急性腦梗死患者血漿非對稱性二甲基精氯酸與血清同型半脫氯酸的相關(guān)性

佘瑞芳 劉建華 周 彥 伏 兵 錢明月 張照婷 陳皆春

(蚌埠醫(yī)學(xué)院附屬連云港醫(yī)院，江蘇 連云港 222000)

同型半胱氨酸(Hcy)是心腦血管病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。近年來有研究提出非對稱性二甲基精氨酸(ADMA)也可能是一個(gè)心腦血管疾病危險(xiǎn)因子，并可預(yù)示心腦血管病的患病風(fēng)險(xiǎn)和病死率〔1〕。然而，血漿ADMA與急性腦梗死患者血清Hcy有無關(guān)聯(lián)及其相互作用的病理生理機(jī)制如何，目前相關(guān)文獻(xiàn)較少。本研究擬探索急性腦梗死患者血漿ADMA與血清Hcy水平的相關(guān)性，以期為臨床提供一種急性腦梗死病情判斷的指標(biāo)，并為缺血性腦卒中探尋新的治療靶點(diǎn)。

1 對象與方法

1.1對象 選取2012年12月至2013年7月蚌埠醫(yī)學(xué)院附屬連云港醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院的急性腦梗死患者及體檢中心同期健康體檢者共186例，急性腦梗死組126例，男73例，女53例，平均(63.44±9.92)歲；健康體檢者60例為對照組，其中男34例，女26例，平均(63.85±8.57)歲。兩組性別、年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。急性腦梗死組納入標(biāo)準(zhǔn)：首次發(fā)病；年齡40～80歲；病程72 h內(nèi)；梗死位于前循環(huán)供血區(qū)；符合全國第四屆腦血管病會議修訂的腦梗死診斷標(biāo)準(zhǔn)〔2〕，并經(jīng)頭顱CT/MRI/DWI等影像學(xué)證實(shí)；知情同意，依從性好。排除標(biāo)準(zhǔn)：有嚴(yán)重感染或自身免疫性疾病；有腦腫瘤、腦出血、出血性腦梗死；近3個(gè)月有心肌梗死病史；心房顫動(dòng)、甲狀腺疾病、嚴(yán)重心肝腎功能不全。對照組納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡、性別與急性腦梗死組相匹配既往無腦血管病史。

1.2方法 急性腦梗死組依據(jù)美國國立衛(wèi)生研究所卒中量表評分(NIHSS)進(jìn)行神經(jīng)功能缺損程度評估，根據(jù)分值分為輕型梗死組(<4分)、中型梗死組(4～15分)、重型梗死組(>15分)〔3〕。標(biāo)本采集：所有患者于入院后第二天清晨空腹時(shí)，用肝素鋰抗凝管及普通生化管收集新鮮靜脈血各3 ml，離心(3 000 r/min,10 min)，吸取血漿-80℃保存；普通生化管中的血清用于檢測Hcy濃度。血漿ADMA采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)進(jìn)行檢測，試劑盒及質(zhì)控品購自北京九強(qiáng)生物技術(shù)股份有限公司，操作完全按照說明書進(jìn)行。血清Hcy采用ADVIA Centaur CP全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光分析儀及其配套試劑，由檢驗(yàn)科進(jìn)行檢測。

2 結(jié) 果

2.1ADMA及Hcy水平與急性腦梗死的關(guān)系 輕型、中型、重型梗死組的血漿ADMA水平均高于對照組(均P<0.01)。不同神經(jīng)功能損傷程度組間多重比較，輕型梗死組與中型梗死組、重型梗死組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.017,P=0.000)；中型梗死組與重型梗死組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.010)。血清Hcy輕型梗死組與對照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；中、重型梗死組與對照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。Spearman相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)血漿ADMA及血清Hcy水平均與神經(jīng)功能缺損程度呈正相關(guān)(r=0.392,0.406;P<0.01)。

表1 不同神經(jīng)功能缺損程度與對照組血漿ADMA及血清Hcy比較±s)

2.2血漿ADMA與一般生化指標(biāo)的相關(guān)性分析 Pearson相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，血漿ADMA濃度與TG、LDL、Hcy水平均呈正相關(guān)(r=0.812、0.806、0.885，均P<0.01)；與HDL、葉酸呈負(fù)相關(guān)(r=-0.801、-0.728，均P<0.01)。多因素線性逐步回歸分析，血漿ADMA濃度隨Hcy水平的升高而增加，呈線性趨勢(回歸系數(shù)B=2.404，P<0.01)。

