新疆維吾爾族彌漫性大B細胞淋巴瘤患者免疫學亞型及預后分析

賈存東 楊麗麗 岳 娜 趙 峰 梁莉萍 趙 兵 劉 煒 吐爾遜江·艾力 白靖平

(新疆醫科大學附屬腫瘤醫院化療科,新疆 烏魯木齊 830011)

彌漫大B細胞淋巴瘤(DLBCL)是新疆地區維吾爾非霍奇金淋巴瘤(NHL)最常見的病理亞型之一〔1〕。研究表明采用Choi法對 DLBCL進行免疫學分型能較好地與基因表達譜(GEP)吻合并有助于其預后評估〔2〕。新疆地區維吾爾族DLBCL具有獨特的臨床及預后〔3〕。目前尚不明了新疆維吾爾族DLBCL的免疫學亞型分布及預后意義。本研究應用免疫組織化學方法檢測維吾爾族DLBCL患者GCET1、FOXP1、CD10、bcl-6、MUM1的表達，并進行免疫學分型。

1 資料與方法

1.1研究對象 選擇新疆醫科大學附屬腫瘤醫院病理科2007年1月至2013年6月確診的新疆維吾爾族DLBCL共78例。所有標本均為甲醛固定、石蠟包埋組織。按 WHO(2008)淋巴瘤分類標準，所有病例均經組織形態學和免疫組化分析明確診斷為DLBCL。78例患者中，男50例，女28例，確診時中位年齡50歲(14～84歲)；按Ann Arbor分期標準，Ⅰ期5例,Ⅱ期37例,Ⅲ期22例,Ⅳ期14例；確診時病變僅累及淋巴結42例(53.8%)，病變累及結外36例(46.2%)，累及的結外器官包括：胃腸道11例，肌肉及軟組織7例，腎臟4例，甲狀腺3例，睪丸3例，肝臟、乳腺、宮頸各2例，卵巢與腮腺各1例；確診時按美國東部腫瘤協作組 (ECOG)判定體力狀態 (PS),PS評分0～1分73例(93.6 %)；2分5例(6.4%)； 19.2%(15/78 )的患者乳酸脫氫酶(LDH)高于正常水平；14.1%(11/78)患者伴有B癥狀；根據國際預后指數(IPI)：低危組(IPI 0～1) 59例、低中危組(IPI 2)10例、中高危組(IPI 3)6例、高危組(IPI 4～5)3例。74例患者采取了CHOP(CTX 、ADM、VCR、PDN)或ECHOP(VP-16、CTX、ADM、VCR 、PDN)方案作為一線治療，3例患者采用了RCHOP(Rituximab、CTX、ADM、VCR、PDN)方案作為一線治療方案。二線治療方案主要有：CHOP方案、DHAP(DDP、Ara-C、DXM)、DICE(DXM、IFO、DDP、VP-16)、ESHAP(VP-16、MP、DDP、Ara-C)、ICE(VP-16、CBP、IFO)、GemOX(gemcitabine、oxaliplatin)方案等。

1.2方法 試劑：GCET1、FOXP1、CD10、bcl-6、MUM1及二抗，均為北京中杉金橋生物技術有限公司生產。免疫組化染色：采用Envision二步法檢測腫瘤組織中的GCET1、FOXP1、CD10、bcl-6、MUM1的表達。DLBCL的免疫組化分型：采用Choi分類將DLBCL分為生發中心樣B細胞(GCB)DLBCL和非生發中心樣B細胞(non-GCB)DLBCL兩大類型。Choi分類法〔2～4〕如下： GCET1+，根據MUM1判斷，MUM1-為GCB-DLBCL，MUM1+為non-GCB-DLBCL；如GCET1-，則根據CD10判斷，CD10+判斷為GCB-DLBCL，若CD10-則根據bcl-6判斷，如bcl-6-，為non-GCB-DLBCL，如bcl-6+，根據FOXP1判斷，如FOXP1+為non-GCB-DLBCL，FOXP1-為GCB-DLBCL。

