弗林蛋白酶、轉移抑制基因23和血管內皮生長因子在老年眼瞼基底細胞癌中的表達及意義

樊秀婷

(復旦大學附屬中山醫院青浦分院眼科，上海 201700)

腫瘤發生與基因或蛋白異常表達有關。弗林蛋白酶(Furin)是最早發現的哺乳動物前體蛋白加工酶，其底物非常廣泛，包括多種凝血因子、激素、生長因子和基質金屬蛋白酶等〔1，2〕。研究認為Furin異常表達對腫瘤發生和進展有一定關系〔3,4〕。轉移抑制基因(nm)23是抑制腫瘤發展的基因，研究顯示nm23低表達時，不僅使微管聚合異常引起減數分裂時紡錘體異常，還可以使細胞骨架改變引起細胞運動，對腫瘤浸潤和轉移均起明顯作用〔5〕。血管內皮生長因子(VEGF)是促進腫瘤血管生成的重要因子，其高表達可以引起血管內皮增殖，加速腫瘤生長〔6〕。本研究檢測老年眼瞼基底細胞癌中Furin、nm23和VEGF蛋白表達及其相關性與臨床意義。

1 材料和方法

1.1臨床資料 收集我院近3年行眼瞼基底細胞根治術的老年患者共79例，常規留取組織蠟塊，病例均經病理醫師再次閱片確診，并嚴格符合世界衛生組織(WHO)中的診斷標準。男40例，女39例，年齡60～82歲，平均68.7歲。選擇同期在我院行基底細胞乳頭狀瘤切除后的蠟塊56例作為對照組，其中男30例，女26例，年齡60～81歲，平均68.1歲。收集腫物切緣經病理證實為正常皮膚組織的56例作為正常對照組，其中男28例，女28例，年齡61～80歲，平均68.0歲。3組一般資料無明顯差別(P均>0.05)。

1.2Furin、nm23和VEGF蛋白的檢測 Furin、nm23和VEGF蛋白的檢測應用免疫組化二步法。三種抗體均購自武漢博士德生物工程公司，應用DAB染色。操作均按說明書進行，嚴格質控，減少誤差。

1.3Furin、nm23和VEGF結果的判斷方法 Furin、nm23和VEGF均以細胞質中觀察到棕黃色為陽性反應細胞，計數6個400倍視野，以陽性細胞≥25%定為陽性，以陽性細胞<25%定為陰性。計算陽性率。

1.4統計學分析 采用SAS6.12軟件進行χ2檢驗和線性相關性分析。

2 結 果

2.1Furin、nm23和VEGF蛋白在3組中表達陽性率的比較 正常對照組、對照組、觀察組中Furin和VEGF的表達依次升高，而nm23的表達依次降低(P均<0.000 1)。見表1。

2.2觀察組不同臨床特征患者Furin、nm23和VEGF蛋白表達陽性率的比較 觀察組中Furin、nm23和VEGF的表達與腫瘤的最大徑、脈管浸潤和TNM分期密切相關。見表2。

2.3觀察組中Furin、nm23和VEGF表達的相關性分析 Furin和VEGF的表達正相關(r=0.44，P=0.043 0)。Furin和nm23的表達負相關(r=-0.49，P=0.034 8)。

表1 Furin、nm23和VEGF蛋白在3組中表達陽性率的比較〔n(%)〕

表2 觀察組不同臨床特征患者Furin、nm23和VEGF蛋白表達陽性率的比較〔n(%)〕

3 討 論

基底細胞癌多見于老年人，好發于面部較突出的部位，開始時為一個棕黃色或暗褐色浸潤性小結節，較典型者為蠟樣、半透明狀結節、有高起卷曲的邊緣。組織學見表皮內基底細胞呈巢狀，邊緣呈柵欄狀排列，可有角質囊腫，浸潤性生長，病變進展快時，呈大片狀侵襲性壞死，可以深達軟組織和骨組織。在病變發生和進展時，多種蛋白異常表達可以調節腫瘤的發展進程。Furin可在多種組織中表達，主要定位于反式高爾基體，在細胞膜中也可有少量分布，并在這些部位參與多種底物分子的加工活化〔7～9〕。nm23是抑癌基因和蛋白，通過其產物核苷二磷酸激酶影響細胞內信號傳導系統，同時影響微管、微絲等細胞骨架系統的運動，nm23也參與細胞周期的有效調控，有效抑制腫瘤細胞的生長和播散〔10〕。黃秀英等〔11〕通過對93例乳腺癌的標本檢測nm23的表達，發現nm23低表達，認為nm23低表達時參與了乳腺癌的惡性轉化和轉移擴散過程。王良君等〔12〕通過在眼瞼基底細胞癌中觀察nm23的表達，發現nm23在腫瘤中均陰性表達，認為nm23是較好的腫瘤的抑制基因。VEGF不僅可以促進腫瘤間質的血管新生，還可以判斷腫瘤的預后。研究顯示VEGF對血管生成的促進作用表現為多種方面〔13〕，主要是促進基質中CD34、CD31、CD105陽性血管的生成，此時腫瘤的營養豐富，供氧增加，腫瘤的生成速度加快，代謝增強，侵襲性增加〔14〕。

本實驗結果提示Furin、nm23、VEGF異常表達對腫瘤的發生和進展有重要的促進作用。Furin的作用可能具有多元性，不僅能夠與腺瘤性息肉病基因(APC)、軸蛋白(AXIN1)和金屬整合素蛋白(ADAM)等互相作用〔15〕，還可能與細胞質中的β-catenin結合而起作用，進而對信號轉導進行干預〔16〕。有觀點認為Furin還可能在細胞分化的核轉錄調控通路中發揮作用〔17〕。本文提示Furin、nm23和VEGF異常表達可以加速腫瘤的生長和對周圍組織的侵犯，同時能加速腫瘤的進展，由于以上因素均與判斷基底細胞癌的預后相關，因此聯合檢測Furin、nm23和VEGF異常表達可能是判斷腫瘤預后的相關指標。Furin可能是促進腫瘤血管生成的重要指標，此時Furin可能通過促進VEGF表達發揮其生物學功能，二者具有協同作用，也提示Furin在促進腫瘤進展過程中可能與抑制nm23有關。

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