異型淋巴細胞的檢驗與傳染性單核細胞增多癥的診斷

郭振宇 余婷婷

傳染性單核細胞增多癥(infectious monouc leosis, IM)簡稱傳單［1］, 又名腺性熱。是由Epstoin-Barr(EB)病毒感染所引起的一種淋巴細胞反應性良性增生的急性或亞急性傳染病, 本病好發于兒童及青少年。由于該病可累積全身各個器官, 導致臨床表現多樣化, 故僅臨床表現診斷非常困難。作為本病的診斷依據之一, 異型淋巴細胞的檢驗能簡單、經濟、快速篩選出大部分與本病臨床表現相似的病例, 進而達到確認的目的, 因而異型淋巴細胞的檢驗在傳染性單核細胞增多癥的診斷中具有非常重要的作用。但在臨床上, 尚有部分檢驗工作者不能正確的檢驗異型淋巴細胞, 給臨床診斷帶來困難。本文將對異型淋巴細胞的產生機理、形態分類、檢驗與報告等方面作一個詳盡的闡述, 以利于檢驗的工作。

1 異型淋巴細胞的產生機理及其特點

異型淋巴細胞也稱非典型淋巴細胞、病毒細胞、刺激性淋巴細胞、傳染性單核細胞等。臨床通常將異型淋巴細胞增高用于診斷傳染性單核細胞增多癥, 而近年來有研究發現,異型淋巴細胞在自身免疫性疾病、肝炎病毒、流感病毒、原蟲、細菌、螺旋體感染性疾病及腫瘤等疾病中也存在增高現象, 其為臨床診斷帶來一定的困難。當EB病毒進入易感者體內后, 即感染瓦爾代爾(Waldeyer)扁桃體的B淋巴細胞并進行復制, 然后通過病毒血癥或受染的B淋巴細胞散播而感染其他部分的B淋巴細胞。病毒復制導致B淋巴細胞的死亡, 病毒顆粒及病毒決定抗原被釋放后刺激了特殊的免疫反應。在疾病早期, 部分受感染B細胞中的病毒復制即被抑制而成為帶有EB病毒基因的B細胞, 此類B細胞具有被淋巴細胞檢出的膜抗原(lymphocyte ditected membrane antgen), 能被T殺傷細胞所識別, T殺傷細胞因被刺激而增殖。此時血中出現異型淋巴細胞, 即被EB病毒感染的B淋巴細胞及受

刺激的T細胞。異型淋巴細胞的主要特點為胞體較大, 胞漿具有較強的嗜堿性, 經胸腺嘧啶標記技術研究發現, 在細胞S期階段, 電鏡下可見胞漿內產生大量核糖體及擴張的內質網。正常人群血液中異型淋巴細胞十分少見, 當發生大量病毒感染或其他原因時, 異型淋巴細胞比例升高, 當升高幅度>10%～20%時, 診斷價值最為理想。

2 異型淋巴細胞的定義及其分類

異型淋巴細胞是由于感染、刺激而引起的發生了形態學及功能上改變的淋巴細胞。1923年Downey將異型淋巴細胞分為三類：Ⅰ型(漿細胞型或泡沫型)：中等度大, 胞核偏位,呈橢圓形、分葉形或腎形, 染色質呈粗顆粒狀或粗網狀, 胞質嗜堿性強, 呈深藍色, 豐富, 含有大小不等的空泡或呈泡沫狀, 無顆粒或少量嗜苯胺藍顆粒；Ⅱ型(單核細胞樣型或不規則型)：胞體較大似單核細胞, 外形不規則, 常有多個偽足呈花過狀, 核呈圓形或不規則形, 染色質較Ⅰ型細致, 胞質量較豐富, 呈淺灰藍色, 有透明感, 邊緣處著色較深, 一般無空泡, 少有嗜天青顆粒；Ⅲ型(幼稚淋巴細胞樣型或幼稚型)：胞體較大, 核呈圓形或橢圓形, 染色質呈細網狀, 可見1～2個核仁, 胞質豐富, 深藍色, 無顆粒, 可見少量空泡。另《血液病形態診斷學》編者認為, 異型淋巴細胞可分為五型：Ⅰ型,單核細胞型；Ⅱ型, 漿細胞型；Ⅲ型, 幼稚型；Ⅳ型, 原始型；Ⅴ型, 排除上述四種的其他異型淋巴細胞統歸此型。現在全國及世界檢驗學界, 一般都從于前者, 即Downey分型說。

