丹參地上部分糖類(lèi)成分的動(dòng)態(tài)變化△

葛婷，鄭云楓，崔健，夏彥銘，黃利，彭國(guó)平

(南京中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院，江蘇 南京 210023)

丹參地上部分糖類(lèi)成分的動(dòng)態(tài)變化△

葛婷，鄭云楓*，崔健，夏彥銘，黃利，彭國(guó)平

(南京中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院，江蘇 南京 210023)

目的：研究丹參地上部分中糖類(lèi)成分及其動(dòng)態(tài)變化。方法：用HPLC-ELSD法分別測(cè)定丹參地上部分中糖類(lèi)成分的含量。結(jié)果：丹參地上部分中含有葡萄糖、麥芽糖、水蘇糖等，在不同生長(zhǎng)期中，基本呈現(xiàn)有規(guī)律的變化，10～12月份總糖的含量較高。結(jié)論：丹參地上部分中存在糖類(lèi)成分，為丹參地上部分的開(kāi)發(fā)利用提供了一定的理論基礎(chǔ)。

丹參；地上部分；糖類(lèi)成分；動(dòng)態(tài)變化

中藥丹參為唇形科鼠尾草屬植物丹參SalviamiltiorrhizaBge.的干燥根及根莖，是最常用的活血化瘀中藥之一，首載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，具有去瘀止痛、養(yǎng)血安神的功效[1]。目前研究的丹參有效成分主要為水溶性的丹酚酸類(lèi)[2]、脂溶性的丹參酮類(lèi)[3]以及糖類(lèi)成分[4]。丹參藥材用量大，國(guó)內(nèi)已大量栽培，而其地上部分直接丟棄，造成了資源的浪費(fèi)。

近年來(lái)，醫(yī)藥界對(duì)丹參地上部分興起了新的研究熱潮，已發(fā)現(xiàn)含有酚酸類(lèi)、黃酮類(lèi)等成分[5-7]。現(xiàn)代研究表明，中藥低聚糖及多糖成分具有良好的藥理活性[8-9]，有關(guān)丹參地上部分中是否含有糖類(lèi)成分的研究未見(jiàn)報(bào)道，本文對(duì)丹參地上部分中的糖類(lèi)成分進(jìn)行了分析和含量測(cè)定，并比較了不同生長(zhǎng)期的丹參地上部分中3種糖類(lèi)成分的動(dòng)態(tài)變化，旨在為更好的開(kāi)發(fā)利用丹參地上部分提供理論參考。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Waters 2695 HPLC 色譜系統(tǒng)、Alltech ELSD 2000蒸發(fā)光散射檢測(cè)器、HS色譜數(shù)據(jù)工作站V4.0+(Waters公司)，AE240型電子分析天平(瑞士Mettler)。

1.2 試藥

葡萄糖對(duì)照品(0844-200003)、麥芽糖對(duì)照品(100287-200601)、水蘇糖對(duì)照品(851787)購(gòu)自Sigma-Aldrich公司。乙腈為色譜純，水為亞沸蒸餾水，其余試劑均為分析純。

丹參供試樣株位于江蘇省南京市南京中醫(yī)藥大學(xué)藥用植物園內(nèi)，經(jīng)南京中醫(yī)藥大學(xué)巢建國(guó)教授鑒定為丹參SalviamiltiorrhizaBge.的植株。從2013年1月～12月，每月14日左右采集同一區(qū)域內(nèi)的丹參地上部分(莖、葉)。采集完成后各樣品經(jīng)統(tǒng)一處理：置陰涼通風(fēng)處，晾至近干，置鼓風(fēng)干燥箱于50 ℃烘干，粉碎過(guò)40目篩，真空包裝，避光冷藏保存。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

采用Prevail Carbohydrate ES(250 mm×4.6 mm，5 μm)為色譜柱，乙腈-水(67∶33)為流動(dòng)相，體積流量為1.0 mL·min-1；ELSD漂移管溫度90 ℃，載氣為空氣，載氣流量為3.0 L·min-1；柱溫為35 ℃；進(jìn)樣量：10 μL。對(duì)照品及樣品色譜圖見(jiàn)圖1。

A.混標(biāo)對(duì)照品 B.丹參莖 C.丹參葉1.葡萄糖 2.麥芽糖 3.水蘇糖圖1 丹參地上部分樣品HPLC-ELSD色譜圖

2.2 對(duì)照品溶液的制備

分別精密稱取葡萄糖、麥芽糖、水蘇糖對(duì)照品12.00 mg、19.80 mg、14.64 mg置10 mL量瓶中，用水溶解并加水至刻度，搖勻，制成每1 mL分別含葡萄糖1.200 mg、麥芽糖1.980 mg及水蘇糖1.464 mg的對(duì)照品儲(chǔ)備溶液。再準(zhǔn)確移取儲(chǔ)備溶液1.0、2.5、5.0和7.5 mL于10 mL量瓶中，用水稀釋配制成不同濃度的系列混合對(duì)照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備

取丹參地上部分粗粉約2 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加水50 mL，稱定重量，加熱回流1 h，放冷，再稱定重量，用水補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.4 線性關(guān)系

分別精密吸取5種不同濃度的混合對(duì)照品溶液10 μL，注入高效液相色譜儀，按2.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，以峰面積對(duì)數(shù)值(Y)對(duì)質(zhì)量濃度(μg·mL-1)對(duì)數(shù)值(X)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程。結(jié)果見(jiàn)表1，表明各糖類(lèi)化合物在試驗(yàn)質(zhì)量濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

表1 3種糖類(lèi)化合物的線性回歸方程

2.5 精密度試驗(yàn)