1.3隨訪 隨訪采用門診隨訪和電話隨訪。隨訪截止日期為2013年11月30日。總生存時間指治療開始日期至死亡、最后隨診日期或截止觀察日期，以月為單位。

1.4統計學方法 應用SPSS16.0軟件，計數資料用χ2檢驗；生存分析采用Kaplan-Meier法；用Log-rank法比較組間生存率。

2 結 果

2.1DLBCL的免疫組化及分型 CD10、bcl-6、MUM1、GCET1、FOXP1的陽性率分別為19.2%(15/78)、24.4% (19/78)、62.8%(49/78)、30.8%(24/78)、53.8%(42/78)。 CD10、bcl-6、MUM1、GCET1、FOXP1在維吾爾族DLBCL腫瘤組織中的表達：GCB型DLBCL與non-GCB型DLBCL所占比例為29.5% (23/78)、70.5% (55/78)。CD10、bcl-6、MUM1、GCET1、FOXP1的表達與DLBCL的IPI均無相關性(P<0.05)。見圖1。

圖1 CD10、bcl-6、MUM1、GCET1、FOXP1在維吾爾族DLBCL腫瘤組織中的表達(×200)

2.2生存情況及多因素分析 至隨訪截止日期，中位隨訪時間為26個月(5～85個月)，患者死亡41例，生存37例，死亡原因主要為疾病進展或復發。全組患者中位生存時間為28個月(95%CI：24.6～31.4個月),3年總生存率(OS)為46%。GCB組DLBCL與non-GCB組DLBCL的3年OS分別為58%與39%，差異有統計學意義(P<0.05)，新疆地區維吾爾族GCB組DLBCL與non-GCB組DLBCL的生存曲線見圖2。多因素分析顯示，IPI及Choi免疫學分型是新疆吾爾族DLBCL患者的獨立預后因素(P<0.01)。

圖2 維吾爾族GCB型DLBCL與non-GCB-DLBCL的生存曲線

3 討 論

DLBCL的發病具有種族及地域的特征。國外研究〔5,6〕結果顯示，GCB型DLBCL占DLBCL比例略多于non-GCB型所占比例，且GCB型DLBCL的OS較non-GCB型DLBCL高。而國內報道〔7,8〕，按免疫表型的相關模型分類，漢族non-GCB型DLBCL占大多數，大約占DLBCL的70%。本研究結果與國內的報道基本一致〔4,7〕，提示新疆維吾爾族DLBCL的免疫學亞型分布可能與漢族DLBCL基本相似，故上述兩組人群DLBCL的發病機制可能存在共性，但尚需大樣本的對照研究證實。

目前評價DLBCL預后的體系是根據IPI將DLBCL患者分為低危、低中危、中高危組和高危組。但具有相同IPI值的DLBCL患者可以表現完全不同的預后，提示還有其他因素對DLBCL的預后產生了影響。早期的研究表明，采用GEP方法，將不同細胞起源的DLBCL分為GCB型DLBCL與non-GCB型DLBCL，二者具有不同的預后。因GEP檢測費用較昂貴而未能在臨床常規使用。最近有研究顯示，采用Choi法對DLBCL進行免疫學分型能夠較好地與GEP檢測相吻合，可判斷DLBCL的預后〔2〕。但也有研究提示采用免疫組化法對DLBCL進行免疫學分型并不能與GEP分型較好吻合〔6〕，而關于采用免疫表型的相關模型來預測DLBCL的預后仍存在較多爭議〔8～10〕。本研究結果提示需聯合檢測GCET1、FOXP1、CD10、blc-6、MUM1方能預測DLBCL的預后〔4〕。

在利妥昔單抗治療DLBCL時代，利妥昔單抗可以提高DLBCL患者的生存及預后〔11〕。有研究〔10,12〕報道R-CHOP方案能夠顯著改善non-GCB組DLBCL的生存從而使GCB組DLBCL與non-GCB組DLBCL的生存無顯著差異，故有學者認為在利妥昔單抗治療，免疫學分型在DLBCL中的預后作用顯著減弱。本組研究結果顯示，Choi分類法有助于新疆地區維吾爾族DLBCL的預后，且OS較低可能與絕大多數患者未采用利妥昔單抗治療有關。因此Choi分類法在不同的治療模式下對DLBCL的意義尚需深入研究。

綜上，通過應用免疫組織化學方法檢測GCET1、FOXP1、CD10、bcl-6、MUM1的表達及按Choi分類法有助于維吾爾族DLBCL的分型診斷，新疆維吾爾族DLBCL以non-GCB型為主，Choi分類法有助于新疆維吾爾族DLBCL的預后判斷。

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