中老年頰黏膜癌組織中Ki-67蛋白的表達及臨床意義

徐亞娟 張艷秋 金志巍 劉素梅 劉文書

(吉林省腫瘤醫院口腔頜面腫瘤外科,吉林 長春 130012)

頰黏膜癌是一種常見的惡性腫瘤，其中90%以上是鱗癌。正常頰黏膜細胞轉化為癌細胞的重要環節是細胞過度分裂與增殖，可通過對細胞增殖活性的研究，探索口腔癌發生、發展過程的機制。Ki-67 是反映細胞增殖的標志性抗原，其表達高低可反映細胞增殖活性。本研究初步探討Ki-67在頰黏膜鱗癌組織中的表達及臨床意義，為臨床診治提供一種新思路。

1 資料與方法

1.1一般資料 我科2009年1月至2012年1月收治的住院患者中35 例頰黏膜癌、15 例正常頰黏膜組織手術標本。術前均未接受放、化療。所有病例均由明確的病理診斷確診。35例頰黏膜癌患者中男20例，女15例，年齡40～80歲，平均60歲；有淋巴結轉移18例，無淋巴結轉移17例;臨床分期中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期分別有7、12、11、5例;病理分級中高、中、低分化分別有13、14、8例。同期切取15例癌旁組織(距癌邊緣≥5 cm)作為對照組，年齡40～60歲，平均50歲。所有標本均經10%甲醛溶液固定，石蠟包埋，4 μm厚連續切片。

1.2檢測方法 免疫組化染色，所有病理標本均為石蠟標本，作石蠟連續切片2張。鼠抗人Ki-67單克隆抗體兔抗人多克隆抗體購自北京中山公司。抗原修復液為pH6.0 檸檬酸。DAB 顯色。用PBS緩沖液(購自北京中山金橋) 代替一抗作陰性對照，細胞質或細胞核中呈現棕黃色染色顆粒為陽性細胞。

1.3結果判定 Ki-67定位于胞核，陽性染色細胞呈淺棕色或棕黃色。在400倍鏡下按陽性細胞數占總細胞數分為4級。(-)：無陽性細胞，為陰性;(+)：陽性細胞10%～30%;()：陽性細胞30%～60%;()：陽性細胞>60%。

1.4統計學方法 應用SPSS18.0 軟件行χ2檢驗。

2 結 果

2.1兩組Ki-67表達情況 Ki-67陽性表達主要定位于細胞核，兩組陽性率比較(頰黏膜鱗癌組80.0% vs 癌旁組織組26.7%)差異有統計學意義(P<0.05)。其中(+) 28 vs 4例，(-)7 vs 11例。

2.2Ki-67 蛋白的表達與口腔鱗癌臨床病因素的關系 Ki-67的異常表達與淋巴結轉移、分化程度和TNM分期有關(P<0.05);在陽性淋巴轉移組呈高表達，在淋巴轉移陰性組呈低表達，差異有統計學意義(P<0.05)；在高、中、低分化組隨分化程度降低而升高，差異有統計學意義(P<0.05)；與年齡、性別及腫瘤大小無關(P>0.05)。見表1。

表1 Ki-67蛋白表達與頰黏膜鱗癌臨床病理因素的關系(n)

2.3Ki-67在頰黏膜癌中表達與預后關系 本組患者術后62例獲得隨訪，隨訪率為94%，隨訪時間2～100個月。Ki-67低表達組中位生存時間49個月。

3 討 論

Ki-67為細胞增殖的一種標記，參與細胞周期的調控，可作為診斷和預測腫瘤對治療的敏感度及其結局等方面的標志物，在腫瘤的分級、增生程度、預后的預測中均具有一定的意義。Ki-67單克隆抗體可標記G1中后期、S期、G2期和M期細胞核抗原。研究表明其過度表達提示細胞增殖過度，是較理想地反映腫瘤細胞增殖活性的指標，已經證實其與細胞增殖、病變惡性程度密切相關〔1，2〕。本研究結果與相關文獻〔3，4〕報道一致。

Ki-67蛋白的異常表達與淋巴結轉移、分化程度和TNM 分期有關，可能與頰黏膜鱗癌發生、發展、侵襲和轉移關系密切。本研究表明Ki-67能可靠反映細胞的增殖活性，可作為頰黏膜癌發生、發展的重要指標之一。另外，頰黏膜癌的發生通過其表達產物作用于細胞生長、分化及代謝過程，最終導致癌變。Ki-67有望成為頰黏膜癌生物學行為的參考指標。檢測Ki-67在頰黏膜癌中表達可以有助于判斷頰黏膜癌的惡性程度、分期及預后，對指導臨床診斷和治療有重要意義。

4 參考文獻

1Bologna-Molina R，Mosqueda-Taylor A，Lopez-Corella E，etal.Comparative expression of syndecan-1 and ki-67 in peripheral and desmoplastic ameloblastomas and ameloblastic carcinoma〔J〕.Pathol Int， 2009；59(4)：229-33.

2Pei DS，Qian GW，Tian H，etal.Analysis of human Ki-67 gene promoter and identification of the sp1 binding sites for Ki-67 transcription〔J〕. Tumour Biol，2012；33(1)：257-66.

3Yoshida T，Sano T，Kanuma T，etal.Usefulness of cintec(r) plusp16 /Ki-67 double-staining in cytological screening of cervical cancer〔J〕. Acta Cytol，2011；55(5)：413-20.

4Wiwanitkit V. Ki-67 as proliferative marker of thyroid〔J〕.Indian J Cancer，2011；48(3):378.