冠狀動脈粥樣硬化性心臟病患者血清MMP-2、-9及IL-6水平及意義

肖憲杰 紀煥春

(大連醫科大學附屬第一醫院心內二科，遼寧 大連 116000)

冠狀動脈粥樣硬化斑塊的主要成分是細胞外基質，細胞外基質的含量、厚度可維系斑塊的穩定性，也為心血管組織細胞提供一種連接，可能在損傷后的心臟重塑過程中提供結構上的完整性〔1，2〕。細胞外基質合成減少和降解增加是斑塊破裂主要的內在原因，而基質金屬蛋白酶(MMPs)對細胞外基質的降解是動脈粥樣硬化斑塊易損的重要因素，MMP能夠降解細胞外所有的基質成分〔3〕。研究證明，斑塊中的巨噬細胞可分泌多種MMP，其中MMP-2和MMP-9在冠狀動脈粥樣硬化斑塊破裂中起著重要的作用〔4〕。本研究主要觀察冠心病患者血清MMP-2和MMP-9水平，為冠心病的程度和嚴重性評估提供依據。

1 材料和方法

1.1臨床資料 納入2011年1月至2013年10月來本院住院的冠心病患者97例，患者按照不同的類型分為三組：不穩定型心絞痛患者39例(UAP組)、急性非ST段抬高心肌梗死患者30例(NSTEMI組)和急性ST段抬高心肌梗死患者28例(STEMI組)。納入患者符合美國心臟病學會(ACC)、美國心臟病協會(AHA)制定的診斷標準〔5〕。均排除嚴重的瓣膜病、嚴重的腎功不全、嚴重的肝功不全、嚴重的甲狀腺疾病和惡性腫瘤疾病。另外納入30例健康體檢者(對照組)，患者身體健康，無心血管疾病、無內分泌系統疾病及肝腎疾病。NSTEMI組患者的平均年齡顯著高于對照組；NSTEMI組和對照組性別比例差別不大，STEMI組和UAP組男性患者明顯高于女性(P<0.05)；此外，冠心病組伴糖尿病患者明顯多于對照組(P<0.05)；其他基線資料方面組間比較無顯著性差異。見表1。

1.2方法

表1 不同類型冠心病患者及對照組基本資料分析

1.2.1標本 所有待測者在入院后第2天清晨空腹抽取靜脈血5 ml，室溫下靜置30 min后3 000 r/min，離心10 min，分離血清，儲存于-70℃冰箱中待測。

1.2.2MMP-2、MMP-9和白細胞介素-6(IL-6)的測定 采用酶聯免疫疫吸附法(ELISA)測定血清MMP-2、MMP-9和IL-6的濃度〔6〕，試劑盒購于上海酶聯生物工程研究所，所有操作按試劑盒說明書進行。

1.2.3Western印跡檢測各組MMP-2和MMP-9蛋白的表達 常規勻漿、離心制備組織蛋白提取液(40 μg)，提取上樣8%聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)進行還原性十二烷基硫酸鈉(SDS)-PAGE電泳，脫脂，然后把膠中的蛋白轉印到硝酸纖維素膜上，封閉液1%磷酸鹽緩沖液(PBS)封閉非特異性結合位點，過夜，分別滴加MMP-2和MMP-9單克隆抗體稀釋，二氨基聯苯胺(DAB)顯色。

2 結 果

2.1各組MMP-2、MMP-9和IL-6水平的檢測結果 三組冠心病患者與對照組比較，MMP-2、MMP-9和IL-6水平均明顯增高，其中STEMI組MMP-2和MMP-9比其他兩組增高明顯(P<0.05)，冠心病患者IL-6與MMP-2和MMP-9的相關系數分別為(r=0.547，P<0.01)和(r=0.478，P<0.01)，但三組患者間沒有明顯的差別。見表2。

表2 各組患者血清MMP-2、MMP-9和IL-6水平比較±s)

2.2Western印跡比較各組MMP-2和MMP-9蛋白的水平 三組冠心病患者的MMP-2和MMP-9蛋白均明顯高于對照組，且STEMI組患者升高最明顯，與ELISA結果相符。見圖1。

圖1 各組MMP-2和MMP-9蛋白水平

3 討 論

大部分冠心病患者均有嚴重的冠狀動脈硬化性狹窄，這是由于冠狀動脈內含有斑塊造成。老年冠狀動脈病變程度嚴重，多支血管病變，復雜病變、彌漫病變、鈣化病變多〔7〕。大規模、回顧性的聯合心血管計劃研究結果表明，50%以上確診冠心病的患者入院時均合并血糖升高〔8〕。這類患者預后和存活率更差。因而對冠心病的治療，血糖異常的處理同樣非常重要。

現已經明確冠狀動脈斑塊破裂、觸發血栓形成是導致冠心病的一個主要原因〔9〕。血栓可以是附壁的，可以導致不同程度的管腔狹窄，引起不穩定性心絞痛，并進一步導致梗死、猝死。所以，粥樣斑塊是預防治療冠心病的關鍵。而細胞外基質是預防斑塊的關鍵，合成減少或降解增多使斑塊的完整性受損，進而導致斑塊破裂〔10〕，MMPs是一組能夠降解細胞外基質的酶類，尤其是MMP-2和MMP-9在這個過程中起著關鍵的作用，可以通過加強動脈粥樣硬化斑塊纖維骨架中膠原降解，影響斑塊穩定性。萬招飛等〔3〕認為冠心病患者動脈彈性與血清炎癥因子高敏C反應蛋白及MMP-9均呈明顯負相關。鞠云楓等〔11〕結果表明冠心病患者血清MMP-2水平明顯升高，并且MMP-2水平與冠狀動脈內徑狹窄程度呈正相關，可能參與了冠心病的發生發展過程。本研究與以往國內外的研究相符。

在AS引起冠心病的不同類型中，MMPs對斑塊破裂、炎癥都發揮重要作用〔12〕。表明IL-6與MMP-2和MMP-9可以作為冠心病風險預測的指標。可能還有其他MMPs及炎癥因子參與其中，有待進一步研究。

4 參考文獻

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