercospora glycyrrhizae
2.2.2 甘草銹病 癥狀:葉片、莖稈均受害。初期葉片正面癥狀不明顯,葉背面產生灰白色、灰黃色,圓形皰斑,后增大呈半球狀,表面光亮,表皮破裂后露出黃褐色夏孢子堆并散出夏孢子。發病嚴重時,整個葉片覆蓋夏孢子堆,引起葉片至全株葉片枯死。后期在葉片兩面產生黑褐色冬孢子堆,并散出黑粉。
病原:病原菌為真菌界擔子菌門甘草單胞銹菌Uromycesglycyrrhiza(Rabenh.)Maga.。夏孢子球形、近球形、橢圓形,淡黃色至淡黃褐色,表面有小刺,大小20.0~35.3 μm×17.6~23.5 μm(平均26.9×20.0)μm。冬孢子卵圓形、橢圓形,單胞,褐色,表面光滑,頂端明顯加厚,有無色短柄,孢子大小20.0~32.9 μm×15.3~18.8 μm(平均28.1×18.6)μm(見圖2)。

圖2 Uromyces glycyrrhiza冬孢子
2.2.3 甘草殼二孢輪紋病 癥狀:葉面產生中型(8~12 mm)圓形、橢圓形病斑,褐色,其上有輪紋,后期生有黑色小顆粒,即病菌的分生孢子器。
病原:病原菌為為有絲分裂孢子真菌中驢豆殼二孢AscochytaonobrychidisBond.-Mont.。分生孢子器扁球形、近球形,黑褐色,直徑179.2~201.6(平均189.9)μm,高143.3~170.2(平均157.7)μm。分生孢子具1個隔膜,無色,圓柱形、長橢圓形,兩端圓,隔膜處隘縮或不隘縮,大小8.2~15.3 μm×4.7~5.9(平均11.8×5.2)μm。(見圖3)。為國內新寄主。

圖3 Ascochyta onobrychidis分生孢子
2.2.4 甘草灰霉病 癥狀:主要為害葉片。病害多自葉尖或葉片中部產生大中型(10~22 mm)圓形、半圓形病斑,紅褐色、粉紅褐色,病斑表面稍現粉狀。病健組織交界處不明顯,葉背有稀疏的褐色絲狀物。
病原:病原菌為有絲分裂孢子真菌中灰葡萄孢BotrytiscinereaPers.。分生孢子梗褐色,有隔,長寬1 343.7~1 432.0 μm×12.9~23.5 μm,頂部分支垂直,分支末端聚生分生孢子。分生孢子單胞,無色,卵圓形、橢圓形,大小18.8~25.9 μm×10.6~15.3μm(平均21.7×12.9)μm,孢子有小柄。
2.2.5 甘草白粉病 癥狀:葉片、葉柄、嫩莖均受害。初期葉部產生圓形小型(4~6 mm)白色粉斑,后擴大連片,以至整個葉片覆蓋白粉,病部組織變黃,引起落葉,未見產生閉囊殼。
病原:病原菌為有絲分裂孢子真菌中的白粉菌屬Erysiphesp.。分生孢子單胞,無色,圓柱形、腰鼓形,大小23.5~36.5 μm×10.6~15.3 μm(平均29.2×12.1)μm。閉囊殼球形,近球形,大小33.0~68.8 μm(平均50.6 μm);附屬絲菌絲狀,長寬5.5~52.2 μm×2.5~4.8 μm(平均22.6×3.5)μm;子囊多個,袋狀,大小23.2~35.1 μm×14.5~24.4 μm(平均30.2×18.6)μm。
分布:岷縣、民勤。發病程度:輕度發生。
2.2.6 甘草鏈格孢黑斑病 癥狀:多自葉尖或葉緣發生,向內擴展呈半橢圓形至橢圓形病斑,褐色、淡褐色,后期中部變黑褐色,生有少量霉層。
病原:病原菌為為有絲分裂孢子真菌中的鏈格孢屬Alternariasp.。分生孢子倒棍棒狀,孢子大小32.9~71.7 μm×10.6~15.3 μm(47.1×12.9)μm,有短喙,具4~8橫隔膜及少數縱隔膜。隔膜處隘縮。
本菌與國內文獻記載的豆科中的四種病菌明顯不同,故種待定。
2.2.7 病毒病 癥狀:葉部產生淡綠與深綠相間的花葉,嚴重時,葉片畸形。
病原:毒源待定。

A.閉囊殼 B、C.子囊圖4 Erysiphe sp.

圖5 Alternaria sp. 分生孢子
3.1 關于甘草褐斑病
自甘肅省渭源縣路原鄉一帶采集的標樣具有典型的子座結構,且分生孢子生長良好,有的分生孢子是隴西標樣的2.5倍。這與該地潮濕溫暖的環境條件有關,而隴西以及渭源其他干旱地區的標樣上無典型子座結構,且很難形成孢子。國內陸家云、韓金生報道甘草褐斑病是由黃芪尾孢Cercosporaastragalis引起[4-5],劉錫進記載為甘草假尾孢Pseudocercosporacavarae引起[12],寧夏報道是由星形短梗霉Napicladiumasteroma引起,據甘肅省標樣觀察,甘草褐斑病的病原為甘草尾孢Cercosporaglycyrrhizae。
3.2 甘草褐斑病和銹病
在各個甘草產區發病率均在80%以上,嚴重度達3~5級,每年在甘草生長季節,發生非常普遍且嚴重,引起早期的葉片脫落、植株衰弱、枯死,是甘草生產區的主要病害。因此對于這兩種病害需進行生物學特性、病害循環及發病條件以及防治方法等系統深入的研究,并開展藥劑防治。
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DiseaseSurveyandPathogenIdentificationofGlycyrrhizauralensiinGansuProvince
CAO Zhanfeng1,WANGyan2*,CHENXiurong3
(1.GansuProvincialCashCropsTechnologyExtensionCentre,Lanzhou730030,China;2.GansuCollegeofTraditionalChineseMedicine,Lanzhou730000,China;3.CollegeofPrataculturalScience,GansuAgriculturalUniversity;KeyLaboratoryofGrasslandEcosystem(GansuAgriculturalUniversity),MinistryofEducation;Sino-U.S.CenterforGrazinglandEcosystemSustainability,Lanzhou730070)
Objective:Provide theoretical foundation for integrated disease control and standard cultivation ofGlycyrrhizauralensi.Methods:Field survey and morphology pathogen identification of wild and cultivated Glycyrrhiza uralensi were conducted in Minqin,Minxian,Longxi,Weiyuan,Lanzhou during 2007 to 2013.Results:Seven diseases have been found:brown spot(Cercosporaglycyrrhizae),rust(Uromycesglycyrrhiza),ring spot(Ascochytaonobrychidis),grey mould(Botrytiscinerea),powdery mildew(Erysiphesp.),black spot(Alternariasp.)and a virus disease.Conclusion:Brown spot and rust are the serious diseases.The safety and efficient control methods need to be developed.
Glycyrrhizauralensi;Disease survey;Pathogen identification
2014-07-03)
國家自然基金項目(31460013);甘肅省中藥材產業科技攻關項目(GYC13-03);甘肅省中藥材產業科技攻關項目(GYC11-01)
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王艷,副教授,從事藥用植物病理學研究。Tel(0931)8489713,E-mail:gswangyan101@163.com
10.13313/j.issn.1673-4890.2014.12.012