3 討 論

ADMA作為一種主要的內(nèi)源性一氧化氮合酶抑制劑，非選擇性抑制一氧化氮合酶的各種亞型，進(jìn)而使一氧化氮對血管的保護(hù)作用受損〔4,5〕；此外，ADMA本身作為直接的損傷因子可誘發(fā)氧化應(yīng)激反應(yīng)，加速內(nèi)皮細(xì)胞衰老，介導(dǎo)多種炎癥因子生成,誘發(fā)炎癥反應(yīng)，促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞增殖、內(nèi)膜增生，影響內(nèi)皮細(xì)胞的黏附性，促使單核細(xì)胞、白細(xì)胞黏附于血管內(nèi)皮；抑制血管新生，促進(jìn)巨噬細(xì)胞向泡沫細(xì)胞轉(zhuǎn)化等，從而導(dǎo)致血管內(nèi)皮功能紊亂、動(dòng)脈粥樣硬化、腦組織缺血缺氧等。Jia等〔6〕研究發(fā)現(xiàn)血漿ADMA水平與腦梗死病灶大小呈正相關(guān)，提示通過測定血漿ADMA水平能反映中樞神經(jīng)細(xì)胞的損傷和死亡程度，對血漿ADMA濃度的監(jiān)測，能提供判斷腦梗死病灶大小的定量信息及病情嚴(yán)重程度情況。本研究提示血漿ADMA水平能反映急性腦梗死患者病情的嚴(yán)重程度，與金艷等〔7〕結(jié)果基本相同。

目前認(rèn)為Hcy誘發(fā)腦梗死的可能機(jī)制有〔8,9〕：促進(jìn)超氧化物及過氧化物的產(chǎn)生，損傷血管內(nèi)皮，誘發(fā)小動(dòng)脈血管栓塞；刺激血管平滑肌細(xì)胞增殖，參與動(dòng)脈粥樣硬化過程；促使巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)化為泡沫細(xì)胞，引起血管壁脂肪堆積，進(jìn)一步加重動(dòng)脈粥樣硬化形成；增加血小板聚集，激活V因子等，并可抑制抗凝，增加血栓形成；促使LDL氧化，導(dǎo)致脂質(zhì)沉積，加重血管壁硬化；還可干擾谷胱甘肽的生物學(xué)活性及影響機(jī)體的轉(zhuǎn)甲基化反應(yīng)。本研究發(fā)現(xiàn)，急性腦梗死各亞組血清Hcy水平高于對照組，并與神經(jīng)功能缺損程度呈正相關(guān)。

ADMA與Hcy在轉(zhuǎn)甲基代謝過程中存在著密切聯(lián)系，PRMT-1以S-腺苷甲硫氨酸為甲基供體發(fā)生轉(zhuǎn)甲基反應(yīng)，使蛋白質(zhì)甲基化的同時(shí)產(chǎn)生S-腺苷高半胱氨酸；S-腺苷高半胱氨酸在體內(nèi)可逆性轉(zhuǎn)化為Hcy，而含甲基精氨酸殘基的蛋白質(zhì)在蛋白水解酶作用下分解產(chǎn)生ADMA。分析兩者的代謝聯(lián)系可推測，Hcy可直接或通過氧化應(yīng)激反應(yīng)增加活性氧族物質(zhì)產(chǎn)生間接抑制DDHA活性，使ADMA分解減少；通過上調(diào)PRMT基因表達(dá)，增加ADMA生成；另外，Hcy還可誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，誘發(fā)細(xì)胞凋亡，使含甲基精氨酸殘基的蛋白質(zhì)分解增加，使ADMA釋放增多〔10〕。兩者不僅在合成及代謝途徑中存在密切聯(lián)系，而且在病理生理過程中亦存在關(guān)聯(lián)。ADMA水平升高是Hcy導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化及心腦血管疾病病理過程的重要中間環(huán)節(jié)，在Hcy致病機(jī)制中起著關(guān)鍵性作用。Bǒger等〔11〕首先在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)Hcy與ADMA存在相關(guān)性。后漸有研究表明，Hcy與ADMA在腦血管病〔12〕、急性心肌梗死〔13〕等疾病中存在著密切聯(lián)系。

綜上所述，血漿ADMA及血清Hcy可作為腦梗死后腦損傷的敏感標(biāo)記物。此外，Hcy可使ADMA合成增多、降解減少，兩者水平存在正相關(guān)性；并且ADMA是Hcy導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化及心腦血管疾病病理過程的關(guān)鍵中間環(huán)節(jié)。從而推測，給予服用降低Hcy濃度的維生素(如葉酸、維生素B12、維生素B6等)，有可能在降低Hcy的同時(shí)使ADMA水平降低、致病性減弱，進(jìn)而為缺血性腦卒中探尋新的治療切入點(diǎn)。

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