取混合對(duì)照品溶液，按2.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，重復(fù)進(jìn)樣6次，葡萄糖、麥芽糖、水蘇糖峰面積的RSD分別為2.13%、2.86%、2.12%，說(shuō)明該方法的精密度良好。

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一供試品溶液分別在0，2，4，6，8，12 h進(jìn)樣分析，葡萄糖、麥芽糖、水蘇糖峰面積的RSD分別為2.04%、2.78%、2.13%，表明供試品溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.7 重復(fù)性試驗(yàn)

按2.3項(xiàng)下方法供試品溶液制備方法，對(duì)同一樣品進(jìn)行6次平行試驗(yàn)，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件分別進(jìn)行測(cè)定，測(cè)得葡萄糖、麥芽糖、水蘇糖峰面積的RSD分別為2.15%、2.69%、2.54%。說(shuō)明該方法的重現(xiàn)性良好。

2.8 加樣回收率試驗(yàn)

取丹參地上部分，稱取1 g，精密稱定，共6份，2份一組，每組按相當(dāng)于樣品含量的80%，100%，120%分別精密加入3種對(duì)照品，按2.3項(xiàng)下方法制備供試品溶液，并按2.1項(xiàng)下色譜條件分別進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算回收率。葡萄糖的平均回收率為103.1%(RSD=2.97%)；麥芽糖的平均回收率為102.8%(RSD=2.21%)；水蘇糖的平均回收率為97.9%(RSD=2.69%)。

2.9 樣品測(cè)定結(jié)果

按照2.3項(xiàng)下方法制備各丹參地上部分的供試品溶液，再按照2.1項(xiàng)下相應(yīng)的測(cè)定方法測(cè)定峰面積，并由標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各樣品中葡萄糖、麥芽糖、水蘇糖含量。

圖2 丹參不同生產(chǎn)期地上部分糖類(lèi)成分的動(dòng)態(tài)變化

從圖中可以看出，丹參地上部分的糖類(lèi)成分的含量總體來(lái)看呈上升趨勢(shì)，葡萄糖含量為0.5%～2.5%，麥芽糖含量為0.6%～4.0%，水蘇糖含量為0.6%～4.1%，總糖含量為2.0%～9.7%，12月份的總糖含量最高。

3 分析與討論

含量測(cè)定的結(jié)果表明，丹參地上部分中含有葡萄糖、麥芽糖、水蘇糖等，總糖含量介于2.0%～9.7%，10～12月份丹參地上部分的總糖含量較高。1月至6月總糖含量較低，6月至12月總糖含量曲線上升，并在12月份達(dá)到最高值，12月至1月為總糖含量迅速減少階段。總糖含量出現(xiàn)上述波動(dòng)的原因除實(shí)驗(yàn)誤差外還可能與丹參的生長(zhǎng)周期有關(guān)。1～6月份丹參地上部分是從枯萎至新生的過(guò)程，加上氣溫低，總糖含量較少，6～12月份，丹參幼苗長(zhǎng)出，新生出莖葉部分，并趨于成熟，丹參地上部分的糖不斷累積增加，12～1月份，丹參進(jìn)入生長(zhǎng)末期，地上部分逐漸枯萎，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗，總糖含量大大下降。其中開(kāi)發(fā)價(jià)值較高的水蘇糖、麥芽糖在10月份時(shí)達(dá)到峰值，這為丹參非藥用部位的綜合開(kāi)發(fā)提供了理論依據(jù)。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，冬季時(shí)丹參地上部分總糖含量最高，為實(shí)現(xiàn)中藥資源綜合利用的最大化，冬季時(shí)采收效果最佳。

丹參地上部分中不僅含有丹酚酸類(lèi)、丹參酮類(lèi)成分，也含有糖類(lèi)成分。在中藥丹參加工過(guò)程中，其地上部分大多直接丟棄，若能對(duì)這一資源加以充分利用，將對(duì)中藥資源利用、丹參植物經(jīng)濟(jì)發(fā)展起到積極的推動(dòng)作用。

[1] 趙娜，郭治昕，趙雪，等.丹參的化學(xué)成分與藥理作用[J].國(guó)外醫(yī)藥·植物藥分冊(cè)，2007，22(4)：155-160.

[2] 唐娜，杭太俊，葉正良，等.丹參提取物中酚酸類(lèi)成分穩(wěn)定性及降解動(dòng)力學(xué)研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2013，24(7)：1631-1633.

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StudyonDynamicChangesofCarbohydrateComponentsintheAerialPartsofSalviamiltiorrhiza

GE Ting，ZHENGYunfeng*，CUIJian，XIAYanming，HUANGLi，PENGGuoping

(PharmacyCollegeofNanjingUniversityofTraditionalChineseMedicine，Nanjing210023，China)

Objective：To Study the carbohydrate components in the aerial parts ofSalviamiltiorrhizaand their dynamic changes.Mehtods：HPLC-ELSD method was used for analyzing contents of carbohydrate components in the aerial parts ofS.miltiorrhizarespectively.Results：Aerial parts ofS.miltiorrhizacontain glucose，maltose，stachyose，etc.In different growth period，the changes of carbohydrate components are regular the higher amount of total carbohydrate components is from October to December.Conclusion：Aerial parts ofS.miltiorrhizahave carbohydrate components，it provides a theoretical basis for the development and utilization of aerial parts ofS.miltiorrhiza.

Salviamiltiorrhiza；Aerial parts；Carbohydrate components；Dynamic change

2014-07-23)

江蘇省自然科學(xué)基金(SBK201123752)；大學(xué)生實(shí)踐創(chuàng)新訓(xùn)練項(xiàng)目(201310315037Z)

*

鄭云楓，副研究員，研究方向：中藥活性成分與質(zhì)量評(píng)價(jià)；Tel：(025)86798186；E-mail：zyunfeng88@126.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2014.12.006