3 異型淋巴細胞的檢驗與報告

異型淋巴細胞雖然在形態學上變化較大, 但是由于其正常的淋巴細胞及其他白細胞在形態學上有著顯著的差別, 故一般可在鏡下進行檢驗報告。檢驗時用普通血片經瑞氏染色后, 在油鏡下分數100個或200個白細胞, 計數其中異型淋巴細胞的個數, 求出異型淋巴細胞在白細胞內所占的百分比即可。可報告為“未見異型淋巴細胞”或“異型淋巴細胞：X%”。值得注意的是, 由于現代血細胞計數儀的廣泛應用,在一般醫療單位做“血常規＋異型淋巴細胞”時, 較多的檢驗工作者先是在儀器上做完血常規, 將打印結果貼在報告單上后, 再分數血片中100個白細胞, 計算出異型淋巴細胞百分比, 填在報告上。作者認為, 這種做法不當, 因為異型淋巴細胞報告為其占白細胞的百分比, 若按上述做法, 則有異型淋巴細胞加各類白細胞的和>100%, 故此不妥。應將打印報告中淋巴細胞項減去異型淋巴細胞后才可報告為淋巴細胞百分比, 或將白細胞全部做鏡下分類報告之。異型淋巴細胞的正常參考值為0%～4%, 血常規檢查中將異型淋巴細胞比例>4%判定為儀器法陽性。涂片法將異型淋巴細胞比例>4%判定為陽性, 二者均為診斷異型淋巴細胞的“金標準”。

4 異型淋巴細胞檢驗對傳染性單核細胞增多癥診斷的作用

一直以來, 臨床將外周血異型淋巴細胞比例>10%作為診斷IM的標準, 近年來, 隨著電腦自動化檢測方法的廣泛使用, 使檢驗人員鑒別細胞形態的能力相對下降, 其在一定程度上導致異型淋巴檢出率有所降低。在國內, 傳染性單核細胞增多癥有如下的診斷標準［2］：①臨床表現：變化多端, 有著較高的漏診率和誤診率；②實驗室檢查：a.血象, 主要為異型淋巴細胞>10%, 陽性率高, 可達30%甚至90%以上；b.嗜異性凝集試驗, 有10%的青年及成人患者嗜異性凝集試驗為陰性, 5歲以下的兒童嗜異性凝集試驗也常為陰性, 故雖然其陽性時可以確診, 但是陰性時卻不可排除；c.EB病毒抗體測定, 特異性高, 但復雜, 一般實驗室無法開展。IM患者發熱初期異型淋巴細胞多檢測不到或僅表現為輕度升高, l周后外因血異型淋巴細胞可增加至10%以上, 因而異型淋巴比值低于10%, 此時應多次復查異型淋巴細胞和血常規。經過多年臨床實踐［3-5］, 多項研究認為將診斷標準異型淋巴細胞比例由10%降至8%或6%較為合適。對外因血異型淋巴細胞比值高于6%的患兒, 醫生應結合臨床做EB病毒抗體檢測或嗜異性凝集試驗, 以進一步確診。

5 小結

異型淋巴細胞的檢驗對傳染性單核細胞增多癥的診斷和鑒別診斷具有非常重要的作用, 在臨床上應引起檢驗工作者的足夠重視, 并應用于實踐中去, 更好的為人民群眾的健康服務。

參考資料

［1］鄧家棟.臨床血液學.上海：上海科學技術出版社, 1985:770-774.

［2］張元南.血液病的診斷與療效標準.北京:科學出版社, 1998:252-257.

［3］劉淑玲, 任淑媛.異型淋巴細胞計數在傳染性單核細胞增多癥診斷中的應用.北京醫學, 2011, 33(5):436-438.

［4］劉瑞明, 丁信軍, 楊曉艷, 等.血液異型淋巴細胞檢測結果的實驗室分析.吉林醫學院學報, 2012, 23(2):98-99.

［5］張峰, 李鳳巧.異型淋巴細胞與轉氨酶聯合檢測診斷傳染性單核細胞增多癥.哈爾濱醫藥, 2009, 27(5):39-42.