MMP-2、MMP-9含量表達與喉癌侵襲轉移的相關性

吳慶蓮 舒 暢

(大慶油田總醫(yī)院集團龍南醫(yī)院，黑龍江 大慶 163453)

喉癌是威脅人類生命的重要疾病，在癌癥發(fā)病之前或早期及時采取必要的預防和治療措施是攻克癌癥的一大貢獻〔1〕。隨著對喉癌發(fā)病機制的深入研究，基質金屬蛋白酶(MMPs)MMP-2、MMP-9被證實與喉癌的發(fā)生、發(fā)展、浸潤及轉移密切相關〔2〕。本研究應用雙抗體夾心法檢測不同時期喉癌患者血清中MMP-2、MMP-9含量變化，旨在為人喉癌的侵襲、轉移及預后判斷提供客觀指標。

1 材料與方法

1.1材料 68例喉癌患者血清均為我院住院病人提供，均有病理及CT影像診斷，其中男45例，女23例，中位年齡56歲，全部病例為喉鱗狀細胞癌。根據(jù)美國抗癌協(xié)會第7版TNM分期T116例，T224例，T318例，T410例。病理分級：I級18例，Ⅱ級26例，Ⅲ級24例， MMP-2、MMP-9試劑購于北京中山生物試劑公司。

1.2方法 取-70℃冰箱內凍存的人喉癌血清做1∶100稀釋，分別加入含有MMP-2、MMP-9抗體的酶標板內，100 μl/孔，4復孔，置37℃恒溫培養(yǎng)箱內反應60 min,取出后磷酸鹽緩沖液(PBS)洗3次，5 min/次,每孔內加入酶標抗體工作液100 μl，置37℃恒溫培養(yǎng)箱內靜止60 min,取出后甩干，PBS洗3次，加入鄰苯二胺工作液100 μl，避光保溫10 min，每孔內加入終止反應液50 μl，立即于酶標儀波長492 nm處測OD值，根據(jù)標準品OD值在半對數(shù)坐標紙上作圖，查出MMP-2、MMP-9含量，結果乘以稀釋倍數(shù)即為MMPs含量。

2 結 果

2.1兩組血清中MMP-2、MMP-9含量比較 喉癌病人血清中MMP-2、MMP-9含量表達與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，尤其是喉癌轉移組含量升高非常明顯。見表1。

表1 喉癌病人與對照組血清中MMP-2、MMP-9含量表達比較

2.2喉癌病人血清中MMP-2、MMP-9含量與病理分級關系 喉癌病人血清中MMP-2、MMP-9與病理分級呈正相關，即病理分級越高，MMP-2、MMP-9含量亦升高明顯，Ⅰ級、Ⅱ級、Ⅲ級之間相比差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 喉癌病人血清中MMP-2、MMP-9含量表達與病理分級的關系

2.3喉癌患者血清中MMP-2、MMP-9含量表達與臨床分期的關系 MMP-2、MMP-9含量與臨床分期有關，T1、T2兩組間MMP-2、MMP-9含量接近，無統(tǒng)計學意義；而T1、T2分別與T3、T4相比差異非常顯著。見表3。

表3 喉癌病人血清中MMP-2、MMP-9含量表達與臨床分期的關系

3 討 論

喉癌的浸潤和轉移是多步驟的復雜過程，首先是癌細胞自原發(fā)灶脫落，然后進入血道或淋巴道，從而形成遠處轉移，但基底膜和細胞外基質的降解是其中的必要條件，而MMP-2、MMP-9是一類鋅離子依賴性激酶，幾乎能降解細胞外基質的所有成分及基底膜，從而為血管內皮細胞的遷移和新生血管的延伸創(chuàng)造必要條件〔3〕，因而成為腫瘤治療的靶點。因為喉癌的臨床分期是制定臨床決策的主要因素，如果臨床分期錯誤，特別是分期低估可造成嚴重后果〔4〕。所以，準確的臨床分期及選擇合理的治療顯得尤為重要，MMPs含量檢測可作為臨床分期的參考指標。

文獻〔5〕報道，腫瘤組織類型和分化程度決定腫瘤行為及預后的關鍵因素。因此，掌握喉癌組織病理學和分子生物學特征，將有助于選擇早期篩查腫瘤標志物和有針對性的治療方案尤顯重要。

總之，MMP-2、MMP-9含量變化與喉癌臨床分期及病理分級有密切關系，臨床分期及病理分級越高，表明腫瘤浸潤范圍擴大，而MMPs活性也隨之升高，可準確反映喉癌的發(fā)生、發(fā)展情況，動態(tài)檢測其含量對喉癌的預后判斷有一定臨床意義。

4 參考文獻

1李萌碩，陳俊輝.外周血管表達譜在腫瘤診斷中的應用〔J〕.國際腫瘤學雜志，2013；40(10)：745-8.

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4Perigny M,Bairati I,Harvey I,etal.Role of immunohistochemical overexpression of matrix metalloproteinases MMP-2 and MMP-11 in the prognosis of death by ovarian cancer〔J〕.Am J Clin Pathol,2008；129(2):226-31.

5El-Kenawy Ael-M,Lotfy M,El-Kott A,etal.Significance of matrix metalloproteinase 9 and CD34 expressions in esophageal carcinoma；correlation with DNA content〔J〕.J Clin Gastroenterol,2005;39(9)：791-4.